單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料單層細胞試劑、試劑盒PBS多聚甲醛甲醇抗體儀器、耗材離心機水浴鍋培養箱實驗步驟1. 置生長成片的單層細胞于冰上冷卻，吸去培養液并以4℃PBS洗滌。吸去PBS。2. 如欲研究細胞表面抗原，則以2%PFA于冰上面定30 min。如為細胞質抗原，則可用含0.1% Triton X-100的2%PFA于冰上固定30 min，或以100%甲醇在普通冰箱的結凍室（-10~-20℃）固定15 min。 3. 吸去固定液，用......閱讀全文
單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記是微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用。實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光
單層生長細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 單層細胞試劑、試劑盒 PBS多聚甲醛甲醇抗體儀器、耗材 離心機水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?置生長成片的單層細胞于冰上冷卻，吸去培養液并以4℃PBS洗滌。吸去PBS。2. ?如欲研究細胞表面抗原，則以2%PFA于冰上面定30 min。如為細胞質抗原，則可用含0.1% Triton X-10
免疫組織化學法實驗——單層生長細胞的免疫熒光標記
實驗材料在3?5 cm培養皿上生長的單層細胞（培養皿越小所需的抗體就越少 但培養皿應適合顯微鏡下觀察）試劑、試劑盒VPBS40℃2% (m V)高聚甲醛（PFA)固定液 4℃ 用于細胞表面抗原固定100%甲醇 -10?-20℃ (置于冰箱的結凍室冷卻較為理想）；或含0.1% (V V) Triton
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記單層培養細胞
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒FCS磷酸鹽儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加?32P 磷酸鹽至 2
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 懸浮細胞試劑、試劑盒 多聚-L-賴氨酸儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 1. ?細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機于4℃以800 g 離心5 min，吸去培養液并以4℃PBS重懸細胞。?2. ?離心吸去PBS，以1~2 ml 2%PFA固定液，或2%PFA固定液/0.1% Triton X
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒多聚
培養瓶中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理開始一系列的培養，每天在一定的時間計數細胞直至它們到達平臺期。實驗步驟材料無菌單層細胞培養，A549,Vem 或 HeLa-S3, 75 cm2?培養瓶，晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶，混合有 lOmmol/L EDTA 5 ml生長液，含 2 mmol/LNaHC03?200
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞，在達到平臺期之前，每天計數一個板中的細胞。實驗步驟材料無菌單層細胞培養：A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm2?培養瓶，晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml生長液，100 ml,
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理 以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞，在達到平臺期之前，每天計數一個板中的細胞。實驗步驟 材料無菌單層細胞培養：A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm2 培養瓶，晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml生長液，100 m
免疫熒光共標記怎么計算共標記的細胞個數
共定位的定義：共定位是對樣品內兩種熒光標記的信號共同分布的位置進行分析。 共定位就如字面意思上所說的，只能夠表明蛋白A和B都在此細胞有表達，并且在同樣的細胞內位置/細胞器。相關短語：共定位通道 PDM Channel 細胞共定位 Cellular co localization 細胞內共定位信息 c
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞，在達到平臺期之前，每天計數一個板中的細胞。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養：A549、V
培養瓶中單層培養細胞生長曲線的繪制
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 開始一系列的培養，每天在一定的時間計數細胞直至它們到達平臺期。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養，A549,Vem 或 HeLa-S3,
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
實驗方法原理取一定量的細胞懸液，先加入特異的第一抗體，待反應完全后洗去未結合抗體，在加入熒光標記的第二抗體，生成抗原-抗體復合物，以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。實驗材料實驗樣品試劑、試劑盒抗體、PBS溶液儀器、耗材移液器移液吸頭離心機實驗步驟一、不同來源樣品的處理1 . 培養細
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取一定量的細胞懸液，先加入特異的第一抗體，待反應完全后洗去未結合抗體，在加入熒光標記的第二抗體，生成抗原-抗體復合物，以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。 實
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取一定量的細胞懸液，先加入特異的第一抗體，待反應完全后洗去未結合抗體，在加入熒光標記的第二抗體，生成抗原-抗體復合物，以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。 實
免疫學技術:懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗方法基本方案實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PB
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 PBS抗體儀器、耗材 玻片加濕盒實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3. ?稀釋的第
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 第一抗體IgG實驗步驟 1. ?當進行雙標記實驗時，最重要的準則是：第一抗體應為不同類型，從而使第二抗體能分別識別之。第一抗體最好是來源于不同免疫動物。但如使用單克隆抗體，這一要求就有可能達不到，當使用單抗時，不同型的抗體如IgG和IgM，可被第二抗體確切區分
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
間接免疫熒光顯微鏡檢術可使兩種或更多種抗原可以在同一切片，同一時間內被顯示出來，可用于（1）細胞標記；（2）免疫熒光篩選干細胞。實驗方法原理通過使用激發波長及發射波長均不相間的熒光染料而進行的。通常限用兩種熒光染料，最常見的是羅丹明（綠光激發，發射紅光）和熒光素（藍光激發、發綠光）聯合使用。實驗材料
病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法：較為常用，具體步驟是：1) 抗體溶液的制備：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素：根據待標記抗體的總量，按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白
?－免疫組織化學法實驗——懸浮細胞的免疫熒光標記
實驗材料細胞生長于含培養液的15 mL Falcon管中試劑、試劑盒PBSPFA固定液儀器、耗材多聚L-賴氨酸包被的載玻片實驗步驟1) 細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機在4℃以800 g離心5 min (用于淋巴細胞）。吸去培養液并以4℃的PBS重懸細胞。離心機轉速依細胞類型進行調整，但必須低轉速
體細胞融合實驗——單層培養細胞的融合
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG-1000儀器、耗材培養基實驗步驟1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度（80% 匯合率）。2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基，加 2 ml 50% PEG-1000，輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。3. 往培養皿或瓶中
體細胞雜交實驗——單層全細胞融合實驗
實驗材料匯合至一定程度的受體細胞試劑、試劑盒受體細胞適合生存的培養基合適的選擇性試劑含感興趣染色體及合適遺傳標記的供體細胞儀器、耗材10 cm 組織培養板25 cm 組織培養瓶倒置相差顯微鏡實驗步驟基本方案 單層全細胞融合1.倘若不知道細胞的選擇條件，通過以下方式來確定：將培養于 25 cm 培養瓶
免疫熒光標記的應用
半個多世紀以來，經過許多學者不斷改進和發展，使此項技術成為微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用，使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。
流式細胞儀檢測的免疫熒光樣品標記
用于流式細胞儀檢測的常用熒光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5，PE和PI，在以上各種熒光染料中，PE熒光最強，適用于弱表達抗原；FITC最便宜，適用于強表達抗原，適用范圍廣。??? 1．直接免疫熒光標記法 取一定量的細胞懸液(濃度約l×l06個/m1)，直接加入熒光素標記抗體進行免疫反應(
細胞免疫熒光實驗步驟
細胞免疫熒光主要用于蛋白定位研究和細胞內信號轉導，細胞免疫熒光技術是利用免疫技術和熒光標記技術相結合，原理就是利用抗原-抗體反應之后，采用熒光標記，標記完成后，顯微鏡下觀察細胞內某種抗原成分的多少，從而做出一個定位研究，也可以為細胞內信號傳導提供一個明確的指導，細胞免疫熒光具有敏感性強、特異性高、速
細胞免疫熒光染色實驗
實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
細胞免疫熒光染色實驗
實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物，若有指征，如PH降低，則去除舊培養基加如新鮮培養基，再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞：A549細胞，以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如：Eagle1×MEM含H