細菌RNA制備實驗——革蘭氏陰性細菌中提取
實驗材料RNA試劑、試劑盒STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材離心機分光光度計搖床實驗步驟1. 培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期，加入1/20體積終止緩沖液，置于冰上。2. 于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3. 用2 ml STET裂解液重懸細胞，加入100 μl 0.2 mol/l 的VRC，移入15 ml 聚丙烯管子。4. 加入1 ml 緩沖液平衡酚，振蕩1 min 再加1 ml 氯仿，振蕩1 min，于4℃用JA-17轉子10 000 g 離心10 min，收集水相。5. 加入1/10體積3 mol/l 乙酸鈉和2倍體積冰冷無水乙醇，于4℃ 10 000 g 離心10 min。6. 用2 ml 0.2 mol/l VRC溶液重溶沉淀。7. 用1：1酚/氯仿抽提2遍后......閱讀全文
細菌RNA制備實驗
革蘭氏陰性細菌中提取 革蘭氏陽性細菌中提取 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試
細菌RNA制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期，加入1/20體積終止緩沖液，置于冰上。2. ?于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3.
細菌RNA制備實驗——革蘭氏陰性細菌中提取
實驗材料RNA試劑、試劑盒STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材離心機分光光度計搖床實驗步驟1. ?培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期，加入1/20體積終止緩沖液，置于冰上。2. ?于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3. ?用2
采用Trizol－溶液提取細菌總RNA
實驗概要了解用Trizol 溶液提取細菌總 RNA的方法。實驗原理Trizol主要物質是異硫氰酸胍，它可以破壞細胞使RNA釋放出來的同時，保護RNA的完整性。加入氯仿后離心，樣品分成水樣層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后，RNA ?可以通過異丙醇沉淀來還原。無論是人、動物、植物還
羅紅霉素如何影響細菌的RNA合成？
羅紅霉素通過抑制細菌蛋白質的合成來發揮作用。 羅紅霉素屬于大環內酯類抗生素，它的主要作用機制是與細菌的50S核糖體亞單位結合，阻止氨酰tRNA與核糖體結合，進而抑制了細菌蛋白質的合成。由于這一作用，羅紅霉素對多種細菌都有良好的抗菌活性，特別是對某些革蘭陽性菌和一些革蘭陰性菌。
反義RNA的調控細菌基因的表達功能
反義RNA對編碼CAP的基因的調控作用已如前述。這里再介紹一下micF RNA對ompF基因的表達的調控。ompF蛋白質是大腸桿菌的外膜蛋白的主要成分這一。micF RNA是從另一基因(ompC基因)附近的DNA序列轉錄而來，和o-mpFn RNA的5'端有70%的序列互補，因此在體外mic
反義RNA調控細菌基因的表達功能介紹
反義RNA對編碼CAP的基因的調控作用已如前述。這里再介紹一下micF RNA對ompF基因的表達的調控。ompF蛋白質是大腸桿菌的外膜蛋白的主要成分這一。micF RNA是從另一基因(ompC基因)附近的DNA序列轉錄而來，和o-mpFn RNA的5'端有70%的序列互補，因此在體外m
水生所揭示細菌RNA代謝調控新機制
近日，中國科學院水生生物研究所張承才團隊關于細菌中RNA代謝調控機制的研究取得了進展。相關研究成果以《藍藻中RNase E受一個保守蛋白調控》（A conserved protein inhibitor brings under check the activity of RNase E in
新發現！細菌RNA代謝調控新機制
近日，中國科學院水生生物研究所張承才團隊關于細菌中RNA代謝調控機制的研究取得了進展。相關研究成果以《藍藻中RNase E受一個保守蛋白調控》（A conserved protein inhibitor brings under check the activity of RNase E in
BIOG細菌RNA提取試劑盒使用說明
特點◎提取RNA純度高，無抑制劑，A260/A280為1.8-2.0；◎產率高，同樣的樣本量提取的RNA更多。◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑，安全無毒。◎對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌有較好的提取效果。試劑盒組成 組分 50次
科學家發現首個細菌中的RNA修復系統
美國伊利諾伊大學香檳分校生物化學系教授Raven H. Huang及其同事首次在細菌中發現了RNA修復系統。這是迄今為止發現的第二個RNA修復系統，第一個為噬菌體(可攻擊細菌的一種病毒)中的帶有2個蛋白的RNA修復系統。相關文章發表在本月的美國《科學》雜志以及《美國國家科學院院刊》上。
RNASeq，區分細菌和病毒感染新工具
在臨床治療中，準確鑒定細菌感染和病毒感染至關重要，這關系到治療干預方案選擇和抗生素耐藥隱患預防。 例如下呼吸道感染（lower respiratory tract infections，LRTIs），不同病原體引起的不同疾病有著相似的臨床癥狀，讓醫生很難做出正確診斷。 如今，羅切斯特大學醫學
抑制細菌轉錄終止檢測技術篩選RNA結合蛋白實驗
一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。實驗材料N-表達質粒E.coil N567 感受態細菌試劑、試劑盒儲
抑制細菌轉錄終止檢測技術篩選RNA結合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。 實驗材料 N-表達質粒 E.coi
抑制細菌轉錄終止檢測技術篩選RNA結合蛋白實驗
實驗方法原理 一種通過篩選重組 cDNA 文庫研究多肽與 RNA 相互作用的細菌抗轉錄終止檢測系統。實驗材料 N-表達質粒E.coil N567 感受態細菌試劑、試劑盒 儲存液緩沖液儀器、耗材 蛋白胨培養基蛋白胨平板N-表達質粒組合文庫培養板實驗步驟 ―、材料與設備1. 通過比較 β-半乳糖苷酶表達
ATM機器究竟暗藏多少細菌？讓RNA測序來告訴你
比起在銀行柜臺排隊取錢，使用自動柜員機（ATM）算是一種非常便捷的方式。不過，大家要小心，ATM可是暗藏了不少的細菌。近日，紐約大學的研究人員對紐約市多臺ATM鍵盤上的細菌和真菌進行測序分析，發現了一系列微生物代表，不過總體多樣性較低。 紐約大學的Maria Gloria Dominguez-
研究發現非編碼RNA控制高毒力超級細菌感染致病
8月13日，中國科學院上海免疫與感染研究所晁彥杰研究組在《自然-通訊》（Nature Communications）上發表了題為RNA interactome of hypervirulent Klebsiella pneumoniae reveals a small RNA inhibito
武漢病毒所在病原細菌小RNA調控機制研究中取得進展
小RNA(Small non-coding RNA, sRNA)是細菌重要的轉錄后調控因子，廣泛參與調控細菌各方面的功能。由于不同sRNA調控的靶標及其調控機制不相同，多數已鑒定sRNA 的靶基因未知，且一些已知靶基因的sRNA 是否存在新的調控靶標及調控機制也不清楚，因此sRNA一直是原核生物
細菌提質粒最后一步為什么要加入無rna酶得水
只要是純水就可以了，在無金屬離子輔助下，DNA酶一般不起作用。要沒RNA酶，可能是為了之后的實驗考慮吧
中科院團隊發現抑制高毒力超級細菌感染致病的非編碼RNA
近日，中國科學院上海免疫與感染研究所晁彥杰研究組在《自然-通訊》（Nature Communications）上發表了題為RNA interactome of hypervirulent Klebsiella pneumoniae reveals a small RNA inhibitor of
RNA干擾技術(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技術可用在研究與胚胎發育相關基因的功能上，但是由于細胞分裂造成 dsRNA 的稀釋，使得這種方法在研究成體的基因功能時有一定的局限性。為彌補早期 RNAi 技術的不足，Tavernarakis 等將 RNAi 技術做了一些改進及更動，將目的基因之標的序列以反向重復的方式，由
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面，基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物（genetically modified organisms）的障礙，另一方面，它又是植物抵抗外來核酸入侵（如病毒）的一種反應，為植物抗病毒的遺傳育
RNA提取時RNA降解原因
1 ) 新鮮細胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鮮組織： 某些含有內源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時采用更多的裂解液。 3 ) 冷凍樣品： 樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉移到-70℃冰箱存
定量PCR方法對水源中細菌RNA進行精確定量－人elisa試劑盒
?定量PCR方法對水源中細菌RNA進行精確定量 人elisa試劑盒前 言水源中病源微生物的存在情況與人類健康息息相關（21，28）。傳統的細菌培養檢測方法不僅耗時，而且無法確定細菌的存活情況；PCR方法的應用便使上述問題得到了解決，并由此發展出多種針對水體病源微生物的檢測方法（7，9，13）。但由于
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
反義技術——RNA干擾（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干擾（RNA interference，RNAi）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA
RNA分離與分析實驗_分離RNA
實驗材料標記細胞試劑、試劑盒乙酸緩沖液儀器、耗材漩渦器實驗步驟1. 收獲標記細胞。2. 小心處置上清液，用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸緩沖液懸浮細胞沉淀，每 1 ml 壓積細胞用 10 ml 緩沖液。3. 于室溫用漩渦器振蕩裂解細胞。4. 加等體積的水飽和酚，充分混勻，于 60
RNA干擾相關知識RNARITS）
RNA-induced initiation of transcriptional gene silencing（RITS）：是一種組織染色質變型的復合物。RITS復合物也包含Dicer加工形成的siRNA和AGO蛋白質，通過結合到異染色質的基因池上來促使異染色質上基因的沉默。
RNA干擾相關知識RNARISC
RNA-induced silencing complex（RISC）：一種RNA-蛋白質復合物，通過與目標mRNA完全或者部分的互補配對來實施切割或者翻譯抑制功能。SiRNA組裝siRISC，miRNA組裝miRISC。RISCs（無論siRISC還是miRISC）包括兩種類型：切割型和不切割型。