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  • 植物組織和細胞顯微化學染色_植物組織中酶檢測方法

    實驗步驟植物組織中酶的組織化學鑒定,其基本原理是以某些物質為基屈,在專一酶的作用下,產生 種有顏色的化合物來表示某種酶的存在。為保持酶的活性,通常要采用冰凍切片法來得到切片,有時也可用徒手切片法。(1)細胞色素氧化酶:將切片放人磷酸緩沖液 (pH 值 5.8) 中,室溫下放置 5-10min, 然后移入巳配備好的 1%α-萘酚和 1%鹽酸對氨基二甲胺的等量混合液中,約 5min 后取出,放在載玻片上,加 1滴重蒸餾水,蓋上蓋玻片后鏡檢.顯示藍色的部位即有細胞色素氧化酶存在。(2) 過氧化物酶:將切片先在磷酸緩沖液 (pH 值 7.2) 中浸泡 5min 后,放入 0.1%鉬酸銨溶液中于溫下浸泡 5 min, 再移入 0.1%聯苯胺溶液(聯苯胺 0.1g, 蒸餾水 100ml, 加熱溶解,冷卻后加入 30%的過氧化氫1滴。)中 0.5-1.0 min, 取出放在載玻片上,加蒸餾水 1滴,蓋上蓋玻片后鏡檢,顯示藍色部位即有過氧化物酶......閱讀全文

    免疫組織/細胞化學染色1

    一 基本原理免疫組織/細胞化學是利用抗原抗體具有高度特異性結合反應的原理,采用已知抗體檢測組織或細胞的抗原物質,然后以適當的方式顯示其結合信號以證明組織或細胞是否存在未知抗原,并進行定性、定位或定量的研究。二 基本步驟 1 三步法:以SP(鏈霉卵白素-過氧化物酶)試劑盒為例: 石蠟切片脫蠟至

    植物組織mRNA的提取方法

    實驗概要本實驗介紹了植物組織mRNA的提取方法。實驗原理由于mRNA末端含有多poly(A) ,當總RNA流徑oligo(dT)纖維素時,在高鹽緩沖液作用下,mRNA被特異的吸附在oligo(dT)纖維素柱上,在低鹽濃度或蒸餾水中,mRNA可被洗下,經過兩次oligo(dT)纖維素柱,可得到較純的m

    植物組織中淀粉含量的測定

    【原理】 淀粉是由葡萄糖殘基組成的多糖,在酸性條件下加熱使其水解成葡萄糖,然后在濃硫酸的作用下,使單糖脫水生成糠醛類化合物,利用苯酚或蒽酮試劑與糠醛化合物的顯色反應,即可進行比色測定。 【 儀器 與用具】 電子天平;容量瓶:100ml×4,50ml×2;漏斗;小

    細胞組織植物方面的應用

      微繁殖技術  通過莖尖培養或微嫁接技術,可以脫去植物體內的病毒,獲得無病毒苗木,如蘋果、草莓等。另外,在組織培養過程中,如愈傷組織培養、細胞懸浮培養、原生質體培養等,通過pH值、溫度、離子濃度等條件的變化,可增加其變異,從中可篩選出優良的突變體,從而為新品種的選育開辟一條嶄新的途徑。  愈傷組織

    植物組織直接PCR

    實驗概要本實驗以擬南芥葉片為試材介紹了一個不用提取DNA直接進行PCR的簡單方法。主要試劑0.25N?? NaOH0.25N??? HClNP-40緩沖液:0.5N Tris-HCI, pH8.0 ,25% NP-40實驗步驟1. 取面積約為lmm2的植物葉片放在500ul離心管中,加入40ul的0

    植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_壓片法

    實驗方法原理將植物的幼嫩器官如根尖、莖尖和幼葉等經過處理后,被涂抹或壓在載玻片上,使組織成一薄層然后進行觀察的制片方法。染色后可做臨時的觀察標本,也可以經過脫水、透明等步驟制成永久的玻片標本。實驗材料植物的幼嫩器官如根尖、莖尖和幼葉試劑、試劑盒酒精儀器、耗材玻片鑷子實驗步驟1 幼根的培養取洋蔥或大蒜

    組織細胞化學染色的范圍

      結締組織、肌肉組織、神經組織、血液、造血組織、內分泌細胞、骨組織、軟骨組織、蛋白質(氨基酸、酶類)、核酸、多糖、脂類、色素類、內外源性沉著物、鹽類或金屬類、病原微生物等。

    植物組織培養的培養方法

    1、非試管微組織快繁非試管微組織快繁技術是將外植體(一般要求帶一葉一芽)放置在室內外普通沙子培養基上進行培養,利用植物腋芽自然倍增達到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生長出根系。此技術投資低,操作環節少。2、試管組織培養試管組織培養是將外植體(即離體組織、器官或細胞)放置在組培瓶等器皿中在無菌

    植物組織培養材料與方法

    從低等的藻類到苔蘚、蕨類、種子植物等高等植物的各類、各部分都可采用作為組織培養的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韌皮部細胞,被子植物采用胚、胚乳、子葉、幼苗、莖尖、根、莖、葉、花藥、花粉、子房和胚珠等各個部分。由于植物在自然條件下,表面常被霉菌和細菌污染,故材料必須進行滅菌處理。一般用漂白粉溶液(

    植物組織蛋白質提取方法

    1、植物組織蛋白質提取方法(summer)1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清

    植物組織中超氧物歧化酶活力的測定

    實驗概要?超氧物歧化酶(SOD)普遍存在于動、植物體內,是一種清除超氧陰離子自由基(O2- )的酶,它催化下列反應: ? ? ? ? ? ? ? ? 反應產物H2O2可被過氧化氫酶進一步分解或被過氧化物酶利用。因此SOD有保護生物體免受活性氧傷害的能力。已知此酶活力與植物抗逆性及衰老有密切關系,故成

    植物組織中蔗糖酶活力的測定

    一、目的 了解植物 ?組織中提取蔗糖酶的方法,掌握蔗糖酶活力測定的原理。二、原理 本實驗以Nelson 方法測定酶活力,其原理是:蔗糖酶可將非還原性的蔗糖水解為葡萄糖和果糖,而葡萄糖作為還原糖含有的自由醛基,在堿性溶液中將Cu 2+ 還原,還原糖本身被氧化成羥酸;砷鉬酸試劑與氧化亞銅生成藍色復合物(

    植物組織培養中的無菌技術

    一、目的要求? 通過實驗掌握植物組織培養中的無菌操作技術。學習培養基的配制及滅菌,掌握植物外植體表面消毒的常規方法。 二、基本原理近年來,植物組織培養作為一種研究技術已被廣泛。植物組織培養是應用無菌操作方法培養植物器官或組織地任何一部分,甚至單個細胞的觀察。植物組織培養中的無菌

    植物組織中DNA的提取與測定

    一、原理 脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是一切生物細胞的重要組成成分,主要存在于細胞核中,鹽溶法是提取DNA的常規技術之一。從細胞中分離得到的DNA是與蛋白質結合的DNA,其中還含有大量RNA,即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開是技術的關鍵。D

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:間接法

    一、原理與意義?免疫熒光組織(細胞)化學染色方法——間接法,是一種熒光抗體染色法。該方法只需制備一種熒光抗體可以檢出多種抗原,敏感性較高,操作方法較易掌握,而且能解決一些不易制備動物免疫血清的病原體(如麻疹)等的研究和檢查,所以已被廣泛應用于自身抗體和感染病人血清的試驗。?二、操作流程?(一)雙層法

    植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_石蠟切片法

    實驗方法原理石蠟切片技術是顯微技術上最重要最常用的一種方法。其優點在于①應用范圍廣,幾乎適用于所有的植物材料;②能將材料切成厚薄均一的切片,較清楚地顯現細胞、組織的細微結構;③能切成連續蠟帶,可觀察細胞和組織的動態發生及層次變化過程;④切片可以長期保存,便于以后觀察比較。缺點是:操作程序比較復雜,需

    植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_徒手切片法

    實驗方法原理徒手切片法是指手拿刀片,將新鮮材料或預先固定好的材料切成薄片,不經染色或經簡單染色,制成水裝片后進行臨時觀察,必要時經鏡檢后可選擇好的薄片經過脫水與染色等制片步驟,制成永久玻片標本供長期使用。此方法的優點是不需要復雜的設備,方法簡使,制片迅速,而且能觀察到植物組織的天然色澤和活體結構,常

    植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_超薄切片技術

    實驗材料植物組織試劑、試劑盒包埋劑儀器、耗材切片機實驗步驟1 取材:用于固定的材料要求切割成 1mm3而大小的小塊。太大固定液不易透入,造成材料內外固定不均;太小則材料受損傷的比率增高。取材時應注意:由于取材時要求切的組織塊很小,組織受損傷的比例相當大,這無疑會引起細胞代謝的巨大變化,因此,切取后的

    植物組織培養中的脫分化和再分化

    植物組織培養(plant tissue culture)的理論根據是植物細胞的全能性。但是,在一個完整的植株上,各部分的體細胞只能表現一定的形態,承擔一定的功能,這是由于受具體器官或組織所在環境影響的緣故。植物體的一部分一旦脫離原來所在的器官或組織,成為離體狀態時,在一定的營養、激素等外界條件下,植

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    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:補體法原理和操...

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:補體法原理和操作指南一、原理與意義免疫熒光組織(細胞)化學染色方法——補體法,是一種熒光抗體染色法。本法之熒光抗體不受免疫血清的動物種屬的限制,因而一種熒光抗體可作更廣泛的應用,敏感性亦較間接法高,效價低的免疫血清亦可應用,節省免疫血清,尤其是對檢查形態小的如立克氏

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:直接法原理和操...

    免疫熒光組織(細胞)化學染色方法:直接法原理和操作流程一、原理與意義免疫熒光組織(細胞)化學染色方法——直接法,是一種熒光抗體染色法。該方法比較簡單,適合做細菌、螺旋體、原蟲、真菌及濃度較高的蛋白質抗原如腎、皮膚的檢查和研究。此法每種熒光抗體只能檢查一種相應的抗原,特異性高而敏感性較低。二、操作流程

    植物組織的觀察實驗

    [目的要求] 1.掌握植物細胞有絲分裂和減數分裂各時期的特征。 2.掌握植物分生組織和各種成熟組織的形態、位置、結構及功能。 3.學習簡單地離析組織的方法。 [材料用品] 材料:蠶豆葉、煙草葉、玉米葉、小麥葉、水稻葉、椴樹莖橫切片

    植物組織水勢的測定

    植物水勢的測定先用折射儀法再用小液流法。折射儀測定法會因為植物的細胞壁而產生一定的誤差,只能得到一個不準確的值。根據這個值,就可以縮小蔗糖濃度梯度的閾值范圍,從而更快速準確的測得水勢。《植物生理學實驗》分7個部分,有28個實驗,涉及植物生理學相關實驗的基本原理、基礎知識、基本實驗技能和拓展應用,內容

    植物組織培養簡介

      植物的組織培養是根據植物細胞具有全能性這個理論,近幾十年來發展起來的一項無性繁殖的新技術。植物的組織培養廣義又叫離體培養,指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質體等,通過無菌操作,在無菌條件下接種在含有各種營養物質及植物激素的培養基上進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其

    植物成熟組織觀察實驗

    實驗方法原理1. ?掌握植物各種成熟組織的形態、位置、結構及功能。 2. ?了解不同組織間的相互聯系,維管束的結構與類型,植物組織離析法。實驗材料番薯葉片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?楝樹枝條 ?

    植物組織水勢的測定

    植物水勢的測定先用折射儀法再用小液流法。折射儀測定法會因為植物的細胞壁而產生一定的誤差,只能得到一個不準確的值。根據這個值,就可以縮小蔗糖濃度梯度的閾值范圍,從而更快速準確的測得水勢。《植物生理學實驗》分7個部分,有28個實驗,涉及植物生理學相關實驗的基本原理、基礎知識、基本實驗技能和拓展應用,內容

    植物成熟組織觀察實驗

    實驗方法原理1. ?掌握植物各種成熟組織的形態、位置、結構及功能。2. ?了解不同組織間的相互聯系,維管束的結構與類型,植物組織離析法。實驗材料番薯葉片楝樹枝條蘿卜根尖馬鈴薯塊莖橫切片南瓜莖縱橫切片椴樹莖切片梨果實玉米莖橫切片試劑、試劑盒蒸餾水番紅間苯三酚鹽酸儀器、耗材顯微鏡載玻片蓋玻片鑷子刀片紗布

    植物組織培養過程

    一、培養材料的采集組織培養所用的材料非常廣泛,可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉,有時也利用花粉粒和花藥,其中根尖不易滅菌,一般很少采用。對于木本花卉來說,闊葉樹可在一、二年生的枝條上采集,針葉樹種多采種子內的子葉或胚軸,草本植物多采集莖尖。在快速繁殖中,最常用的培養材料是莖尖,通常切塊在0.5厘

    簡介植物組織培養的培養方法

      1、非試管微組織快繁  非試管微組織快繁技術是將外植體(一般要求帶一葉一芽)放置在室內外普通沙子培養基上進行培養,利用植物腋芽自然倍增達到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生長出根系。此技術投資低,操作環節少。  2、試管組織培養  試管組織培養是將外植體(即離體組織、器官或細胞)放置在組培

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