熒光染色顯示Y染色質法
實驗方法原理在間期細胞核中,女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。女性的兩個X染色體中的一個,在間期時的染色質呈異固縮(Heteropyconosis),呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面,呈三角形或半月形小體,易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏體陽性,男性為陰性。男性Y染色質位于間期細胞核近中央部,易為鹽酸阿的平著色,熒光顯微鏡下觀察發較強熒光,呈點狀小體,發光部分系Y染色體異固縮的長臂。初代培養細胞和二倍體細胞株均可觀察到性染色質,傳代細胞系表現不規律。試劑、試劑盒Sorensen PBSAtebrine實驗步驟一、染色步驟1. 細胞蓋片培養細胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液內染色5~10 分鐘(亦可先固定再染色);如用涂片標本則應待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分鐘后再染色; 2. 分化用96 %酒精分化1 分鐘......閱讀全文
細胞轉染實驗的實驗步驟
細胞傳代(1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,
常規切片制備的注意事項(二)
? 6. 包埋 ? 用包埋劑來支持組織的過程稱包埋。最常用的是石蠟包埋法。包埋的關鍵一是平整,二是方位。要求在包埋時,應采用鑷子輕壓組織塊拱起部份,使之平貼于底部,通常采用組織的最大面包埋。囊壁、管腔組織應豎直包埋。小塊多顆組織,應盡量放在一起,并保證在一個平面上。修去兩邊的余蠟(所謂的兩邊,
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
ES細胞電穿孔 將ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 融化96孔板上的細胞 ? ? ? ? ? ?
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
ES細胞電穿孔 將ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 融化96孔板上的細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
組織病理實驗_石蠟切片法
實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱H.E.對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。實驗
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 試劑、試劑盒 DMSOPBS胰酶溶液凍存液 儀器、耗材 平底 96 孔板移液器ES 生長培養基ES 分化培養基 實驗步驟 1. 準備下列試劑和材料: DMSO(組織培養級) 平底 96 孔板 多道移液器 無菌多道
尼氏染色實驗
實驗方法原理尼氏染色法(Nissl Staining)是用堿性染料染神經組織的一種方法。尼氏體是胞質內的一種嗜堿性物質,廣泛見于各種神經元,不同神經元中的尼氏體形狀、大小和數量則各有差異。用于尼氏染色的堿性染料主要有焦油紫、亞甲藍、甲苯胺藍和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏
尼氏染色實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 尼氏染色法(Nissl Staining)是用堿性染料染神經組織的一種方法。尼氏體是胞質內的一種嗜堿性物質,廣泛見于各種
ES細胞分化培養實驗——培養皿ES細胞集落
實驗材料ES 細胞單一胚胎樣體儀器、耗材細菌培養皿ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:懸滴培養的 ES 細胞單一胚胎樣體100 mm 細菌培養皿ES 分化培養基2. 在 100 mm 細菌培養皿中加 10 ml 預熱的分化培養基。3. 從溫箱中取出培養 2 天的懸滴培養物。小心翻轉培養
石蠟切片和半薄切片的制作
實驗概要本方法介紹了石蠟切片和半薄切片的制作流程。主要試劑4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸緩沖液),乙醇,二甲苯,純石蠟,蜂蠟,樹脂膠主要設備真空泵,AO手搖式切片機,Olypmus BH-2型顯微鏡,LKB超薄切片機實驗步驟1. 石蠟切片的制作?? 1) 取材固定新鮮配置4%戊二醛固定液(pH7.
細胞的脫分化和再分化
各種植物細胞在植物體內都處于分化狀態。要使植物細胞從分化狀態過渡到有繁殖能力的分生狀態,其細胞結構必須發生深刻的變化,否則無法完成這個過渡。這種在植物體上已分化的細胞和組織,在培養條件下逐漸恢復到分生狀態的過程,叫作脫分化。已經脫分化的細胞在一定條件下,又可經過愈傷組織或胚狀體,再分化出根和芽,形成
培養細胞的染色實驗——Feulgen染色法
實驗方法原理此染色法為Feulgen早在1924年提出的一種鑒別細胞中DNA的組織化學方法。細胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解離脫氧核糖核酸,使嘌呤堿基與糖苷犍破壞,嘌呤堿脫掉,脫氧核糖的中的醛基游離;醛基能與Schiff試劑相結合,形成一種紫色的復合物。本方法中酸的離解根重要,若溫度過低
細胞凋亡檢測:形態學特征的檢測方法1
一、普通光學顯微鏡觀察方法(一)蘇木素-伊紅染色(HE 染色法)石蠟組織切片的HE染色1、取材組織塊,經固定后,常規石蠟包埋,4μm切片。2、切片常規用二甲苯脫蠟,經各級乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇
小鼠肥大細胞的形態學觀察實驗
實驗方法原理肥大細胞的胞質中充滿許多粗大的水溶性、嗜堿性和異染性的顆粒,顆粒中含有多巴胺,組胺,肝素。5-羥色胺等活性物質。這些物質中含有多硫酸脂和硫酸黏多糖類,能與異染性染料結合,因此,用中性紅、美藍、甲苯胺藍等染料處理上皮組織均可將肥大細胞胞質中的水溶性、嗜堿性和異染性的顆粒顯示出來。實驗材料成
引物介導的原位標記技術實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 中期染色體分裂相 抗地高辛抗體 試劑、試劑盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚
細胞轉染實驗的步驟
細胞傳代(1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,
細胞傷口愈合實驗步驟
1.細胞在含有10%FBS的DMEM培養基中生長。2.細胞以一定密度接種到24孔細胞培養板中,生長24小時后,單層細胞融合度應達到70-80%。3.不要更換培養基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培養細胞間劃痕,劃痕橫穿過孔,槍頭盡量與板孔的底部垂直,不要傾斜。這樣產生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑
多聚螯合物酶組化實驗——PowerVision-法
實驗方法原理PowerVision 系統的原理是連接抗體上緊密地連接上許許多多的酶分子,呈串珠狀排列,由于利用了一種小的呈線性或很小枝狀多功能試劑作為骨架分子,與酶和免疫球蛋白交聯,排列緊密,形成串珠狀多聚物,因此相對分子質量較小。其特點是簡便、敏感。其操作流程同 EnVision 法,但一抗的稀釋
肥大細胞染色實驗
肥大細胞來源于未分化的間質細胞,分布于血管周圍黏膜下、疏松結締組織、腫瘤組織及過敏性疾病等組織中,易被異染性染料著色。內容來源《免疫組織化學實驗技術及應用》實驗方法原理肥大細胞形態較大(20~30 μm),細胞核較小,細胞質內充滿許多的圓形嗜堿性顆粒。由于顆粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也屬于硫酸黏
甲基綠復染試劑盒產品說明書(中文版)使用說明
甲基綠復染試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 YIJI甲基綠復染試劑是一種旨在通過甲基綠染料的使用,使細胞核呈現淡綠色,從而與組織化學中的 樣品染色產生色彩差異和對比,便于觀察分析的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、 成功實驗證明的。廣泛應用于組織化學
甲基綠復染試劑盒產品說明書(中文版)使用說明
主要用途YIJI甲基綠復染試劑是一種旨在通過甲基綠染料的使用,使細胞核呈現淡綠色,從而與組織化學中的樣品染色產生色彩差異和對比,便于觀察分析的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。廣泛應用于組織化學的深色染料,例如BCIP/NBT,BCIP/INT或DAB等蘇木素效果欠
熒光原位雜交實驗步驟
熒光原位雜交實驗步驟1)探針變性將探針在75oC恒溫水浴中溫育5min,立即置0oC,5~10min,使雙鏈DNA探針變性。2)標本變性①將制備好的染色體玻片標本于50oC培養箱中烤片2~3h。(經Giemsa染色的標本需預先在固定液中退色后再烤片)。?????? ②取出玻片標本,將其浸在70~75
引物介導的原位標記技術實驗
引物介導的原位標記技術(primed in situ labeling,PRINS) 是一種對細胞及組織的特異 DNA 序列染色的雜交技術,它能夠得到和 FISH 技術相同類型的結果。實驗材料中期染色體分裂相抗地高辛抗體試劑、試劑盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X
植物細胞的脫分化和分化培養
一、實驗原理 分化了的植物根、莖、葉細胞往往具有全能性,在一定條件下進行離體培養,給于一定的營養與激素,可以脫分化為愈傷組織,由愈傷組織制備成細胞懸浮液,在一定的條件下經振蕩培養,逐漸形成具有兩極性的胚狀體,經過進一步的分化培養,給于不同的營養和激素成分,又可以生出完整的
谷胱甘肽的測定實驗——免疫組織法
實驗方法原理抗生物素蛋白具有與4個生物素親和力極高的結合點,ABC法是利用抗生物素蛋白分別連接生物素標記二抗和生物素標記的酶。實驗材料抗生物素蛋白試劑、試劑盒Tris-HClDAB丙酮PBS蘇木素二甲苯儀器、耗材恒溫培養箱實驗步驟一、材料準備1. ?DAB-H2O2配制:以0.05 mol/l Tr
病原微生物染色實驗——抗酸桿菌
實驗方法原理結核桿菌和麻風桿菌通常稱為抗酸桿菌,由于菌體內含有脂質蛋白質和多糖類物質,并由糖脂形成一個蠟質的外殼,當染色劑結合形成復合物后,用含酸分化劑處理也不易脫色,具有抵抗酸的作用,所以被稱為抗酸桿菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸桿菌染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙
光學和電子顯微鏡樣品制備的制片法
顯微制片法一般包括切片法、整體封片法、涂片法和壓片法4類。①切片法。光學顯微鏡的切片厚度在2~25微米之間,一般動植物材料的切片以厚10微米左右為合適。切片法根據包埋劑的不同而有所不同。常用的是石蠟切片法、棉膠切片法、冰凍切片法、乙二醇甲基丙烯酸脂法(簡稱GMA法)。石蠟切片法包括固定、包埋、切片、
間接原位PCR(原位雜交PCR)
間接原位PCR(原位雜交PCR) ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織或細胞樣品 試劑、試劑盒
脂肪來源干細胞ASCs的特征及分化實驗
脂肪干細胞的神經分化脂肪干細胞的脂肪分化脂肪干細胞的骨分化脂肪干細胞的軟骨分化實驗方法原理實驗材料脂肪干細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒神經誘導
脂肪來源干細胞ASCs的特征及分化實驗
脂肪干細胞的神經分化脂肪干細胞的脂肪分化脂肪干細胞的骨分化脂肪干細胞的軟骨分化實驗方法原理實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒神經誘導培養基PBSA儀器、耗材培養瓶實驗步驟(a)吸去培養基。(b)加人PBSA潤洗細胞。(c)加入神經誘導培養基,將培養瓶放回溫箱其他培養基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁