特殊細胞培養實驗_一、二倍體細胞培養法
實驗方法原理二倍體細胞來源體內二倍體細胞,也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀,便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養,但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀,亦非易事。為此必須采取一些有效的措施,一是低溫凍存,二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲得大量細胞和維持細胞長期生存的辦法是不妥的。因在反復傳代中,難免由于培養條件的變化和其它不利影響,使細胞生物學性狀發生變化。隨時間延長不僅能導致細胞停止生長,并可失掉二倍體性狀或發生轉化。實驗材料細胞試劑、試劑盒培養液BSS胰蛋白酶消化液儀器、耗材培養瓶實驗步驟二倍體細胞培養方法與一般培養相同,關鍵在于傳代,其傳代程序為1. 吸除舊培養液注入另瓶中;2. 用BSS沖洗1 次;3. 用0.25%胰蛋白酶消化,加入消化液量以僅覆蓋住細胞層即可;作用1~5 分鐘;4. 待細胞附著松動、......閱讀全文
特殊細胞培養實驗_一、二倍體細胞培養法
實驗方法原理二倍體細胞來源體內二倍體細胞,也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀,便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養,但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀,亦非易事。為此必須采取一些有效的措施,一是低溫凍存,二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲得
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期,最早使用離子交換凝膠作為載體,輕微攪動即可懸液在培養基中,因而可增加細胞附著的面積,達到大量培養細胞的目的。后來,根據細胞附著生長的特點,對微載體進行了改良,使其帶有電荷或其它介質,更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養,也可用于大規模的培養
特殊細胞培養實驗_懸浮培養法
實驗方法原理懸浮培養是使貼附性細胞呈懸浮狀態生長。如所培養的細胞本身屬懸浮生長類型,則無須做任何處理,在傳代時先做離心處理去除舊培養液,添加新培養液即可。但在培養貼附型細胞時,因其有貼附性,必須進行干擾使細胞不能貼附,才能形成懸浮狀態生長的細胞。實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶攪拌器實驗步驟1. ?用大
特殊細胞培養實驗
一、二倍體細胞培養法 加支持物培養法 單細胞分離培養法 多孔塑料培養板單細胞克隆法 球體細胞培養實驗 微載體細胞培養法 懸浮培養法
特殊細胞培養實驗
實驗方法原理 二倍體細胞來源體內二倍體細胞,也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀,便成為二倍體細胞培養。 二倍體細胞雖不難培養,但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀,亦非易事。為此必須采取一些有效的措施,一是低溫凍存,二是妥善的培養方法。
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質,如細胞長成片之后,讓細胞片與底物脫離,更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時,則細胞片能卷聚成球體形,成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶,每
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上,初代培養細胞和有限細胞系(二倍體細胞)比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是,當體內任何細胞被置于體外培養后,對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用,即從培養液中攝取營養的同時,也向培養液排
二倍體細胞培養法介紹
二倍體細胞培養法與一般培養相同,關鍵在于傳代,其傳代程序為: (1)吸除舊培養液注入另瓶中。 (2)用溫BSS沖洗1次。 (3)用0.25%溫胰蛋白酶消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。 (4)待細胞附著松動、細胞質邊緣卷起和間隔加大,便終止
特殊細胞培養實驗_加支持物培養法
實驗方法原理 加支持物培養法是預先向培養容器中加入各種可使細胞貼附的支持物,進行培養的方法。 待細胞貼附于支持物生長增殖后,可進行各種實驗和觀察。觀察時可把支持物從瓶中抽出,能做各種技術處理,是研究工作中常用的方法之一。 各種對細胞無毒性的如玻璃、塑料、雞卵殼膜、膠原、硅橡膠、袋泡茶包
特殊細胞培養實驗_多孔塑料培養板單細胞克隆法
實驗方法原理多孔塑料培養板克隆細胞的主要過程是1. ?制備出1~2 細胞/毫升低密度的細胞懸懸液;2. ?向多孔塑料培養板各孔中分別接種細胞懸液0.5~1 ml,則每孔平均含1 個細胞。3. ?鏡下檢測每孔所含細胞數,標記下含單細胞的孔,置溫箱培養,數日后凡在已標記的孔中有生長增殖的細胞群即為克隆細