青蒿素的提取純化方法
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥,將其溶于乙醚-水兩相溶液中,分別得到青蒿素和青蒿酸。此種方法的青蒿酸收率達到90%,青蒿素的提取率為57%。乙醇法:取一定量的青蒿枝葉干粉,用稀乙醇浸泡24h,得到乙醇提取液,將其注入連續萃取裝置,再用含苯和乙酸乙酯的溶劑汽油萃取,得到醇相和萃取相,醇相可循環使用,萃取相用活性炭脫色,過濾,回收溶劑,然后得到濃溶液,再冷卻結晶得到青蒿素粗晶物,再用乙醇重結晶得到青蒿素成品。此方法有收率較高,成本較低,步驟較少,操作簡單,安全等優點。溶劑汽油法:取一定量的青蒿枝葉干粉,用8~10倍120號溶劑汽油浸泡3次,得到溶劑汽油提取液,再減壓濃縮并放置結晶......閱讀全文
青蒿素的提取純化方法
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥,將其溶于乙
關于青蒿素的提取純化的介紹
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。 溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。 堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥
氧化鏑的提取純化方法
一種氧化鏑的提取純化方法,包括如下步驟:1、待提純液配置:配置待提純氧化鏑混合溶液;2、中間劑配置:配置延緩劑和淋洗劑,延緩劑為Cu(NO3)2·3H2O、水和硝酸配置而成,淋洗劑為固體EDTA酸、水和氨水配置而成;3、分離柱準備:分離柱作為離子交換的載體;4、淋洗柱Chemicalbook轉型:對
酶的提取和分離純化方法
許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎開來。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。化學破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶
質粒dna的提取和純化方法有哪些
堿裂解法、柱純化法、煮沸法
蛋白質提取純化的方法有哪些?
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛,要利用不同蛋白間內在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染,而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。圖片來源于網絡 根據蛋白質溶解度不同,蛋白質的分離純化可分為鹽析法和等電點沉淀法。鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而
核酸提取純化的方法及原理-文章鏈接:
新冠疫情在全球席卷開來,對于如何確認是否感染,使用體外診斷核酸檢測方法仍是不可或缺的手段。 體外診斷,是指在人體之外,通過對人體樣本(血液、體液、組織等)進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病或機體功能的產品和服務。 而檢測人體樣本的關鍵步驟之一,即是樣本中的核酸(DNA和RNA)
酶的提取和分離純化實驗方法
(一)細胞破碎處理許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指利用甲醛、丙
DNA的提取和純化
1 DNA提取⑴ 新鮮外周靜脈血3~5ml,以ACD(檸檬酸納緩沖液)1/7體積抗凝;⑵ 3500rpm 15分鐘離心,吸除上層血漿;⑶ 加5倍體積蒸餾水(滅菌),搖勻,靜置5~10分鐘,3500rpm15分鐘離心,去上清,(若沉淀不夠,可重復1~2次);⑷ 吸取沉淀(少許液體)放入1.5ml離心管
RNA提取與純化
實驗概要掌握RNA提取的基本技術,了解RNA提取過程中的各種注意事項。實驗原理RNA提取是分子生物學實驗中難度較大的實驗技術。?RNA提取和DNA提取有類似的地方,因為它們都是核酸,都具有較好的水溶性。提取RNA首先破碎細胞,然后用提取液將RNA溶出,反復抽提去除蛋白質,加入乙醇沉淀RNA,將RNA
mRNA提取、分離純化
從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工等一系列問題。總之
體外診斷中常見核酸提取純化方法
目前,新冠疫情在全球席卷開來,對于如何確認是否感染,使用體外診斷核酸檢測方法仍是不可或缺的手段。體外診斷,是指在人體之外,通過對人體樣本(血液、體液、組織等)進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病或機體功能的產品和服務。而檢測人體樣本的關鍵步驟之一,即是樣本中的核酸(DNA和RNA)純化。核酸純化
DNA提取方法DNA-提取后純化:將-DNA-與色譜柱結合
離液鹽對于裂解至關重要,而且對于將 DNA(或 RNA)與色譜柱結合也是如此。此外,為了增強和影響核酸與二氧化硅的結合,還添加了酒精。大多數情況下這是乙醇,但有時可能是異丙醇。乙醇百分比和體積有很大的影響。太多,你會帶入大量降解的核酸和小物種,這會影響 A260 讀數并降低你的一些產量。太少,可能難
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理 許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指利用
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理 許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指
RNA-的提取和純化實驗
雖然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位點,但并不推薦使用 poly(A)+RNA,因為在反轉錄反應中可能污染寡核苷酸,并因此增加假陽性的概率。所以建議使用總 RNA 做 FDD 分析。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒氯仿焦
mRNA的提取及純化實驗
實驗材料 mRNA試劑、試劑盒 mRNA分離試劑盒異丙醇NaAC儀器、耗材 儀器水浴離心機取液器分光光度計實驗步驟 一、生物素標記的Oligo(dT)探針與mRNA的煺火1. ?在DEPC處理過的1.5 ml Eppendof管中,加入0.2-1 mg 的總RNA和無RNase的水至終體積為0.5
質粒DNA的提取與純化
一、實驗目的與原理?質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子,是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作,進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體。?提取質粒的基本步驟分為三步:?①細菌的培養和質粒的擴增?②細菌菌體的裂解?③質粒DNA的純化?本實驗采取的菌體
酶的提取和分離純化
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RNA-的提取和純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 異丙醇 苯酚-胍鹽單相溶液 磷酸鹽緩沖液
質粒DNA的提取與純化
一、實驗目的與原理質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子,是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作,進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體。提取質粒的基本步驟分為三步:①細菌的培養和質粒的擴增,②細菌菌體的裂解,③質粒DNA的純化。本實驗采取的菌體裂解方
RNA-的提取和純化實驗
試劑、試劑盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇異丙醇苯酚-胍鹽單相溶液磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭移液器離心管錐形管平板勻漿器實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑氯仿焦碳酸二乙酯(DEPC) 處理過的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液(用 DEPC 處理過的 H20 配制)
mRNA的提取及純化實驗
磁珠法 親和柱層析法 親和柱層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 mRNA
如何對提取的DNA純化
質粒DNA的提取、純化和電泳檢測摘要本實驗通過堿變性法提取E.coli DH5α(pUC19)的質粒DNA,并且通過一系列的分離純化技術將其質粒DNA與染色體DNA、RNA、蛋白質等雜質分開從而得到純化的質粒DNA分子。通過瓊脂糖凝膠電泳可以通過DNA條帶的位置來大致判斷其分子大小,也可以將實際電泳
體液樣本核酸提取純化
無細胞體液包括:血漿或血清,腦脊液?,尿液,其他無細胞體液,細胞培養上清液。QIAamp?Viral?RNA?Mini?Kit?——?從無細胞體液中純化病毒?RNA1)快速純化高品質病毒 RNA(見圖 1)2)無需有機提取或乙醇沉淀3)重復性好,產量高4)完全去除污染物和抑制劑圖1?擴增血漿中的RN
DNA提取純化技術概述
質粒DNA的提取與純化質粒是一類雙鏈、閉環的DNA,大小范圍從1 kb至200 kb以上不等。通常情況下,質粒可持續穩定地處于染色體外的游離狀態,具有自主復制功能;但在一定條件下也會可逆地整合到宿主染色體上,隨著染色體的復制而復制,并通過細胞分裂傳遞到后代。?質粒已成為核酸克隆和測序最常用的載體。質
核酸提取與純化介紹
核酸提取是分子生物學的基本組成部分,因高質量的核酸是分子生物學上的應用至關重要。 我們將會總結一些現用核酸提取技術和針對樣品類型選擇正確提取方法的小建議;也會提及評估核酸濃度和質量,以及核酸提取過程中的常見問題。 a. 為什么需要核酸提取? 核酸提取為大量廣泛研究和應用提供了答案(例如:克
核酸提取真空純化抽濾系統的使用方法
上一期我們介紹了R300-W200核酸提取真空純化抽濾系統的安裝方法,本期我們將詳細介紹其具體的使用。作為一款替代傳統離心法的新產品,大部分時候都和試劑盒搭配使用。試劑盒廠家一般會配置離心過濾柱或者96孔過濾板,下面的具體操作將分別進行介紹,用戶可以根據具體使用的耗材按相關說明操作。使用前的檢查:1
體外診斷中的核酸提取純化的方法及原理
目前,新冠疫情在全球席卷開來,對于如何確認是否感染,使用體外診斷核酸檢測方法仍是不可或缺的手段。體外診斷,是指在人體之外,通過對人體樣本(血液、體液、組織等)進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病或機體功能的產品和服務。而檢測人體樣本的關鍵步驟之一,即是樣本中的核酸(DNA和RNA)純化。核酸純化
RNA提取純化的注意事項
由于RNA酶的廣泛存在與難以滅活的頑固特性。使得RNA的提取純化和后續工作變得非常困難。關于 RNA and RNases,你應該了解些什么?RNases 是非常穩定和活躍的一種酶,一般不需要輔助因子的功能,因而在實驗室內 RNA 很容易被降解如果不預先消除可能的 RNase 污染,請不要使用任何塑