組織源性原代細胞培養實驗室組建的基本要求
一、實驗室設計1、細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，為10萬級潔凈環境的潔凈室。而洗刷消毒工作設在潔凈室外，避免物品污染潔凈室內環境。細胞潔凈室需要一個空調系統并對外界保持一定的正壓。4、解剖實驗室主要用于對器官組織的分離，需要有無菌操作臺、解剖顯微鏡、各種手術器材等。二、實驗室設備1、超凈工作臺/生物安全柜細胞培養需要無菌要求高的環境，在進行操作細胞的實驗時，需要在100級的空氣下進行，那我們就需要購買能提供百級潔凈度的超凈工作臺或生物安全柜了。對絕大多數實驗來說，超凈工作臺已經可以完全滿足實驗員的操作需要。至于超凈臺的尺寸，要看實驗室的大小以及人員的多少來確定，是買單人的還是雙人的，......閱讀全文
組織源性原代細胞培養實驗室組建的基本要求
一、實驗室設計1、細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，為
腫瘤組織源性的原代細胞培養
一、腫瘤細胞培養的概述????????腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用腫瘤原代細胞培養基礎培養基、5～10%血清濃度、細胞培養添加劑、抗生素等等即可。或在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物，或原患者血清（1~2%）以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、
細胞培養實驗室組建的基本要求
1、細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，為10萬級潔凈環
組織源性正常小鼠原代真皮纖維原細胞培養實驗方法
一、實驗試劑1、培養基： Primary Cell Medium + 10% FBS + 1% P/S + Primary Cell Supplement2、凍存液： Primary Cell Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+
組織源性正常大鼠原代心肌細胞培養實驗方法
一、實驗試劑1、培養基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液： 1×PBS（pH 7.4）+ 1% P/S4、染色液： 0.4
腫瘤組織源性原代細胞分離和培養
腫瘤組織源性原代細胞分離和培養 腫瘤組織源性原代細胞分離的常用方法： 組織塊法、酶消化法、鉭網法、脫落細胞法。 腫瘤組織源性原代細胞對藥物篩選體系的益處： （1）腫瘤組織源性原代細胞培養需要的腫瘤組織較少; （2）不影響其他病理檢查對腫瘤標本的需求； （3）腫瘤組織源性
原代細胞培養的應用
1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段； 2、為傳代培養創造條件； 3、服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。
原代細胞培養簡介
原代細胞（primary culture cell）是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究，如蛋白質組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的
原代細胞培養之取材
取材作為原代細胞培養過程中的第一部至關重要，以下幾種取材技術，你都用過哪些方法呢？ 各類組織取材，操作及注意事項： 1.皮膚和粘膜 主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。 2.內臟和實體瘤 1）無菌環境； 2）熟悉所需組織的類型和部位； 3）要避開破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去
原代細胞培養技術分類
一、組織塊直接培養法1、取材，用Hank's液洗滌三次，并剔除脂肪，結締組織，血液等雜物。2、用手術剪將組織剪切成1mm3左右的小塊，再用Hank's液洗三次。3、將組織塊轉移至培養瓶，并貼附于瓶底面。4、輕輕將培養瓶翻轉，瓶底朝上，向瓶內注入適量的培養液，將培養瓶放置在37℃恒溫箱
細胞培養基的基本要求
體外培養的細胞直接生活在培養基中，因此培養基應能滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。 一、營養成分 維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方面： 1.氨基酸：是細胞合成蛋白質的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸：纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪
新鮮組織分離原代細胞
新鮮手術取得或凍存的組織于37 ℃ 快速復溫，原代細胞培養工作液清洗3次，盡量修剪去除纖維組織，將組織塊剪成約1 mm3大小的小塊，彎頭吸管吸取組織塊均勻種植于75 cm2 培養瓶瓶底，瓶內加入少量原代細胞培養工作液，小心翻轉培養瓶使組織塊黏附于瓶底，置于37 ℃、5% CO2培養箱中培養6-8
細胞培養原代培養的原理
將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。細胞培養是生物學和醫學研究最常用的手段之一，可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養。由于
原代細胞培養中常遇到的誤區
原代細胞（primary culture cell）是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究，如蛋白質組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的
原代細胞培養的幾種常見技術
原代細胞傳代技術一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。4、用吸管
原代細胞培養中的常見錯誤
當培養原代細胞時，重要的是要記住，他們不是細胞系，不能同等對待。我們非常熟悉研究人員在培養原代細胞時遇到的常見問題。這里有六個在原代細胞培養中的常見錯誤，以及如何糾正這些錯誤。?錯誤1：一小管原代細胞在水浴中解凍一段時間糾正1：原代細胞對解凍過程非常敏感，因此將小瓶置于37℃水浴中，保持并輕輕旋轉直
原代細胞培養方法有哪些
你主要要原代培養那種細胞，不同的細胞方法肯定不同。如一般懸浮細胞，如血液細胞，就分離后，直接培養。培養組織中的細胞，就需要消化過后，進行培養。也有用組織塊培養的
原代細胞培養優點與用途？
一、優點 (1) 細胞剛離開機體，生物學性狀與原體內細胞比較接近，相比之下，細胞系的一個缺點是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型，而原代細胞保持了細胞在體內的許多重要標志和功能。 (2) 細胞的初代培養也是建立各種細胞株（系）的必經階段。 二、原代細胞培養的臨床應用： (1) 細胞
原代細胞培養之——取材技術
細胞的來源多樣，培養方法也各不相同，凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化，經大量擴增
原代細胞培養之——培養技術
原代細胞的培養也叫初代培養?是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養，是建立細胞系的第一步，是一項基本技術。原代細胞因剛從組織中分離開，生物學特性未發生很大變化，仍保留原來的遺傳特性，也最接近和反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。 原代細胞往往有多種細胞組成，比較混雜，即使
酶組織化學對組織處理的基本要求
??? 根據組織化學酶檢出的基本步驟。主要有以下5方面影響酶活性：??? 1．選擇zui適溫度、pH及緩沖液。??? 2．固定和切片標本制作? 由于固定液易使酶喪失酶活性，因此用不固定的冰凍切片顯示酶活性。切片厚度一般為8～12um，不超過40um，因為切片在60um以上時，浸透速度減慢，易出現人工
淺談原代細胞培養的那些事（一）
一、何謂原代培養？原代培養是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養，即組織直接從機體獲取后，通過組織塊長出單層細胞，或者用酶消化或機械方法將組織分散成單個細胞開始培養，在*傳代前的培養可認為是原代培養。原代培養的過程指動物的組織或器官從機體取出后，經機械法或各種酶類（常用胰蛋白酶）和螯合劑（常用
細胞培養原代培養的基本過程
原代培養的基本過程包括取材、培養材料的制備、接種、加培養液、置培養條件下培養等步驟，在所有的操作過程中，都必須保持培養物及生長環境的無菌。
細胞培養原代培養的操作步驟
混勻操作要領（1）火焰消毒吸管，用Hanks液冷卻和濕潤管內壁（這是因為剛分離的組織細胞易粘在管壁上）（2）吸管頭插入管底（3）用吸管反復輕輕吹打組織塊器械的使用（1）用工作臺消毒鑷子取浸泡在酒精中消毒的器械。（2）器械置無菌干紗布內嚓一下。迅速通過火焰，冷卻后使用。（3）用過的器械置另一加蓋的器皿
原代胚胎成纖維細胞培養
實驗器材手術小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平 皿三套、200目尼龍濾網、50ML、15ML離心管和手術刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纖維細胞（MEF）生長培養基：高糖DMEM
原代神經細胞培養操作步驟
1．取出生后1-3天內的大鼠腦組織后，先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍體積的Hank液中，腦組織比較柔軟，反復吹打即可制成細胞懸液。 2．為排除脂肪成分和其它碎塊，把懸液注入離心管中，在室溫直立5～10分鐘后，細胞或細胞團塊自然下沉，脂肪等
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于：（1）分子生物學；（2）細胞生物學；（3）遺傳學；（4）免疫學；（5）腫瘤學；（6）病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經胰酶消化，
原代腎上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。用一定孔徑大小的濾網過濾細胞懸液，除去未消化的組織塊。然后，洗細胞，清除消化酶。用添加血清的培養液混懸細胞，將細胞接種于塑料培養器皿。實驗材料腎組織片試劑、試劑盒DME
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物
原代腎上皮細胞培養實驗
原代腎上皮細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。