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實驗材料 Taq DNA多聚酶引物陽性對照DNA脫氧核苷三磷酸混合物三磷酸瓊脂糖1.3%TAE膠試劑、試劑盒 磷酸緩沖鹽溶液液Tris醋酸EDTA6×加樣緩沖液引物儲備液儀器、耗材 DNA抽提和純化系統基質的DNA抽提試劑盒熱循環儀實驗步驟 一、DNA 標本的收集和制備1. 需要檢測支原體污染的細胞系，在收集樣品前數天或至少在解凍后兩周內，不能加任何抗生素。應保證支原體在培養上清中的效價在 PCR 測定范圍之內。2. 收集 1 ml 貼壁細胞或懸浮細胞的培養上清液。這樣收集的標本包含活的或死的細胞，其優點是一些支原體會明顯地黏附在真核細胞上，甚至侵入細胞中。上清液可貯存在4°C 數天或 -20°C 數周。在樣品溶化后，應立即操作。3. 上清液在 13000 g 離心 5 min，將沉淀用 1 ml D-PBSA （D-PBSA （磷酸緩沖鹽溶液液）：137 mmol/L NaCl，2.7 mmol/L KCl，8.1 m......閱讀全文
引言作為世界上最小的細菌之一，支原體能夠獨立繁殖。它們屬于柔膜菌綱，生長非常緩慢，且為寄生。細胞培養物的污染仍是一個主要問題。一系列生理和生化參數受細胞培養物中支原體的影響。支原體感染會導致細胞的代謝、生長、活力、大分子合成、形態等發生變化，因此對細胞培養物進行靈敏的常規污染檢測是必不可少的。傳統的
聚合酶鏈反應即PCR技術，因為其對基因或特定核酸序列在短時間內的極大的擴增效率，已在感染性疾病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、法醫學、動植物和考古等的診斷和研究中得到了廣泛的應用，并在某些方面幾乎是難以替代的。但是，像自然界的任何事物一樣，PCR也有其局限性，稍不注意，就很容易造成錯誤的判斷
聚合酶鏈反應即PCR技術，因為其對基因或特定核酸序列在短時間內的極大的擴增效率，已在感染性疾病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、法醫學、動植物和考古等的診斷和研究中得到了廣泛的應用，并在某些方面幾乎是難以替代的。但是，像自然界的任何事物一樣，PCR也有其局限性，稍不注意，就很容易造成錯誤的判斷。 感染性疾
聚合酶鏈反應即PCR技術，因為其對基因或特定核酸序列在短時間內的極大的擴增效率，已在感染性疾病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、法醫學、動植物和考古等的診斷和研究中得到了廣泛的應用，并在某些方面幾乎是難以替代的。但是，像自然界的任何事物一樣，PCR也有其局限性，稍不注意，就很容易造成錯誤的判斷。感染性疾病由
實驗材料Taq DNA多聚酶引物陽性對照DNA脫氧核苷三磷酸混合物三磷酸瓊脂糖1.3%TAE膠試劑、試劑盒磷酸緩沖鹽溶液液Tris醋酸EDTA6×加樣緩沖液引物儲備液儀器、耗材DNA抽提和純化系統基質的DNA抽提試劑盒熱循環儀實驗步驟一、DNA 標本的收集和制備1. 需要檢測支原體污染的細胞系，在收
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析，分析的都是PCR終產物。但是在許多
1、Ct值的定義在熒光定量PCR技術中，有一個很重要的概念--Ct值。C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數。2、熒光域值（threshold）的設定PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號，熒光域值的缺省設置是3-
定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied biosystems公司推出，它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團，利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該
應用聚合酶鏈反應（PCR）技術測定臨床標本中的病原體核酸成分，是一種高度敏感，且最為直接的檢測手段。由于臨床標本中含有蛋白質、脂類等物質，可干擾PCR反應，故在做PCR反應前必須進行核酸提取。經典的核酸提取方法通常是加去污劑（SDS等）裂解細胞，經蛋白酶處理、有機溶劑提取及乙醇沉淀等步驟。由于樣本的
4月15日訊 達安基因發布2020年Q1業績預告，預計一季度凈利為1.86億元-2億元，同比增長558%-608%。報告期內，受新型冠狀病毒肺炎疫情影響，市場對新型冠狀病毒（2019-nCoV)核酸檢測試劑盒及核酸檢測儀器、相關耗材的需求量大幅度增長，對公司業績產生了積極影響。 中山大學達安基
感染性疾病有病原微生物引起，致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查，體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體，抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況，或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應（ PCR ）
1 前言肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae，Mp)是一類無細胞壁、大小介于病毒與細菌之間、可在無生命培養基中生長繁殖的最小原核細胞型微生物。Mp僅寄生于人類，人群對其普遍易感。Mp感染不但引起呼吸道癥狀，如支氣管炎、肺炎(我國社區獲得性肺炎的首要病原學)等，而且25％感
在細胞培養，特別是傳代細胞培養中，支原體污染率達到15-35%。支原體的侵染會引起細胞功能和基因表達的嚴重改變，并造成持續危害。由于支原體污染會嚴重影響實驗結果的可靠性、重復性和一致性，對支原體的常規檢測非常重要。傳統的支原體檢測方法很耗費時間，通常需要一天至數周，而且操作比較繁瑣，準確度不高。中國
一、檢測細菌或其抗原 （一)直接涂片顯微鏡檢查 自病人標本直接涂片作染色鏡檢是簡便而快速的方法之一。自一定部位采集標本作直接檢查需考慮細菌的形態特征與可能存在的細菌數量。腦膜炎患者的腦脊液和瘀斑刺破涂片，常可顯示在細胞內的革蘭氏陰性腎形雙球菌，有診斷價值。白喉患者咽部假膜涂片中可見
一、檢測細菌或其抗原（一）直接涂片顯微鏡檢查自病人標本直接涂片作染色鏡檢是簡便而快速的方法之一。自一定部位采集標本作直接檢查需考慮細菌的形態特征與可能存在的細菌數量。腦膜炎患者的腦脊液和瘀斑刺破涂片，常可顯示在細胞內的革蘭氏陰性腎形雙球菌，有診斷價值。白喉患者咽部假膜涂片中可見典型的桿菌有時可有異染
我國在對牛血清的質量2000年版《中國生物制品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量，細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素，支持細胞增殖檢查。 血清質量的鑒定一般包括以下幾個方面： ●理化性質：如滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水平、內毒素
6月30日，國家食品藥品監督管理總局在網站上發布新聞，表示以2014年第30號公告形式頒布了《子宮刮匙》等120項推薦性醫療器械行業標準。這是今年6月1日起新修訂的《醫療器械監督管理條例》施行后頒布的第一批醫療器械行業標準。標準的正式頒布將推動醫療器械監督管理，對保障醫療器械安全有效、促進醫療器
分析測試百科網訊 近日，Qiagen獲得了美國食品藥品監督管理局（FDA）關于QiaStat-Dx呼吸道SARS-CoV-2診斷平臺的緊急使用授權，可用于診斷感染COVID-19冠狀病毒的患者。 該診斷平臺可以從有癥狀患者的鼻咽拭子中檢測出并區分出SARS-CoV-2和其他20種已知會引起嚴重
技術原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA
技術原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA
技術原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA
優博生物技術有限公司技術人員在大量的實驗基礎上，對SYBR實時熒光定量PCR技術進行了大量實驗和對比分析，公司所開發的SYBR實時熒光定量PCR試劑盒誤差小、穩定性強，可以廣泛應用于核酸定量分析、基因表達差異分析 、SNP檢測 、甲基化檢測、醫學研究等眾多領域，解決科研和生產領域中技術難題。 1
熒光定量PCR簡介 熒光定量PCR檢測技術誕生至今已10多年的時間，而其應用一直都沒廣泛展開，究其原因，無外乎受制于相關儀器、試劑和技術的發展。近期，尤其是08年以來，儀器和試劑是遍地開花，這也使科研人員均躍躍欲試，都想借此技術使自己的研究能突飛猛進，發展勢頭通過查找每年所發表的文章數可一目了然。據
熒光定量PCR的應用分子生物學研究1、核酸定量分析。 對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測 , 比如近期流行的甲型H1N1流感， 轉基因動植物基因拷貝數的檢測，RNAi 基因失活率的檢測等。2 、基因表達差異分析。 比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差異 （ 如藥物處理、物理
2 Craig Venter挑戰人類基因組計劃 John Craig Venter 出生于1946年，曾應征加入美國海軍醫療隊參加越戰，越南戰場的殘酷使他認識到時間和生命的寶貴，“人生的每一分鐘都應該有所創新”。回國后，Venter僅用了6年時間先后就讀于圣馬特奧學院 (College o
3 生物性污染的來源、危害及預防 外界的微生物如昆蟲、節肢動物、原蟲、霉菌、病毒、細菌、無細胞壁的微生物(通常指支原體)和其它類型的細胞都可能侵入培養環境引起污染。只要在一個開放的環境中進行培養，都難以避免發生污染。發生污染的可能性取決于操作方法、培養室的無菌環境以及實驗室的規章制度。生物性污染對細
2.3.3 預防及控制污染發生后首先應確定污染物的種類及污染的程度。為了能正確檢測細菌或支原體的污染，應先撤去培養液中的抗生素。常規細胞傳代培養中應用抗生素會導致:①掩蓋了不很嚴重的污染;②導致了耐藥菌的產生。每一種抗生素的抗菌譜都是有限的，而且許多抗生素僅是抑制細菌生長，而非殺菌劑。因為支原體無細
技術原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA
國內最先進的熒光定量PCR檢測系統，是國際上最新研制的一種核酸定量技術，該技術在PCR反應系統中引入了熒光標記探針，具有高靈敏性、高特異性、和高精確性的特點。目前已被應用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達、突變和多態性研究等多個領域。熒光定量PCR（簡稱FQ-PCR）由美國PE公司199
聚合酶鏈反應(PolymeraseChainReactionm,PCR)是一項體外基因擴增技術,1985年美國PE公司人類遺傳研究室發明了該項技術,Saiki等首先應用于鐮狀紅細胞貧血的產前診斷,但由于操作方法繁瑣未能全面推廣應用。直到1988年耐熱DNA聚合酶(Taq酶)的發現和應用,使PCR技術