顯微鏡檢測法 實驗方法原理 細胞凋亡發生時會出現一定的形態學特征,如胞膜有小泡生成,細胞固縮,核質濃縮,染色質凝聚,DNA降解,胞膜最終形成許多凋亡小體,然后被鄰近的巨噬細胞所吞噬。 實驗材料 Hela細胞 Jurkat細胞 試劑、試劑盒 蒸餾水 盼藍 儀器、耗材 光學顯微鏡 倒置顯微鏡 ......閱讀全文
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨
細胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根據某些單個細胞死亡時細胞碎裂如花瓣或樹葉散落般的形態學特征。目前對細胞凋亡的認識正不斷得到深化,檢測凋亡細胞的方法也逐漸增多,但形態改變仍是確定細胞凋亡的最可靠的方法。一、光學顯微鏡觀察凋亡細胞的主要特征為核染色質致密深染,形成致密質塊,有時可碎裂。在HE
二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面(細胞膜)的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍,又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種,以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞
細胞凋亡的圖片5細胞凋亡的圖片6細胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察(普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)進行定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。二、區分凋亡和壞死可將二
細胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根據某些單個細胞死亡時細胞碎裂如花瓣或樹葉散落般的形態學特征。目前對細胞凋亡的認識正不斷得到深化,檢測凋亡細胞的方法也逐漸增多,但形態改變仍是確定細胞凋亡的最可靠的方法。一、光學顯微鏡觀察凋亡細胞的主要特征為核染色質致密深染,形成致密質塊,有時可碎裂。在HE
3.電子顯微鏡雖然光學顯微鏡下可以看見胞膜起泡現象和凋亡小體,但凋亡細胞的形態學變化大多發生在超微結構,因此用光鏡觀察難以令人滿意,而透射電鏡可清楚地觀察到細胞結構在凋亡不同時期的變化。電鏡形態學觀察是迄今為止判斷凋亡最經典、最可靠的方法,被認為是確定細胞凋亡的金標準。檢測方法:透射電鏡標本經戊二醛
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法)細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下,
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜 不
如何檢測細胞凋亡?細胞凋亡是指為維持內環境穩定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用,它并不是病理條件下,自體損傷的一種現象,而是為更好地適應生存環境而主動爭取的一種死亡過程。細胞凋亡的研究方
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染
使用顯微鏡通過形態學檢測細胞凋亡 細胞凋亡的檢測有定性或定量兩類方法。定性可以通過形態學觀察,包括光鏡、電鏡和熒光顯微鏡等,也可以通過瓊脂糖電泳來檢測特征性DNA梯形條帶。定量研究的首選方法為流式細胞儀。原位末端標記法則既可用于定性,又可用于半定量。此
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染色:如果
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果
用透射電鏡觀察細胞凋亡可以用于:(1)可清楚地觀察到細胞結構在凋亡不同時期的變化;(2)電鏡形態學觀察是迄今為止判斷凋亡最經典、最可靠的方法, 被認為是確定細胞凋亡的金標準。實驗方法原理細胞凋亡發生時會出現一定的形態學特征,如胞膜有小泡生成,細胞固縮,核質濃縮,染色質凝聚,DNA降解,胞膜最終形成許
(二)熒光法:選用上述最佳濃度作用于腫瘤細胞,培養細胞48h后,收貨細胞用PBS洗2-3次后用0.4%多聚甲醛室溫下固定30min。棄去固定液,并用PBS洗2次后,用1%Triton X-100作用4min加入適量的0.5mg/L DAPI熒光染色60min,用PBS沖洗3次,取10ul滴片,干燥后
第一招:霧里看花——形態學觀察方法 (一)HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。(二)丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。
(一)藥物對腫瘤細胞的抑制效應的MTT法:用培養基將腫瘤細胞調整至2 X108個/L,在96孔板中每孔加入100ul細胞懸液于37℃、5% CO2下培養過夜。次日每孔加入不同濃度的藥物100mg/L作為試驗組,設加完全培養基不加藥物的陰性對照,并用功能明確的藥物為陽性對照和0.5%的乙醇溶劑對照,每
一、形態學觀察方法(一)HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。(二)丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。(三)臺盼藍染色:如果細胞膜
一、形態學觀察方法(一)HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。(二)丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。(三)臺盼藍染色:如果細胞膜
實驗材料小鼠腹水型肝癌細胞亞系試劑、試劑盒Vp-16甲醛石蠟戊二醛TNF-α儀器、耗材用游標卡尺注射器針頭透射電鏡以小鼠腹水型肝癌細胞亞系Hca/16A<,3>-F為細胞株,建立小鼠皮下種植瘤模型,用依托泊苷Vp-16治療,誘導該腫瘤細胞耐藥,一周后建立耐藥模型,再用重組人腫瘤壞死因子α
細胞凋亡試驗常用的方法(MTT法、熒光法、DNA瓊脂糖凝膠電泳法與流式細胞儀檢測法)(一)藥物對腫瘤細胞的抑制效應的MTT法:用培養基將腫瘤細胞調整至2 X108個/L,在96孔板中每孔加入100ul細胞懸液于37℃、5% CO2下培養過夜。次日每孔加入不同濃度的藥物100mg/L作為試驗組,設加完
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例 實驗方法原理 樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例 實驗方法原理 樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源
樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源的、具有遷移能力的免疫細胞,是目前發現的功能最強大的抗原遞呈細胞(APC)。 DC 是機體適應性 T 細胞免疫應答的始動者,主要在(1)腫瘤免疫反應(2)在疫苗生產過程中分別起著至關重要的作用。實驗方法原理樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來