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經過近30年的發展革新，電轉染已成為基因的功能研究領域中不可或缺的技術手段。下文不僅是一篇新上市的轉染儀器的介紹，更是電轉染儀技術革新的介紹，因為： NEPA21高效基因轉染系統 ------擁有全球領先的專利電脈沖芯片技術和全新的電轉染程序設計 NEPA GENE公司專業研發、生產細胞電轉染儀及電融合儀等，其生產CUY21......閱讀全文
1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用，并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單，在直流電場作用的瞬間，細胞膜表面產生疏水或親水的微小通
1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115
全球公認的最高效轉染技術，針對免疫細胞、神經細胞、干細胞等幾乎所有的難轉染細胞系或原代細胞，以及懸浮細胞。 ——Amaxa品牌Nucleofector細胞核轉染技術 Amaxa?Nucleofector?技術是Lonza(原Amaxa)公司的專利創新技術，它綜合應用傳統的電穿孔技術及細胞特異性
電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時,無法造成細胞膜表面狀態的改變,因而外源D不能進入細胞內。電壓過高時,局部組織積聚過多熱量,造成細胞的死亡或組織失去功能,即使外源基因導入細胞,也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多為20
IS PCR的技術特點 （1）既具有PCR的特異性與高靈敏性，又具有原位雜交的定位準確性；（2）測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列，甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA；（3）有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析；（4）可用于正常或惡性細胞，感染或非感染細胞的鑒定
BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因編輯摘要近期，CRISPR/Cas9系統被廣泛地應用于突變體小鼠的構建，但是借助于微注射方法很大程度上限制了基因編輯于高通量上的應用。這篇文章中，我們闡述了一個簡單，高效，大規模的基因編輯方法：即借助于電轉染將RNAs轉入卵，而不是通過
肝 臟由于肝臟的生理代謝十分旺盛，因此外源基因在肝臟中的表達時間往往很短暫，而且表達產物的水平也較低。為減少出血，可從小靜脈注入，然后在肝臟上施加電場，能顯著增強基因的表達。睪 丸相對于其他的轉基因方法，活體電穿孔法可使外源基因在睪丸中產生大量和持久的表達。此外，很多研究人員希望利用活體電穿孔法將外
植物細胞轉化 （系統：ECM630/830） 對植物原生質（玉米、煙草等）及完整植物的電穿孔可以用于產生對農業/園藝有用的轉基因作物。植物細胞轉化的一個主要目的是對植物細胞進行穩定轉化以產生具有優良品
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ 細胞系和細胞類型 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyce
一、細胞轉染途徑轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于物理介導技術；化學介導方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術；生物介導方法，有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。1、物理介導（1）電穿
基因療法是指將正常基因植入靶細胞代替病人細胞中的遺傳缺陷基因，或關閉、抑制異常表達的基因，以達到預防和醫療疾病目的的一種臨床醫療技術。在治療遺傳性疾病、惡性腫瘤、癌癥、艾滋病病毒（HIV）、關節炎、糖尿病、腺苷脫氫酶(ADA)缺陷癥、神經系統紊亂、心臟病等疾病方面，基因療法發揮著越來越重要的作用。基
最近，CRISPR/Cas9系統也應用于靶基因的抑制（CRISPRi）或激活（CRISPRa)的遺傳修飾。這類修飾系統可用于研制相應致癌基因，和/或抑制TSGs基因的誘導和可逆激活小鼠模型。比如借助CRISPRa為基礎的系統，通過激活致癌基因的轉錄，達到研究其致癌潛力的目的。雖然CRISPR/Cas
（3）CHO細胞穩定表達系統：動物細胞瞬時表達系統中外源基因沒有穩定地整合到宿主細胞染色體中，一染色體外DNA的形式存在。因而只能瞬時表達。要使外源基因在宿主細胞中高效、穩定地表達，必須建立一個穩定表達系統，包括適宜的表達載體、有效的基因轉染、標記基因和目標基因的選擇與共擴增、受體適當的受體細胞和培
細胞轉染是指將外源分子如DNA，RNA等導入真核細胞的技術,它是研究基因表達調控，突變分析等的常規工具。細胞轉染分為瞬時轉染和穩定轉染。瞬時轉染是指外源基因進入受體細胞后，存在于游離的載體上，不整合到細胞的染色體上。穩定轉染是指DNA整合到宿主細胞的染色體中。細胞轉染途徑（一） 物理介導：
實驗原理： 轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。 常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Insti
免疫療法是當下腫瘤治療領域最具前景的發展方向之一。隨著PD-(L)1等免疫檢查點抑制劑應用范圍逐漸擴大，CAR-T療法研究不斷出現新的進展，CAR-T療法作為有別于傳統藥物的“活藥”，不僅對復發、難治性腫瘤患者表現出了突破性療效，其生產體系和使用場景也有別于普通藥物。鑒于當下生物技術的更新速度，
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
2006年，日本科學家山中伸彌（Shinya Yamanaka）教授利用逆轉錄病毒將4個轉錄因子轉入成體細胞，將其轉變為誘導多能干細胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。從此后，誘導多潛能干細胞研究領域取得了極大進步，被用于研究人類疾病，目前已經有多項研
miRNA 模擬物是化學合成的，雙鏈RNA分子（通常長度為18–24個核苷酸），通過轉染到細胞中，模擬成熟的內源性miRNA分子。miRNA抑制劑是單鏈（通常長度為21–25個核苷酸），經過修飾的RNA分子，通過轉染到細胞中，特異性的抑制miRNA的功能。模擬物和抑制劑包含一些化學修飾，以
電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時，無法造成細胞膜表面狀態的改變，因而外源D 不能進入細胞內。電壓過高時，局部組織積聚過多熱量，造成細胞的死亡或組織失去功能，即使外源基因導入細胞，也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多
什么是 CRISPR?CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）, 是細菌中用于與病毒進行斗爭的免疫武器。 生命進化歷史上，細菌為了將病毒的外來入侵基因清除，進化出 CRISPR 系統，利用這個系統，細菌可以不動
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
實驗原理：轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的
基因編輯是一種遺傳工程技術，針對某個序列已知但功能未知的序列，通過改變生物的遺傳基因，使其特定的基因功能喪失作用，通過研究對生物體造成的影響，進而推測出該基因的生物學功能。本文為你科普基因編輯三大技術： 基因敲除 進行DNA水平編輯。一般用于構建基因敲除鼠模型。 CRISPR/Cas9：C
常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）.前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析.一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內（依賴于各種不同
某些真核動物細胞，比如原代的T細胞，神經細胞，和干細胞等，其特性決定了被廣泛使用的脂質體轉染等化學試劑法必定不可能獲得可接受的轉染效果。而病毒轉染的繁瑣程序和潛在危害性又使得大規模應用病毒來解決這些細胞的轉染實驗成為實驗者不愿意選擇的路徑。15年前Amaxa技術出現，改進了古老的電轉技術，針對真核細
基因組編輯技術CRISPR/Cas9被《科學》雜志列為2013年年度十大科技進展之一，受到人們的高度重視。CRISPR是規律間隔性成簇短回文重復序列的簡稱，Cas是CRISPR相關蛋白的簡稱。CRISPR/Cas最初是在細菌體內發現的，是細菌用來識別和摧毀抗噬菌體和其他病原體入侵的防御系統。