實驗材料非肌肉肌動蛋白試劑、試劑盒DNA 酶Ⅰ緩沖液儀器、耗材DEAE 柱實驗步驟1. 準備貯存液和材料。2x DNA 酶Ⅰ緩沖液:20 mmol/L Tris-HCl,pH 8.01 mmol/L DTT0.4 mmol/L CaCI20.4 mmol/L ATP抑蛋白酶肽抑蛋白酶亮抑蛋白酶肽抑胃酶肽 APMSFTPCK50% 甲醛在 DNA 酶柱緩沖液中0.4 mol/L NH4CI 在 DNA 酶Ⅰ緩沖液中0.3 mol/L KCl 在 DNA 酶Ⅰ緩沖液中DNA酶Ⅰ柱緩沖液2. 準備一個 5~10 ml 的 DNA 酶Ⅰ的親和柱。3. 準備一個 0.2 ~1 ml 的 DEAE 柱:用 DNA 酶Ⅰ緩沖液平衡的 DEAE-纖維素。4. 通過離心收集細胞并用等滲鹽溶液(例如 PBS ) 洗去培養液。5. 在加蛋白酶抑制劑的 DNA 酶柱緩沖液中重懸細胞沉淀物。6. 用對于感興趣細胞的標準方法進行細胞勻漿。7. 用相差顯微鏡......閱讀全文
非肌肉肌動蛋白的純化 實驗材料 非肌肉肌動蛋白 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 DNA 酶Ⅰ緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
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實驗材料 非肌肉肌動蛋白 試劑、試劑盒 DNA 酶Ⅰ緩沖液 儀器、耗材 DEAE 柱 實驗步驟 1. 準備貯存液和材料。 2x DNA 酶Ⅰ緩沖液: 20 mmol/L Tris-HCl,pH 8.0 1 mmol/L DTT 0.4 mmol
實驗材料 冷凍肌肉 試劑、試劑盒 肌球蛋白抽提溶液 儀器、耗材 玻璃器皿 實驗步驟 1. 準備下面的貯存液(都冷卻到 4℃)。 肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl,0.1 mol/L K2HPO4 幾升冷的用玻璃器皿蒸餾過的水(dH2O) 4 mol/L
肌球蛋白的純化DEAE純化肌肉肌球蛋白實驗材料冷凍肌肉 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒肌球蛋白抽提溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
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實驗材料 肌肉肌球蛋白 試劑、試劑盒 焦磷酸鈉柱平衡緩沖液柱緩沖液高鹽緩沖液肌球蛋白-DEAE 透析緩沖液 儀器、耗材 SDS-PAGE 實驗步驟 一、準備 DEAE 柱和材料 1. 準備貯存液和材料 200 mmol/L 焦磷酸鈉(NaPPi )
實驗材料 非肌肉肌球蛋白 試劑、試劑盒 勻漿緩沖液肌動蛋白聚合緩沖液凝膠過濾 羥基磷灰石緩沖液GF HT 緩沖液 儀器、耗材 大容量轉頭 實驗步驟 高速離心和 DEAE 層析 1. 用不含除了 PMSF 以外的蛋白水解抑制劑的勻漿緩沖液平衡 DEAE
實驗材料 肌球蛋白 試劑、試劑盒 肌球蛋白抽提溶液 儀器、耗材 離心機 實驗步驟 1. 抽提肌球蛋白時得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物體積的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分鐘。 肌球蛋白抽提溶液: 0.5 mol/L KCl 0.1 mol/L K2
細胞勻漿 非肌肉肌球蛋白的層析純化 實驗材料 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖鹽溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?