單細胞凝膠電泳標準操作
實驗概要本實驗介紹了單細胞凝膠電泳標準操作流程。實驗原理在細胞核中，DNA是環狀附著在核基質上，細胞裂解過程中，核基質被溶解、抽提，DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA，其遷移距離受到限制，因此尾長并不總是真實反映鏈缺口的多少。實際應當依靠尾長與尾部的熒光強度同時來進行分析。實驗步驟1. 分離制備單細胞懸液： 1) 體外培養的細胞株：用胰酶消化，吹打成單細胞懸液； 2) 體內臟器細胞：處死動物，取出臟器，于Hanks’液中制備成單個細胞懸液。 2. 膠板制備： 1) 取20~50μl于56℃水浴中保溫的0.5%普通熔點瓊脂糖，鋪于磨沙載玻片上，形成底膠。 2) ......閱讀全文
單細胞凝膠電泳介紹
單細胞凝膠電泳（single-cell gel eiectrophoresis，SCGE）又稱慧星試驗（comet assay）是一項較新的電泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于檢驗DNA單鏈斷裂以來，經過不斷的改進，已成為一種快速、靈敏、簡便的檢測DNA損傷的方法，廣泛地應用
單細胞凝膠電泳法檢測單細胞DNA損傷
單細胞凝膠電泳（single-cell gel eiectrophoresis，SCGE）又稱慧星試驗（comet assay）是一項較新的電泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于檢驗DNA單鏈斷裂以來，經過不斷的改進，已成為一種快速、靈敏、簡便的檢測DNA損傷的方法，廣泛地應用
單細胞凝膠電泳標準操作
實驗原理在細胞核中，DNA是環狀附著在核基質上，細胞裂解過程中，核基質被溶解、抽提，DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA，其遷移距離
單細胞凝膠電泳標準操作
實驗原理 在細胞核中，DNA是環狀附著在核基質上，細胞裂解過程中，核基質被溶解、抽提，DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA
單細胞凝膠電泳標準操作
實驗原理在細胞核中，DNA是環狀附著在核基質上，細胞裂解過程中，核基質被溶解、抽提，DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA，其遷移距離
單細胞凝膠電泳標準操作
實驗概要本實驗介紹了單細胞凝膠電泳標準操作流程。實驗原理在細胞核中，DNA是環狀附著在核基質上，細胞裂解過程中，核基質被溶解、抽提，DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環向陽極遷移，但是由于這
單細胞凝膠電泳的檢測原理
各種因素誘發細胞DNA 損傷后會影響DNA 的高級結構，使其超螺旅松散。這種細胞經過實驗中細胞原位裂解、DNA 解鏈等過程后，電泳時，損傷的DNA從核中溢出，朝陽極方向泳動，產生一個尾狀帶，未損傷的DNA 部分保持球形，二者共同形成“慧星”。在一定范圍內，“慧星”的長度（代表DNA遷移距離）和經熒光
輻照食品單細胞凝膠電泳法－國標通過
受中國標準化研究院委托，河北省質量技術監督局于2009年1月8日在石家莊組織召開了《輻照食品的鑒定——單細胞凝膠電泳法(篩選法)》國家標準審定會。審定會專家組由中國檢驗檢疫科學研究院、河北省分子細胞生物學重點實驗室、中國疾病預防控制中心、北京市食品安全監控中心、中國標準化研究院、中國藥品生物制品
單細胞凝膠電泳的－的操作方法
SCGE操作方法被認為是經典的操作方法。其主要步驟有：將混有待測細胞的瓊脂糖鋪于載玻片上，凝固后浸入冷溶解液中使細胞裂解，在電泳液中解鏈后水平電泳，洗滌后用DNA 結合熒光染料染色，在熒光顯微鏡下觀察玻片上細胞的熒光圖像，評價DNA 的損傷程度。改變相關的實驗條件，可以檢測DNA 不同類型的損傷，這
單細胞凝膠電泳技術的試驗步驟
試劑及材料：1）PBS2）0.8%正常熔點凝膠（PBS配制）3）0.6％低熔點凝膠（PBS配制）4）毛玻璃片5）蓋玻片6）堿性裂解液（2.5mol/L NaCl;100mmol/L Na2EDTA;10mmol/L Tris;1%肌氨酸鈉），臨用前加10％DNMSO，1％Triton X-1007）
單細胞凝膠電泳的的主要計算指標
典型的DNA 損傷細胞熒光圖像象慧星一樣頭尾分明。為了根據圖像評價DNA的損傷程度，人們設計了一系列的計算指標。按其性質，大致可分為以下幾類：1 形狀指標 這是一類比較粗略的指標。根據細胞熒光圖像是否象慧星一樣頭尾分明將其分為慧星一樣細胞和非慧星樣細胞，計數一定量細胞中慧星樣細胞所占的比例，即慧星
單細胞凝膠電泳標準操作規程(本室SOP)
原理：在細胞核中，DNA是環狀附著在核基質上，細胞裂解過程中，核基質被溶解、抽提，DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA，其遷移距離受
關于單細胞凝膠電泳技術的步驟介紹
1、單細胞凝膠電泳技術— 制備第一層膠：100ml 0.8%正常熔點膠，加蓋蓋玻片，4℃固化10min； 2、單細胞凝膠電泳技術—?制備第二層膠：輕輕地去除蓋玻片，在第一層膠上滴加75ul含1×10000個細胞的0.6%低熔點膠（cell與凝膠比例為1：5），加蓋蓋玻片，4℃固化10min；
單細胞凝膠電泳技術影響因素的分析
單細胞凝膠電泳（SCGE）又稱“彗星”法，是一種操作簡便、快速、敏感性高的DNA損傷與修復的檢測技術。盡管此法無需復雜的實驗條件，但在建立過程中可能受諸多因素的影響而難以得到較理想的結果，我們就其主要的影響因素作如下分析。1.瓊脂糖凝膠薄板的制備：該實驗需要制備兩層瓊脂糖凝膠薄板，應注意瓊脂糖的濃度
單細胞凝膠電泳技術的改良方法探討
單細胞凝膠電泳技術，又名彗星試驗，是近年來發展起來的在單細胞水平上檢測DNA損傷的新方法。Singh氏法為經典的彗星試驗方法，為國內外常用 ，但步驟較多，且受多因素的影響。本人經過多次試驗，發現如在常規彗星試驗基礎上稍做修改，將可使實驗步驟簡單，省時，且不會影響試驗結果。下面為常規彗星試驗和改良
關于單細胞凝膠電泳技術的實驗舉例介紹
Kizilian(1999)改進了一些單細胞凝膠電泳技術試驗條件,能明顯將細胞調亡和細胞壞死的形象與“彗星”區分。MarkS.Rundell等(2003)報道彗星試驗測行的損傷主要是由致突變劑引起的。RichardD.Bowden等(2003)研究出了一種新的分析試驗結果的彗星尾圖譜,可以更加準
單細胞凝膠電泳分析（single－cell－gel－eletrophoresis，SCGE）
單細胞凝膠電泳分析（single cell gel eletrophoresis，SCGE）是由Ostling等（1984）首創，后經Singh等（1988）進一步完善并逐漸發展起來的一種快速檢測單細胞 DNA損傷的實驗方法，適用于多種細胞，能夠靈敏地檢測DNA斷裂，在檢測誘變劑、射線等
彗星分析法(單細胞凝膠電泳分析法)
如果我們能阻止其中的任何一個步驟，癌細胞便無法形成。因此,探測致癌物質的技術與癌細胞的及時發現就顯得尤其重要！然而截至目前為止，科學家們仍無法研究出一種簡易基因測試法或綜合的方法來檢測出可能的致癌物。因此，致癌物對ＤＮＡ的作用仍是癌癥研究的一個重要課題。遺傳毒物學為一專門研究化學及各類物質對人體遺傳
彗星分析法[單細胞凝膠電泳分析法]
治愈癌癥(cancer)是一個難題，長期以來研究人員們一直在苦苦探索。我們目前知道，致癌的過程與許多因素有關，但如果我們能阻止其中的任何一個步驟，癌細胞便無法形成。因此，探測致癌物質的技術與癌細胞的及時發現就顯得尤其重要！然而截至目前為止，研究人員們仍無法研究出一種簡易基因測試法或綜合的方法來檢測出
關于檢測DNA原始損傷—單細胞凝膠電泳技術的介紹
單細胞凝膠電泳分析(singlecellgeleletrophoresis，SCGE)是Ostling等(1984)首創的，以后經Singh等(1988)進一步完善而逐漸發展起來的一種快速檢測單細胞DNA損傷的實驗方法，因其細胞電泳形狀頗似慧星，又稱慧星試驗(cometassay)。Kizili
關于單細胞凝膠電泳技術的基本原理介紹
單細胞凝膠電泳技術的原理是基于有核細胞的DNA分子量很大，在DNA超螺旋結構附著在核基質中，用瓊脂糖凝膠將細胞包埋在載玻片上，在細胞裂解液作用下，細胞膜、核膜及其他生物膜破壞，使細胞內的RNA、蛋白質及其他成分進入凝膠，繼而擴散到裂解液中，惟獨核DNA仍保持纏繞的環區附著在剩余的核骨架上，并留在
DNA單鏈斷裂檢測技術：單細胞凝膠電泳（SCGE）檢測原理..
DNA單鏈斷裂檢測技術：單細胞凝膠電泳（SCGE）檢測原理和操作步放回玻片托盤中待瓊脂糖凝固。 （3）裂解： 移開蓋玻片，將載玻片緩慢浸入新配制的冰涼的細胞裂解液中，置于4℃冷藏至少1h。細胞可在裂解液中至少保存4周，但時間太長可能會引起緩沖液沉淀。 堿性細胞裂解液配制（每1000ml）
單細胞分離用于單細胞基因擴增
單細胞分離連接不同管徑大小的毛細玻璃針，可分離捕獲各種非貼壁狀態的單細胞和微粒等，如細菌、酵母、藻類細胞、植物花粉、原生動物單細胞、懸浮細胞、血液細胞、免疫細胞、卵細胞、各種懸液中單細胞及特殊標記的單細胞等。 單細胞分離用于各種類型的細胞分離培養、純化、檢測；獲得單克隆細胞；用于單細胞基因擴增，
單細胞分離用于單細胞基因擴增介紹
單細胞分離連接不同管徑大小的毛細玻璃針，可分離捕獲各種非貼壁狀態的單細胞和微粒等，如細菌、酵母、藻類細胞、植物花粉、原生動物單細胞、懸浮細胞、血液細胞、免疫細胞、卵細胞、各種懸液中單細胞及特殊標記的單細胞等。 單細胞分離用于各種類型的細胞分離培養、純化、檢測；獲得單克隆細胞；用于單細胞基因擴增，用
Namocell單細胞分離儀應用——單細胞測序
2018年11月，Namocell與CZ-Biohub（Chan Zuckerburg Biohub）合作，在單細胞測序領域做出了新的嘗試。CZ-Biohub利用Namocell單細胞分離儀分選出目的B細胞，并且將其進行單細胞測序，為抗體新藥的發現邁出了重要一步。單細胞RNA測序（scRNA-s
單細胞分離系統?OR?傳統單細胞克隆方法對比
隨著監管機構對細胞株開發的要求愈加嚴格，研究人員被要求開展單細胞克隆并提供細胞株源于單個細胞的證據（?即單克隆性的證據?）。?有限稀釋是一個普遍接受的建立單克隆性的方法，它基于統計概率因此只有很少一部分（?10-30%?）的微孔能被接種單個細胞。流式細胞分選是另一種傳統的克隆方法，它可以高效地接種單
單細胞分離對單細胞測序領域的作用
單細胞分離可以采用特制的毛細管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來，然后移到合適的培養基進行培養，分離法對操作技術有比較高的要求，多限于高度專業化的科學研究中采用。 它不僅僅可以用于分離單細胞，還可以用于nl級別試劑的分配和磁珠的分選，對于單細胞測序領域有著很大的幫助。快速高效接種單個活細胞至
CloneSelect?單細胞分離系統?OR?傳統單細胞克隆方法
CloneSelect??Single-Cell?Printer??f.sight??（?f.sight?）被開發用于滿足這些需求，?它可以柔和地接種單個細胞至微孔，同時記錄整個細胞接種過程，提供單克隆性的圖像證據以及優異的接種后細胞生長用于細胞株開發在這個研究中，我們開展了六組實驗，用無血清培養基
Namocell單細胞分離儀應用介紹——藻類單細胞分離
Namocell單細胞分離儀最新應用：隨著人們對環境研究的不斷深入，研究人員逐漸將目光轉向藻類的單細胞層面：有些需要對藻類進行單細胞級別的分析（如藻類單細胞測序等），也有需要對單細胞藻類進行培養。這樣就面臨一個棘手的問題，那就是如何獲取藻類的單個細胞。通常實驗室里的方式，是在顯微鏡下用毛細管吸取。這
單細胞的作用
在人體組織中有著令人難以置信的細胞類型、狀態和相互作用的多樣性。為了更好地了解這些組織和存在的細胞類型，scRNA-seq?提供了在單個細胞水平上研究表達情況的可能。scRNA-seq?可以用來：探索組織中存在哪些細胞類型識別未知/稀有細胞類型或狀態闡明分化過程中或跨時間或跨狀態的基因表達變化鑒定特