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    脈沖場凝膠電泳實驗——倒轉電場

    脈沖場凝膠電泳是在兩個不同方向的電場周期性交替進行的,可分離長至5Mb的DNA分子,其工作原理是DNA分子在交替變換方向的電場中作出反應所需的時間取決于它的大小。較小的分子重新定向較快,因而在凝膠中移動也較快,于是不同大小的分子被成功分離。實驗材料DNA試劑、試劑盒GTBETBE瓊脂糖儀器、耗材電泳儀實驗步驟1. 制備用于水平電泳的1%瓊脂糖凝膠,放入電泳裝置,其上覆蓋以2~3 mm 的GTBE或TBE緩沖液。 2. 加入液體樣品。裝好蠕動泵用于電泳緩沖液循環。3. 對于微型凝膠調整循環速度至5~10 ml/min 對于大型凝膠則用20~50 ml/min。4. 將管端與凝膠槽中的再循環口相連,或直接放入緩沖液槽。 5. 將可編程的轉換裝置與恒壓直流電源相連,然后將凝膠裝置與轉換裝置相連(見下表),開始電泳直到溴酚藍遷移1 cm,開啟轉換裝置及蠕動泵......閱讀全文

    脈沖場凝膠電泳實驗——倒轉電場

    脈沖場凝膠電泳是在兩個不同方向的電場周期性交替進行的,可分離長至5Mb的DNA分子,其工作原理是DNA分子在交替變換方向的電場中作出反應所需的時間取決于它的大小。較小的分子重新定向較快,因而在凝膠中移動也較快,于是不同大小的分子被成功分離。實驗材料DNA試劑、試劑盒GTBETBE瓊脂糖儀器、耗材電泳

    箝位勻強電場的脈沖場凝膠電泳

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 箝位勻強電場(contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝膠電泳中, 電場是由多個電極產生的。這些電極圍繞水平凝膠呈四邊形或六邊形,其電位被箝制在頂先設定的水平(Ch

    箝位勻強電場的脈沖場凝膠電泳

    實驗方法原理 箝位勻強電場(contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝膠電泳中, 電場是由多個電極產生的。這些電極圍繞水平凝膠呈四邊形或六邊形,其電位被箝制在頂先設定的水平(Chuetal. 1986; Vollrath and

    箝位勻強電場的脈沖場凝膠電泳

    箝位勻強電場(contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝膠電泳中, 電場是由多個電極產生的。這些電極圍繞水平凝膠呈四邊形或六邊形,其電位被箝制在頂先設定的水平(Chuetal. 1986; Vollrath and Davis 1987;

    脈沖場凝膠電泳實驗

    實驗材料 DNA試劑、試劑盒 GTBETBE瓊脂糖儀器、耗材 電泳儀實驗步驟 1. ?制備用于水平電泳的1%瓊脂糖凝膠,放入電泳裝置,其上覆蓋以2~3 mm 的GTBE或TBE緩沖液。?2. ?加入液體樣品。裝好蠕動泵用于電泳緩沖液循環。3. ?對于微型凝膠調整循環速度至5~10 ml/min 對于

    脈沖場凝膠電泳實驗

    實驗概要了解脈沖場凝膠電泳(PFGE)的工作原理,并學習和掌握有關的操作技術。實驗原理大分子DNA(一般長度超過20kb,在某些情況下,超過40kb)在電場作用下通過孔徑小于分子大小的凝膠時,將會改變無規卷曲的構象,沿電場方向伸直,與電場平行從而才能通過凝膠。此時,大分子通過凝膠的方式相同,遷移率無

    脈沖場凝膠電泳(PFGE)實驗

    實驗概要本實驗利用脈沖場凝膠電泳(PFGE)分離了大分子DNA。實驗原理大分子DNA(一般長度超過20kb,在某些情況下,超過40kb)在電場作用下通過孔徑小于分子大小的凝膠時,將會改變無規卷曲的構象,沿電場方向伸直,與電場平行從而才能通過凝膠。此時,大分子通過凝膠的方式相同,遷移率無差別(也稱“極

    脈沖場凝膠電泳

    脈沖場凝膠電泳1)高分子量DNA瓊脂糖凝膠塊制備和加工1.收集10ml全血,加入30ml細胞裂解液。置冰浴中至少20min直至紅細胞完全溶解。2.2000r/min離心10min,移去紅色上清液,再次用細胞裂解液洗滌細胞,然后用PBS重懸細胞。3.稀釋單細胞懸液并取一小份用Neubauer腔計數細胞

    交變脈沖電場凝膠電泳

    一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中,DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時,在電場作用下,迫使DNA變形擠過篩孔,而沿著泳動方向伸直,因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向,則DNA分子必須改變其構象,沿新的泳動方面伸直,而轉向時間與DNA分子大小關系極為密

    脈沖[交變]電場凝膠電泳

    中文名稱脈沖[交變]電場凝膠電泳英文名稱pulse [alternative] field gel electrophoresis定  義利用脈沖電場的作用在凝膠介質中分離大分子DNA的一種電泳方法。由于超過一定大小(大于40 kb)的線狀DNA分子在瓊脂糖凝膠中電泳的速度幾乎相同,無法在恒場強凝膠

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