交變脈沖電場凝膠電泳
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中，DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時，在電場作用下，迫使DNA變形擠過篩孔，而沿著泳動方向伸直，因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向，則DNA分子必須改變其構象，沿新的泳動方面伸直，而轉向時間與DNA分子大小關系極為密切。1983年Schwartz等人根據DNA分子彈性弛豫時間（外推為0的滯留時間）與DNA分子大小有關的特性，設計了脈沖電場梯度凝膠，交替采用兩個垂直方向的不均勻電場，使DNA分子在凝膠中不斷改變方向，從而使DNA按分子大小分開。后來Carle等改進了電泳技術，并發現周期性的反轉換電場(periodic inversion of the electric field)亦能使大分子DNA通過電泳分開。電泳系統是由一水平式電泳槽和兩組獨立、彼此垂直的電極組成，一組電極負極為N，正極為S；另一組負極為W，正極為E。一塊正方形瓊脂糖凝膠板（2......閱讀全文
交變脈沖電場凝膠電泳
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中，DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時，在電場作用下，迫使DNA變形擠過篩孔，而沿著泳動方向伸直，因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向，則DNA分子必須改變其構象，沿新的泳動方面伸直，而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
脈沖[交變]電場凝膠電泳
中文名稱脈沖[交變]電場凝膠電泳英文名稱pulse [alternative] field gel electrophoresis定 義利用脈沖電場的作用在凝膠介質中分離大分子DNA的一種電泳方法。由于超過一定大小（大于40 kb）的線狀DNA分子在瓊脂糖凝膠中電泳的速度幾乎相同，無法在恒場強凝膠
脈沖[交變]電場凝膠電泳的定義
中文名稱脈沖[交變]電場凝膠電泳英文名稱pulse [alternative] field gel electrophoresis定 義利用脈沖電場的作用在凝膠介質中分離大分子DNA的一種電泳方法。由于超過一定大小（大于40 kb）的線狀DNA分子在瓊脂糖凝膠中電泳的速度幾乎相同，無法在恒場強凝膠
脈沖[交變]電場凝膠電泳的技術介紹
中文名稱脈沖[交變]電場凝膠電泳英文名稱pulse [alternative] field gel electrophoresis定 義利用脈沖電場的作用在凝膠介質中分離大分子DNA的一種電泳方法。由于超過一定大小（大于40 kb）的線狀DNA分子在瓊脂糖凝膠中電泳的速度幾乎相同，無法在恒場強凝膠
向交變場的脈沖場凝膠電泳
Gardiner 等（1986; Gardiner and Patterson 1989) 使用置于垂直凝膠兩側的兩組鉑線電極的凝膠電泳裝置以分離大的 DNA 片段。在這種橫向交變場電泳（transverse alternating field electrophoresis, TAFE) 中 ，當
橫向交變場的脈沖場凝膠電泳
實驗方法原理 Gardiner 等（1986; Gardiner and Patterson 1989) 使用置于垂直凝膠兩側的兩組鉑線電極的凝膠電泳裝置以分離大的 DNA 片段。在這種橫向交變場電泳（transverse alternating field electrophoresis,
橫向交變場的脈沖場凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Gardiner 等（1986; Gardiner and Patterson 1989) 使用置于垂直凝膠兩側的兩組鉑線電極的凝膠電泳裝置以分離大的 DNA 片段。在這種橫向交變場電泳（transverse alterna
脈沖電場凝膠電泳的定義
脈沖電場凝膠電泳（pulsed-field gel electrophoresis），在脈沖電場中，DNA分子的遷移方向隨著電場方向的周期性變化而不斷改變。
脈沖電場凝膠電泳的定義
PFGE：脈沖電場凝膠電泳（pulsed-field gel electrophoresis），在脈沖電場中，DNA分子的遷移方向隨著電場方向的周期性變化而不斷改變。在標準的PFGE中，第一個脈沖的電場方向在另一側成45°夾角。由于瓊脂糖凝膠的電場方向、電流大小及作用時間都在交替變化，使得DNA分子
脈沖場凝膠電泳實驗——倒轉電場
脈沖場凝膠電泳是在兩個不同方向的電場周期性交替進行的，可分離長至5Mb的DNA分子，其工作原理是DNA分子在交替變換方向的電場中作出反應所需的時間取決于它的大小。較小的分子重新定向較快，因而在凝膠中移動也較快，于是不同大小的分子被成功分離。實驗材料DNA試劑、試劑盒GTBETBE瓊脂糖儀器、耗材電泳
脈沖電場凝膠電泳的原理和作用
在標準的PFGE中，第一個脈沖的電場方向在另一側成45°夾角。由于瓊脂糖凝膠的電場方向、電流大小及作用時間都在交替變化，使得DNA分子能夠隨時調整其游動方向，以適應凝膠孔隙的無規則變化。與相對分子質量較小的DNA相比，相對分子質量較大的DNA需要更多的脈沖次數來更換其構型和方位，使其按新的方向游動。
箝位勻強電場的脈沖場凝膠電泳
箝位勻強電場（contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝膠電泳中， 電場是由多個電極產生的。這些電極圍繞水平凝膠呈四邊形或六邊形，其電位被箝制在頂先設定的水平（Chuetal. 1986; Vollrath and Davis 1987;
箝位勻強電場的脈沖場凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 箝位勻強電場（contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝膠電泳中， 電場是由多個電極產生的。這些電極圍繞水平凝膠呈四邊形或六邊形，其電位被箝制在頂先設定的水平（Ch
箝位勻強電場的脈沖場凝膠電泳
實驗方法原理 箝位勻強電場（contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝膠電泳中， 電場是由多個電極產生的。這些電極圍繞水平凝膠呈四邊形或六邊形，其電位被箝制在頂先設定的水平（Chuetal. 1986; Vollrath and
反轉電場凝膠電泳
中文名稱反轉電場凝膠電泳英文名稱field-inversion gel electrophoresis;FIGE定 義一種脈沖電場凝膠電泳，使用單對電極和一個可轉動的潛入式瓊脂糖凝膠板托，電泳時電場有規律地顛倒180。，驅動DNA先向后退，再向前進，使向前的脈沖時間或場強大于向后，樣品獲得向前的凈
脈沖場凝膠電泳
脈沖場凝膠電泳1）高分子量DNA瓊脂糖凝膠塊制備和加工1．收集10ml全血，加入30ml細胞裂解液。置冰浴中至少20min直至紅細胞完全溶解。2．2000r/min離心10min，移去紅色上清液，再次用細胞裂解液洗滌細胞，然后用PBS重懸細胞。3．稀釋單細胞懸液并取一小份用Neubauer腔計數細胞
交變試驗箱
交變試驗箱，亦稱環境試驗箱，是模擬大氣環境變化的一種檢測設備，能夠檢驗產品在溫度、濕度交替變化時的各項性能指標，被廣泛應用于航空、汽車、家電、科研等領域。 設備介紹 編輯 ? 交變試驗箱能夠模擬大氣環境變化，檢測產品在經過一定的溫度、濕度變化后有無故障、是否質變、能否正常工作等情況，適
反轉電場凝膠電泳的定義
中文名稱反轉電場凝膠電泳英文名稱field-inversion gel electrophoresis;FIGE定 義一種脈沖電場凝膠電泳，使用單對電極和一個可轉動的潛入式瓊脂糖凝膠板托，電泳時電場有規律地顛倒180。，驅動DNA先向后退，再向前進，使向前的脈沖時間或場強大于向后，樣品獲得向前的凈
脈沖場凝膠電泳實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 GTBETBE瓊脂糖儀器、耗材 電泳儀實驗步驟 1. ?制備用于水平電泳的1%瓊脂糖凝膠，放入電泳裝置，其上覆蓋以2~3 mm 的GTBE或TBE緩沖液。?2. ?加入液體樣品。裝好蠕動泵用于電泳緩沖液循環。3. ?對于微型凝膠調整循環速度至5~10 ml/min 對于
脈沖場凝膠電泳實驗
實驗概要了解脈沖場凝膠電泳（PFGE）的工作原理，并學習和掌握有關的操作技術。實驗原理大分子DNA(一般長度超過20kb，在某些情況下，超過40kb)在電場作用下通過孔徑小于分子大小的凝膠時，將會改變無規卷曲的構象，沿電場方向伸直，與電場平行從而才能通過凝膠。此時，大分子通過凝膠的方式相同，遷移率無
大范圍限制性圖譜：脈沖電場電泳實驗
實驗材料Agarose-embedded DNA 樣品試劑、試劑盒稀有的限制性內切核酸酶10 X 緩沖液BSA乙酰化和去核酶處理亞精胺鹽酸TE 緩沖液瓊脂糖電泳緩沖液載樣液DNA 長度標準溴化乙錠儀器、耗材100 mm petri 板適合限制性酶切溫度的水浴脈沖電場電泳設備脈沖發生器帶正電荷的尼龍膜
脈沖場凝膠電泳的應用
脈沖場凝膠電泳在生物基因分型、分子流行病學研究、細胞凋亡、追蹤傳染源、獸醫流行病診斷輔助、食品和公共健康及染色體DNA分離等研究中有廣泛應用。追蹤傳染源脈沖場凝膠電泳用于評估同一事件中不同來源菌株可能存在的關系，是溯源的有用技術之一。當疫情爆發時， 為了采取有針對性的措施，對該疫情進行合理有效地防控
脈沖場凝膠電泳（PFGE）概述
脈沖場凝膠電泳（PFGE）的原理大致為:細菌包埋于瓊脂塊中,用適當的內切酶在原位對整個細菌染色體進行酶切,酶切片段在特定的電泳系統中通過電場方向不斷交替變換及合適的脈沖時間等條件下而得到良好的分離。ＰＦＧＥ中內切酶的選用至關重要,所采用的內切酶常為寡切點酶(ｌｏｗｆｒｅｑｕｅｎｃｙｃｌｅａｖａｇｅｒ
脈沖場凝膠電泳（PFGE）概述
脈沖場凝膠電泳（PFGE）的原理大致為：細菌包埋于瓊脂塊中，用適當的內切酶在原位對整個細菌染色體進行酶切，酶切片段在特定的電泳系統中通過電場方向不斷交替變換及合適的脈沖時間等條件下而得到良好的分離。PFGE中內切酶的選用至關重要，所采用的內切酶常為寡切點酶（low frequency cle
脈沖場凝膠電泳(PFGE)實驗
實驗概要本實驗利用脈沖場凝膠電泳(PFGE)分離了大分子DNA。實驗原理大分子DNA(一般長度超過20kb，在某些情況下，超過40kb)在電場作用下通過孔徑小于分子大小的凝膠時，將會改變無規卷曲的構象，沿電場方向伸直，與電場平行從而才能通過凝膠。此時，大分子通過凝膠的方式相同，遷移率無差別(也稱“極
瓊脂糖凝膠電泳的相關介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中,DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時,在電場作用下,迫使DNA變形擠過篩孔,而沿著泳動方向伸直,因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向,則DNA分子必須改變其構象,沿新的泳動方面伸直,而轉向時間與DNA分子大小關系極
瓊脂糖凝膠電泳的基本介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中，DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時，在電場作用下，迫使DNA變形擠過篩孔，而沿著泳動方向伸直，因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向，則DNA分子必須改變其構象，沿新的泳動方面伸直，而轉向時間與DNA分子大小關系極
凝膠電泳技術介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中，DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時，在電場作用下，迫使DNA變形擠過篩孔，而沿著泳動方向伸直，因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向，則DNA分子必須改變其構象，沿新的泳動方面伸直，而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
細胞凋亡檢測實驗——DNA－片斷化檢測
實驗方法原理細胞凋亡時主要的生化特征是其染色質發生濃縮, 染色質DNA 在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300 kbp 長的DNA 大片段, 或180~200 bp 整數倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現為梯形電泳圖譜（DNA ladder）。細胞經處理后，采用常規方法分離提純DNA，進
脈沖場凝膠電泳的應用領域
脈沖場凝膠電泳在生物基因分型、分子流行病學研究、細胞凋亡、追蹤傳染源、獸醫流行病診斷輔助、食品和公共健康及染色體DNA分離等研究中有廣泛應用。追蹤傳染源脈沖場凝膠電泳用于評估同一事件中不同來源菌株可能存在的關系，是溯源的有用技術之一。當疫情爆發時， 為了采取有針對性的措施，對該疫情進行合理有效地防控