2018年諾貝爾化學獎：酶的定向進化技術與噬菌體技術
10月，2018年度諾貝爾化學獎揭曉。今年該獎項的獲得者是美國科學家弗朗西絲·阿諾德（Frances H. Arnoid）、喬治·史密斯（George P. Smith）和英國科學家格雷戈里·溫特（Sir Gregory P. Winter）。他們的獲獎理由是在酶的定向演化以及用于多肽和抗體的噬菌體展示技術方面取得的成果。 Frances H. Arnoid從1993年起，進行了酶的第一次定向進化，這是一種催化化學反應蛋白質。她的方法經常用于開發新催化劑，用這種方法產生的酶，用途包括開發更環保的化學物質、藥品以及為運輸部門生產更環保的可再生燃料。 酶是由活細胞產生的、對其底物具有高度特異性和高度催化效能的蛋白質或RNA，因此是一類重要的生物催化劑。1993年Arnoid完成了首個酶的定向演化實驗，也就是首次實現了她的理論，此后她不斷完善這個方法，現在已能用于開發新的催化劑。基于Arnoid的研究成果，業界可以通過更環保的......閱讀全文
2018年諾貝爾化學獎：酶的定向進化技術與噬菌體技術
10月，2018年度諾貝爾化學獎揭曉。今年該獎項的獲得者是美國科學家弗朗西絲·阿諾德（Frances H. Arnoid）、喬治·史密斯（George P. Smith）和英國科學家格雷戈里·溫特（Sir Gregory P. Winter）。他們的獲獎理由是在酶的定向演化以及用于多肽和抗體的噬
λ－噬菌體末端酶的基本信息
中文名稱λ 噬菌體末端酶英文名稱λ phage terminase定 義λ噬菌體編碼的末端酶。能識別結合λDNA連環體中的cos序列，結合后特異性地切割DNA形成12個堿基的黏性末端。此酶還有識別蛋白質衣殼前體和ATP酶的功能，水解ATP提供能量。將切割后所形成的酶-DNA二元復合體運送到蛋白質衣
λ－噬菌體末端酶的基本信息
中文名稱λ 噬菌體末端酶英文名稱λ phage terminase定 義λ噬菌體編碼的末端酶。能識別結合λDNA連環體中的cos序列，結合后特異性地切割DNA形成12個堿基的黏性末端。此酶還有識別蛋白質衣殼前體和ATP酶的功能，水解ATP提供能量。將切割后所形成的酶-DNA二元復合體運送到蛋白質衣
諾貝爾獎得主Cell發布端粒酶重要發現
隨著染色體繩索的復制，它的兩端會遭到磨損。然而由于染色體的末端有著額外的細繩，磨損不會觸及重要信息所在的繩索主體部分。這一額外的細繩被稱作為“端粒”。隨著時間的推移及經歷多輪復制，這一端粒細繩會分解直至染色體喪失它的保護末端，這種“磨損”觸及繩索，破壞染色體導致了細胞死亡。 這樣當然好——最終
λ噬菌體載體DNA的堿性磷酸酶處理實驗
λ 噬菌體兩臂內部末端 5'-磷酸基團的去除，能有效防止自連和減少非重組噬菌體的背景。當使用含單一克隆位點的插入型載體（如 λgt10、λgt11 和 λORF8）或使用雖含多克隆位點但用單一酶切割的插入型載體（如 λgt18-23 和 λZAP) 時，本方法可被用于抑制非重組子背景。本實驗
λ噬菌體載體DNA的堿性磷酸酶處理實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 λ 噬菌體兩臂內部末端 5'-磷酸基團的去除，能有效防止自連和減少非重組噬菌體的背景。當使用含單一克隆位點的插入型載體（如 λgt10、λgt11 和 λORF8）或使用雖含多克隆位點但用單一酶切割的插入型載體（如
λ噬菌體載體DNA的堿性磷酸酶處理實驗
實驗方法原理 λ 噬菌體兩臂內部末端 5'-磷酸基團的去除，能有效防止自連和減少非重組噬菌體的背景。當使用含單一克隆位點的插入型載體（如 λgt10、λgt11 和 λORF8）或使用雖含多克隆位點但用單一酶切割的插入型載體（如 λgt18-23 和 λZAP) 時，本方法可被用于抑
λ噬菌體DNA(48502bp)的限制性內切酶酶切片段
沒有的位點：NotI, SfiI,SpelAatI6個位點:12347,31481,33000,39995,40599,40617片段長度:19044,12436,7886,6995,1519,604,18AatII10個位點:5110,9399,11248,14979,29041,40811,41
美英科學家獲2018年度諾貝爾化學獎
當地時間10月3日上午11時45分（北京時間10月3日下午5時45分）2018年度諾貝爾化學獎揭曉。今年該獎項的獲得者是美國的弗朗西絲·阿諾德（Frances H. Arnoid）、美國的喬治·史密斯（George P. Smith）和英國的格雷戈里·溫特（Sir Gregory P. Win
λ噬菌體的局限性λ噬菌體
實驗方法原理 本實驗以含原λ噬菌體和缺陷噬菌體λdg的雙重溶原菌gal+作為供體,經紫外線誘導后,獲取能轉導半乳糖發酵基因的高頻轉導噬菌體裂解液,然后讓這些轉導噬菌體將gal+基因轉移到受體菌gal-中去。實驗材料 供體菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (帶有原噬菌
sanger和他的DNA測序方法
sanger是英國生物化學家，1918年8月13日生于英格蘭格洛斯特夏郡，在劍橋大學圣· 約翰學院獲哲學博士學位，畢業后到著名的劍橋醫學研究會分子生物學實驗室工作。Sanger的工作主要研究蛋白質的結構，特別是研究測定胰鳥素分子的結構，成功地測定了胰鳥素的精細結構，因而獲得了1958年的諾貝爾化
λ噬菌體DNA限制性內切酶圖譜分析
實驗方法原理λDNA是線狀雙鏈DNA,EcoRⅠ在其上有5個切點,產生6個片段,通過瓊脂糖凝膠電泳可將這幾條片段分離開。如何重建這6個片段呢?可用兩種限制性內切酶同時或先后作用于λDNA。例如λDNA經EcoRⅠ切割后在凝膠上分離開來的6條帶可洗脫出來,然后分別將這6條片段用HindⅢ切割。結果表明
表達β半乳糖苷酶噬菌體的噬菌斑分析
材料：LB或NZCYM頂層瓊脂或瓊脂糖，含有X-gal對于3ml頂層瓊脂，加40ul 2%X-gal。X-gal要在臨用前才加入已冷卻的頂層瓊脂（47℃）中。大腸桿菌鋪平板細菌只有不是β-半乳糖苷酶的過量表達株，可采用任何支持特異性λ噬菌體裂解生長的大腸桿菌。細菌染色體上單拷貝lacZ基因的存在不影
λ噬菌體DNA限制性內切酶圖譜分析
實驗方法原理 λDNA是線狀雙鏈DNA,EcoRⅠ在其上有5個切點,產生6個片段,通過瓊脂糖凝膠電泳可將這幾條片段分離開。如何重建這6個片段呢?可用兩種限制性內切酶同時或先后作用于λDNA。例如λDNA經EcoRⅠ切割后在凝膠上分離開來的6條帶可洗脫出來,然后分別將這6條片段用HindⅢ切割。結果表
sanger和他的DNA測序方法
Sanger酶學法sanger是英國生物化學家，1918年8月13日生于英格蘭格洛斯特夏郡，在劍橋大學圣· 約翰學院獲哲學博士學位，畢業后到著名的劍橋醫學研究會分子生物學實驗室工作。Sanger的工作主要研究蛋白質的結構，特別是研究測定胰鳥素分子的結構，成功地測定了胰鳥素的精細結構，因而獲得了195
解讀2018諾貝爾化學獎成果：用進化的力量解決化學問題
地球的生命經過長期進化最終獲得強大的適應力，散布于各種嚴酷環境，包括熱溫泉、深海以及沙漠等。如果能夠借助進化的力量，我們在化工、醫學等眾多領域中遇到的難題也就迎刃而解。 美國科學家弗朗西絲·阿諾德、喬治·史密斯以及英國科學家格雷戈里·溫特正是基于相同理念，在實驗室模擬自然進化，通過不同途徑釋
用進化的力量解決化學問題——解讀2018年諾貝爾化學獎成果
地球的生命經過長期進化最終獲得強大的適應力，散布于各種嚴酷環境，包括熱溫泉、深海以及沙漠等。如果能夠借助進化的力量，我們在化工、醫學等眾多領域中遇到的難題也就迎刃而解。 美國科學家弗朗西絲·阿諾德、喬治·史密斯以及英國科學家格雷戈里·溫特正是基于相同理念，在實驗室模擬自然進化，通過不同途徑
Lambda噬菌體
·?????????Lambda DNA Preparation?(Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes·?????????Isolati
通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆
經過3～4輪的篩選后，應該能夠富集到能與受體特異性結合的噬菌體群體。通常而言，在后幾輪的篩選中，每次獲得的噬菌體總量都會增加，但是單就這個現象并不一定能說明已經篩選到了受體特異性結合的肽段。能與靶分子非特異性結合或者能與篩選基質的噬菌體克隆也會造成這一現象。噬菌體ELISA可以說是最靈敏的鑒定所獲取
基于進化的革命獲2018年諾貝爾化學獎
將進化論引入實驗室的3位科學家獲得了2018年諾貝爾化學獎。 美國加州理工學院的弗朗西絲?阿諾德（Frances Arnold）因其在酶（一種催化特定化學反應的蛋白質）定向進化方面的研究獲得了一半獎金。從她的研究中得到的酶使人們能夠開發出新的方法來生產關鍵的藥物和更環保的生產化工產品的工藝。
烈性噬菌體（virulent－phage）和溫和噬菌體（temperate－phage）
噬菌體(bacteriaphage or phage)是病毒的一類，結構很簡單，基本上由一個蛋白質外殼包裹著一些核酸組成的。噬菌體的多樣性來自于組成其外殼的蛋白質的種類，以及其染色體的類型和結構的不同。（一）烈性噬菌體（ virulent phage）遺傳學上應用最廣泛的烈性噬菌體是大腸桿菌（ E.
經雙限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 置換型載體（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位點，它們在中央填充片段的兩端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）
噬菌體裂解酶對治療齲齒等口腔疾病有顯著效果
近日，中國科學院武漢病毒研究所研究員危宏平團隊聯合武漢大學口腔醫院教授李宇紅團隊研究發現，噬菌體裂解酶能殺滅導致齲齒的細菌，而對常見的口腔共生菌無害，并通過大鼠齲齒模型實驗證實能顯著降低齲齒程度。 齲齒俗稱蛀牙或蟲牙，是牙齒被齲壞逐漸形成齲洞的口腔疾病，是導致脫牙的主要原因，包括齲齒在內的口腔
經雙限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備實驗
實驗方法原理 置換型載體（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位點，它們在中央填充片段的兩端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）。實驗材料 噬菌體 T4 DNA 連接酶限制性內切核酸酶λ
噬菌體裂解酶對治療齲齒等口腔疾病有顯著效果
近日，中國科學院武漢病毒研究所研究員危宏平團隊聯合武漢大學口腔醫院教授李宇紅團隊研究發現，噬菌體裂解酶能殺滅導致齲齒的細菌，而對常見的口腔共生菌無害，并通過大鼠齲齒模型實驗證實能顯著降低齲齒程度。 齲齒俗稱蛀牙或蟲牙，是牙齒被齲壞逐漸形成齲洞的口腔疾病，是導致脫牙的主要原因，包括齲齒在內的
用－T7－噬菌體－DNA－聚合酶進行雙脫氧測序反應
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 去離子蒸餾水 二硫蘇糖醇 dNTP 和 ddNTP 標記混合液和 ddNTP 延伸 終止混合液 甲酰胺上樣緩沖液 測序酶稀釋緩沖
經雙限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備實驗
置換型載體（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位點，它們在中央填充片段的兩端以相反方向排列（Frischaufet al. 1983）。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理置換型載體
噬菌體竟然可以保護自身基因組免受CRISPR核酸酶切割
細菌和感染它們的病毒正在進行一場與生命本身一樣古老的分子軍備競賽。進化為細菌配備了一系列可靶向并破壞病毒DNA的免疫酶，包括CRISPR-Cas系統。但是，殺死細菌的病毒（也稱為噬菌體）已設計出了它們自己的工具來幫助它們戰勝這些最強大的細菌防御。 如今，在一項新的研究中，來自美國加州大學舊金山
噬菌體的生長
Preparing Lawn Cells for M13 Cloning?(Life Technologies)Lawn cells require the F' episome for M13 infection and may be prepared??Streaking Lambda
噬菌體如何培養
用大腸桿菌來培養。先制備培養大腸桿菌的培養基，培養大腸桿菌。然后用噬菌體再感染大腸桿菌。噬菌體就是細菌病毒，他是嚴格的活細胞寄生生物，所以要用活細胞來培養。