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    細菌人工染色體的應用

    細菌人工染色體(bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大腸桿菌致育因子 (fertility, F)為基礎的合成載體。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理細菌人工染色體(bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大腸桿菌致育因子 (fertility, F)為基礎的合成載體。實驗材料限制性內切核酸酶大腸桿菌培養物電轉感受態大腸桿菌細胞試劑、試劑盒LB 冷凍緩沖液儀器、耗材脈沖場凝膠電泳儀LB 瓊脂平板LB 培養基電穿孔儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液與溶液LB 冷凍緩沖液2. 酶與緩沖液限制性內切核酸酶3. 凝膠脈沖場凝膠電泳儀4. 培養基含 12.5 μg/ml 氯霉素的 LB 瓊脂平板含 12.5 μg/ml 氯霉素的 LB 培養基5. 專用設備電穿孔儀6. 載體與菌株BAC DNA 或 BAC 分離物轉化的大腸桿菌培養......閱讀全文

    DNA重組(DNA recombination)技術:DNA重組的載體-3

    在作為載體時,這些噬菌體有一個很大的優點,即克隆到M13mp載體的外源DNA片段(雙鏈),在子代噬菌體便成為了單鏈形式。故應用M13mp進行克隆,可方便地分離到大量含有外源DNA某一單鏈的DNA分子。這種單鏈DNA可在下列工作中作模板:①主要用作雙脫氧鏈終止法進行DNA序列測定的模板;②制備僅有一條

    BAC文庫構建方法與技巧

    基因組DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。一、分離基因組DNA(gDNA)

    基因組DNA文庫構建的基本流程

    基因組  DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。 一、分離

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    BAC文庫構建方法與技巧

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    基因組DNA文庫構建必備實驗技巧-1

    基因組DNA文庫用途十分廣泛,如用于人類及動植物基因組學研究,基因表達調控研究,分析、分離特定的基因片段等。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為四大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。一、分離基因組DNA(gDNA) 毫無

    阿根廷科學家將國歌旋律植入細菌染色體存儲音樂

      阿根廷科學家近日成功將該國國歌旋律以人工基因編碼形式植入某種細菌染色體中。這一方法不僅可以用來存儲音樂旋律,還可能發展為一種擁有巨大應用潛力的信息存儲方式。   據阿根廷媒體報道,主持研究的阿根廷信息生物學家費德里克·普拉達介紹說,生物的 DNA(脫氧核糖核酸)由四種脫氧核苷酸組成,即腺嘌

    細菌DNA序列可作信息“存儲器”

      阿根廷科學家近日成功將該國國歌旋律以人工基因編碼形式植入某種細菌染色體中。這一方法不僅可以用來存儲音樂旋律,還可能發展為一種擁有巨大應用潛力的信息存儲方式。   據阿根廷媒體報道,主持研究的阿根廷信息生物學家費德里克·普拉達介紹說,生物的DNA(脫氧核糖核酸)由四種脫氧核苷酸組成,即腺嘌呤、胸

    人造酵母:捅破生命界限的“窗戶紙”

      覃重軍說自己是個“懶人”,最近5年來,他平均每年的論文還不到1篇;他也不怎么去積極申請經費,每天要么在單位院子里散步,要么就是關在辦公室里,琢磨事兒。   他開玩笑說,像他這樣的人在別的地方,估計早就被開除了。   但是,他所工作的中國科學院分子植物科學卓越創新中心/植物生理生態研究所非但沒

    “人造生命” 我國科學家“創造”世界首例單染色體真核細胞

      日前,中科院分子植物科學卓越創新中心/植物生理生態研究所合成生物學重點實驗室覃重軍研究團隊與合作者,在國際上首次人工創建了單條染色體的真核細胞:把釀酒酵母細胞里原本天然的16條染色體,人工融合成單條染色體,且仍具有正常的細胞功能。既改變了染色體的結構,又仍保有生命的“活性”,人工蛻變出一個全新細

    基因組DNA文庫構建必備實驗技巧

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    人工合成4條酵母染色體我國科學家開啟“再造生命”新紀元

      大姑娘出嫁——頭一回!3月10日出版的國際頂級學術期刊《科學》,以封面的形式同時刊發了中國科學家的4篇研究長文!  由天津大學、清華大學和華大基因分別完成的這4篇長文,介紹了真核生物基因組設計與化學合成方面的系列重大突破:完成了4條真核生物釀酒酵母染色體的從頭設計與化學合成——要知道,釀酒酵母總

    分子克隆技術(質粒DNA和DNA插入片段的制備、連接反應...-1

    克隆(Clone)是指通過無性繁殖過程所產生的與親代完全相同的子代群體。分子克隆(Molecular Cloning)是指由一個祖先分子復制生成的和祖先分子完全相同的分子群,發生在基因水平上的分子克隆稱基因克隆(DNA克隆)。其基本原理是:將編碼某一多肽或蛋白質的基因(外源基因)組裝到細菌質粒(

    “創造生命”的合成生物學

      導語:“像組裝電路一樣組裝生命”,只是合成生物學研究思路的形象比喻。有人預言合成生物學將帶來人類歷史上的第三次工業革命。  最近,很多媒體報道了美國生物學家克雷格·文特爾的研究成果:在實驗室中重塑“絲狀支原體絲狀亞種”的DNA,并將其植入去除了遺傳物質的山羊支原體體內,創造出歷史上首個

    天津大學同期刊發兩篇Science文章:合成生物學重大成果

      由天津大學系統生物工程教育部重點實驗室元英進領導的研究組3月10日在Science雜志上刊發兩篇文章,一篇文章報道了全化學合成重新設計的真核生物釀酒酵母十號染色體,長達707 Kb,創建了一種高效定位生長缺陷靶點的方法(pooled PCRTag mapping[PoPM]),解決了合成型基因組

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    前瞻布局 交叉創新 引領BT深入未知藍海

    9月20日,生物和生命健康產業將迎來年度盛會——深圳國際BT領袖峰會。其中,中國科學院深圳先進技術研究院(簡稱深圳先進院)將擔綱中國生物醫學工程聯合學術年會、深圳醫療健康大數據創新應用國際大賽兩場千人活動。  觀其背后,是深圳先進院在生命科學、醫學領域(以下統稱BT)10余年的前瞻布局、近千名高水平

    四篇Science文章公布最新基因組序列

      小麥是全球最重要的糧食作物之一,提供了20%人類所需的熱量。2010年英國科學家宣布他們繪制出了小麥基因組草圖,但這一序列并不完整。在7月17日Science雜志上,兩個研究組分別公布了Chinese Spring小麥品種的每個染色體臂的基因組序列,以及小麥染色體3B基因組序列,另外兩個研究小組

    時空穿越 TA們的DNA“飛”入太空

       隨著長征十一號運載火箭的一聲轟鳴,在地球上幾近消失的華南虎DNA(脫氧核糖核酸)被存儲在特制容器中向太空飛去。與華南虎DNA干粉同行的,還有金絲猴、天行長臂猿、蕙蘭、水稻、大豆、三七、蒲公英等動植物的基因樣本。  據報道,此前不久的2018年10月底,科幻作家劉慈欣等人的DNA樣本,通過長二丙

    回國加入中科院 戴磊:讓微生物為人帶來大健康

      實驗臺前,身著白大褂的戴磊與他的幾名學生專注地操作著各種儀器和試劑,潛心鉆研合成生態與進化,嘗試通過人體微生物打開生命的奧秘。  現年31歲的戴磊,是中國科學院深圳先進技術研究院的一名研究員、博士生導師。今年初,他從美國加州大學洛杉磯分校醫學院辭職回國,加入了合成生物學研究所的隊伍。  “這是近

    第三次生物技術革命 讓微生物為人類帶來大健康

    實驗臺前,身著白大褂的戴磊與他的幾名學生專注地操作著各種儀器和試劑,潛心鉆研合成生態與進化,嘗試通過人體微生物打開生命的奧秘。 現年31歲的戴磊,是中國科學院深圳先進技術研究院的一名研究員、博士生導師。今年初,他從美國加州大學洛杉磯分校醫學院辭職回國,加入了合成生物學研究所的隊伍。 “

    人工合成生命的時代要來了?

      在我們生存的自然界里,除了單細胞生物、少數低等生物,絕大多數的生物從小到大都遵循著一個相同的規律——由一個受精卵發育形成。  就像是父母的精卵結合,產生了受精卵,受精卵開始快速的生長分裂,經歷四細胞期、八細胞期后形成桑椹胚,直到胚胎干細胞有了明顯的分化進而發育成囊胚,原腸胚,最后發育成一個各器官

    分子生物學常用實驗技術(page 1)

    第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分

    中科院合成生物學研究所揭牌

      日前,中國科學院深圳先進技術研究院合成生物學研究所正式揭牌。據悉,該研究所擁有3個中美院士實驗室、12個海歸PI實驗室,匯聚合成生物學前沿力量的國際化團隊,有望成長為具有世界影響力的研究機構。  合成生物學是近年來發展迅速的新興前沿交叉學科,被認為是繼“DNA雙螺旋發現”和“人類基因組測序計劃”

    何梁何利獎獲得者金梅林:科學研究需要工匠精神

    2016年度何梁何利基金獎于2016年10月21日在北京頒獎。憑借在動物傳染病病原致病機制和新型防控技術研究等領域取得的突出成績,華中農業大學動物醫學院金梅林教授榮獲科學與技術進步獎。  23日,在華中農業大學農業微生物學國家重點實驗室,記者見到了剛從北京領獎歸來的金梅林。  “獲獎非常高興。”今年

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    新載體大大提升哺乳動物細胞的蛋白產量

      科學家們用細胞系或細菌表達外源蛋白已經有三十多年歷史了,這些技術已經在絕大多數實驗室得到了普及。然而,像新藥開發這樣的應用需要大批量的蛋白,現有的表達體系難以勝任。日前研究人員在Nucleic Acids Research雜志上發表文章,展示了一類新型的重組蛋白表達載體。這種載體可以克服表觀遺傳

    美生物學家研制人造生命體助人類殖民火星

    這是一張美國宇航局海盜號軌道器拍攝的火星圖像,兩艘海盜號飛船于1975年發射升空,之后母船分別釋放一顆著陸器,這是首顆在火星表面發回圖像的人類探測器。北京時間8月23日消息,一位著名生物學家日前表示,通過改造合成的,可以以二氧化碳為生的“人造生命體”,將幫助人類有朝一日殖民火星。著名

    外顯子捕獲與擴增1

    本方案以哺乳動物穿梭載體 pSPL3 為例,描述了外顯子擴增的方法,內容分為以下五個階段。階段 1: 文庫的構建; 階段 2: 電穿孔法將文庫轉染 COS-7 細胞; 階段 3:mRNA 的提取; 階段 4: 反轉錄 PCR; 階段 5: 克隆分析。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者:

    外顯子捕獲與擴增

                實驗材料 大腸桿菌菌株 HB101 質粒 pSPL3 COS-7 細胞 載體 pBluescriptⅡ

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