不同大小的蛋白質分子進入膠體過濾管柱,可依其分子量差異分離;是一種廣泛應用的蛋白質partition色析法 。實驗材料Sephacryl S-300膠體試劑、試劑盒緩沖液buffer A-150儀器、耗材色析管柱鐵夾試管鐵架水平儀收集器濃縮用離心機 濃縮用離心管實驗步驟一、儀器設備色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6x100 cm)、鐵架、鐵夾及水平儀;部分收集器(fraction collector, 需準備干凈試管約100 支);濃縮用離心機 (低速5,000 rpm);濃縮用離心管Centriprep-30 (Amicon 4322) 請注意其使用方法。 二、藥品試劑膠體Sephacryl S-300 (Pharmacia):a. 預先以緩沖液buffer A-150 平衡好,并且使完全沈降后的膠體體積,占全部體積的七至八成;要先預估好膠體的使用量。b. 膠體溫度要與操作場所的溫度......閱讀全文
繼三大標記技術(熒光素、放射性同位素和酶)之后,一種固相標記免疫測定技術--免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique, ICG)逐漸發展起來。它是以膠體金作為標記物,利用抗原抗體特異性反應,對抗原或抗體物質進行定性乃至定量研究的標記技術。近年來,該技術因其操作簡
實驗概要本實驗介紹了蛋白質純化膠體過濾法,不同大小的蛋白質分子進入膠體過濾管柱,可依其分子量差異分離。主要試劑1. 膠體Sephacryl S-300 (Pharmacia):a. 預先以緩沖液buffer A-150 平衡好,并且使完全沉降后的膠體體積,占全部體積的七至八成;要先預估好膠體
膠體金標記實驗的實驗過程主要包含以下步驟:膠體金標記蛋白的制備及其與膠體金之間的用量比例的確定、膠體金和蛋白的結合、膠體金標記蛋白的純化與質量檢測等。1、蛋白質的處理:膠體金標記蛋白的制備膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值,在接近蛋白質的等電點或偏堿的條件下,二者容易形成牢固的結合物。如果膠體金的p
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群,使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度,那么銀
蛋白質組實驗流程雙向電泳的樣品的制備樣品制備原則樣品制備是雙向電泳中最關鍵的一步,將直接影響2-DE結果好壞。目前并沒有一個通用的樣品制備方法,盡管處理方法多種多樣,但都遵循幾個基本的原則:1)盡可能的提高樣品蛋白的溶解度,抽提最大量的總蛋白,減少蛋白質的損失;2)減少對蛋白質的人為修飾
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質,而且是具有潛力的新一代營養保健食品,因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要,讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 一、實驗目的 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法,了解其意義及其應用價值。 二、實驗原理 植
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質,而且是具有潛力的新一代營養保健食品,因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要,讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 一、實驗目的 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法,了解其意義及其應用價
考馬斯亮藍有G250和R250兩種,在顏色索引(Colour Index)中給出了不同的編號(42655和42660)。亮藍G和亮藍R在冷水中分別為微溶和不溶,在熱水和乙醇中分別為可溶和微溶。兩種染料均能對固定的蛋白進行有效地染色,使用濃度為溶于甲醇:冰醋酸:水(50:10:40)的0.05%溶
快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。 1、食品安全問題主要有害污染物 (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 
實驗概要本實驗介紹了溶菌酶(lysozyme)的制備及其性質測定的原理和操作方法。實驗原理溶菌酶(lysozyme)是由弗萊明在1922年發現的,它是一種有效的抗菌劑,全稱為 1,4-β-N-溶菌酶,又稱作粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶或胞壁質酶。活性中心為天冬氨酸52和谷氨酸35,是一種
免疫球蛋白提取技術可應用于:(1)推知機體的體液免疫功能;(2)診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。實驗方法原理隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數采用二步法以上相結合的方法,特別是以硫酸銨提純為基礎,再經過層析柱的方法來提高免
水的基本性質 ?1個水分子(H2O)是由1個氧原子和2個氫原子彎曲鍵結而成。由于正、負電荷的中心不一致,因此屬于極性分子。當2個水分子同時存在時,二者會由靜電交互作用與氫鍵結合,互相吸引并保持一定的距離。而1個水分子可以同時與4個水分子結合,形成晶體般的整齊結構。 ?水分子聚合體中,由于氫鍵
免疫球蛋白提取技術 實驗方法原理 隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可
所謂實驗,是指對現象所推測的假設加以驗證的動作。假設能否被證明為真理,與假設能否具有再現性的結果至關重要。實驗的再現性除了要有良好的技巧,還受到所用化學試劑的純度和分析儀器的精密度的影響。實驗中用來配置溶液的化學試劑,及所使用的水的純度也非常重要。假設水中污染物對實驗檢測會造成影響,就必須去除這
▼水中存在的雜質 ?可溶性無機物:無機鹽類、溶解氣體、重金屬、硬度成分(鈣、鎂等) ?可溶性有機物:木質素、單寧、腐植酸、內毒素、RNA分解酶、農藥、三氯甲烷、環境荷爾蒙物質、界面活性劑、有機溶劑 ?微粒子:鐵銹、膠體、懸浮物、固體顆粒 ?微生物:細菌類、藻類▼實驗用水所要求的純度 所謂實
反滲透膜的孔徑只有超濾膜的1/100比例大小,因此反滲透水處理設備能夠有效去除水質當中的重金屬、農藥、三氯甲烷等化學污染物,超濾凈水器對此則是無能為力的。而超濾凈水器能去除的顆粒污染物及細菌,反滲透全能去除。 反滲透膜與超濾膜的優劣對比
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
新年將至,又到了年終盤點的時候。美國化學會(ACS)旗下的C&EN網站也端出了一席年終大餐:2015年化學領域最受矚目的研究成果。其實,在過去的這一年中一直關注X-MOL的讀者朋友也許會發現,其中絕大多數成果已經在X-MOL平臺報道過了。不過,我們覺得,在這節日的氣氛中,讓這一
詳細闡述利用親和層析分離蛋白質的過程,進行蛋白質分析時,需將此規模縮小至微量離心管中進行免疫沉淀過程,對于單一的蛋白質或由相同亞基組成的蛋白質,經單向凝膠電泳后檢測到單一的 蛋 白 質 條 帶對熒光染色法進行了闡述,它主要用于磷蛋白和糖蛋白的檢測。為了確定蛋白質是否是特異性抗原,可采用相對應的抗體進