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實驗概要采用浸入法將蛋白質從凝膠轉移至硝酸纖維素膜是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維素膜，然后再將這種夾層組合浸入盛有大量緩沖液的轉印槽內，使電流從轉印槽的一側通向另一側。通過電洗脫的方法可將蛋白質從凝膠中轉印至濾膜上，如同在凝膠中遷移，只不過移動方向與膠平面垂直。若操作仔細，這是一種可將許多蛋白質轉印至膜上非常有效的方法。此法比半干法稍微費時，也需用較多的緩沖液，但它更為簡便。但對浸入式轉印，尚無一組條件能將各種蛋白質完全、均勻地轉印并較好保持于膜上。根據待轉印蛋白質的分子質量，可選用2種緩沖液中的1種，并根據經驗確定不同的轉印時間。以下列舉的時間可作為參考。主要試劑硝酸纖維素濾膜吸水濾紙(Whatman 3MM或替代物)蒸餾水轉印緩沖液1(蛋白質為20 000-400 000kDa：0.1％(w／v)SDS、20％甲醇溶于50mmol／LTris堿和380mmol／L甘氨酸[無pH值])或轉印緩沖液2(蛋白質<80 000k......閱讀全文
實驗概要本實驗介紹了動物細胞基因組DNA中小衛星多態性Southern blot檢測的原理和操作步驟。掌握核酸雜交檢測技術（Southern blotting技術）、核酸探針的標記技術、小衛星DNA多態性檢測分析技術（DNA 指紋圖譜技術）和化學發光檢測技術。實驗原理Southern印跡雜交技術包括
一．概述 化學發光 (ChemiLuminescence ，簡稱為 CL) 分析法是分子發光光譜分析法中的一類，它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。化學發光與其它發光
一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上，其運用了電泳檢測的方法，使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上，由于硝酸纖維素膜的可支撐性，使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做
一．概述化學發光 (ChemiLuminescence ，簡稱為 CL) 分析法是分子發光光譜分析法中的一類，它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。化學發光與其它發光分析的本
實驗步驟 操作流程(1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張 (Whatman 3 MM)。(2) 將凝膠在轉印緩沖液中浸泡 30m in，將轉移膜、濾紙和海綿墊也在同樣的緩沖液浸濕。(3) 安裝轉印「夾心三明治」。將凝膠放置在玻璃平板上，然后將一張浸濕的濾紙放在凝膠上，如
這是一個建立在 B urnette 實驗方案基礎上的實驗流程，小于 80k D a 的蛋白質的轉移效果很好并且結果穩定, 重復性好。應用這種膜轉移方法，我們利用多克隆抗體在下面的樣本中檢測目的蛋白：哺乳動物細胞和細菌溶解產物、細胞培養上清、組織提取物以及組織液。雖然下列實驗條件是根據我們自己的實驗需
蛋白質免疫印跡實驗 實驗步驟 操作流程
要進行北方雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfe
要進行北方雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、真空轉移法 （vac
要進行Northern雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、
實驗方法原理因為聚丙烯酰胺凝膠的扎徑太小，DNA不能在其橫截面上有效地擴散，毛細管轉移法不適用DNA從聚丙烯酰胺凝膠的轉移。因此，聚丙烯酰胺凝晈必須在低離子強度的緩沖液中用電轉移法進行印跡。實驗材料DNA試劑、試劑盒TBE儀器、耗材Scotch-Brite墊Whatman濾紙實驗步驟1.
垂直電泳系統由電泳槽和三個功能模塊組成，每個模塊都自帶電極，電泳槽一體成型設計。系統采用專用底座配合帶膠條玻璃配合制膠，簡單方便，有效防止漏膠。轉印時，操作類似于“三明治”的操作方式，一小時內即可完成轉印。毛細管電泳模塊帶有密封圈，方便毛細管的插入和取出，至多可容納10個毛細管。 垂直電泳
伯樂bio-rad轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為Mini-PROTEAN 3 電泳系統的一個組件，伯樂bio-rad轉印槽能容納2 個凝膠支架轉印夾，用于在Mini-PROTEAN 3 電泳槽內電轉印兩種小凝膠（Mini-PROTEAN 3 凝膠和ReadyGel 預制膠）。伯樂b
免疫印跡技術又稱蛋白質印跡(Western blotting)是一種借助抗原鑒定特異性抗體的有效方法，該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。本實驗以檢測可提取性核抗原(ENA)抗體為例。【實驗原理】先將ENA混合抗原經SDS-PAGE電泳，使各種抗原成分根據分子量不
實驗概要免疫印跡是一個用于蛋白質分析的常規技術，在電場的作用下將電泳分離的蛋白從凝膠轉移至一種固相支持物，然后利用抗原—抗體的特異性反應，從蛋白混合物中檢測出目標蛋白，從而定量或定性地確定正常或實驗條件下細胞或組織中目標蛋白的表達情況。Western blot還可用于蛋白—蛋白、蛋白—DNA
在轉印過程中將產生大量熱量，因此對電場強度要有一定的限制。轉印中產生的焦耳熱（Joule）與電源參數P成正比，P=I*V=I2R。電泳轉印緩沖液的溫度隨著焦耳熱的增加而升高，此時其電阻卻明顯下降。電阻的降低將會使轉印過程和電場強度發生變化，從而影響電轉印緩沖液的緩沖能力。同時，系統過熱還會引起凝膠的
一、提取抗原蛋白 將提取RNA途中留存的樣品，加入150μl100%酒精充分混勻，靜置 5min(RT),2000×g,4℃離心5min,吸取上清至新管中,加入750μl異丙醇,混勻,靜置10min(RT),12000×g,4℃離心 10min,棄上清,加入1ml0.3mol
實驗步驟：（1）誘導靶蛋白表達分別挑取對照菌和重組菌1~2個菌落，接入5ml含Amp（30μg/ml）的LB培養液，37℃振蕩培養過夜。取5ml過夜培養物接入500ml含Amp（30μg/ml）的LB培養液，37℃振蕩培養2h以上，至對數中期（A550=0.5~1.0）。向誘導管中加入IPTG使其濃
在讀板機上進行基于時間分辨熒光標記的Western Blot蛋白檢測和定量摘要蛋白檢測在制藥和臨床研究領域是一項非常重要的項目，而Western Blot(WB)檢測則是眾多蛋白檢測方法中最常見的一種。目前，檢測轉印到WB膜上蛋白的技術眾多，包括熒光標記、銀染和化學發光法等。可是，每一種技術都有
實驗概要 1.目的 檢測小分子蛋白抗體2． 3． 適用范圍 單克隆抗體和多克隆抗體實驗原理將經電泳分離的抗原轉印到膜上作為固相,利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相抗原結合的受檢抗體主要試劑試劑配制4.1.1
檢測儀器:島津 PPSQ-31A 蛋白多肽自動測序儀 一、 蛋白質N端測序的主要應用: 1.樣品：蛋白質，多肽樣品的氨基酸序列測定 2.優勢：能連續測定 60 個以上的氨基酸序列 3.來源:天然提取（動物/植物/微生物）；合成多肽；重組蛋白等 二、 樣品要求:
檢測儀器:島津 PPSQ-31A 蛋白多肽自動測序儀 一、 蛋白質N端測序的主要應用: 1.樣品：蛋白質，多肽樣品的氨基酸序列測定 2.優勢：能連續測定 60 個以上的氨基酸序列 3.來源:天然提取（動物/植物/微生物）；合成多肽；重組蛋白等 二、 樣品要求:
一、提取抗原蛋白將提取RNA途中留存的樣品，加入150μl 100%酒精充分混勻，靜置5min(RT), 2000×g , 4℃離心5min, 吸取上清至新管中, 加入750μl異丙醇, 混勻, 靜置10min(RT), 12000×g, 4℃離心10min,
一、PCR實驗室平面布局設計要點分析 （一）平面功能分區要點分析 根據《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》1.1條的要求，PCR實驗室一般由試劑儲備區、標本制備區、擴增區、擴增分析區4個區域組成。 PCR實驗室區域的設置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明： 1、如果
(一)皮內試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激后，體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質，引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈，以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。 (二)免疫
(一)皮內試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激后，體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質，引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈，以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。 (二)
尼羅紅蛋白質凝膠染色劑尼羅紅 (Nile red) 是一種吩囉嗪酮類染料, 當其從水轉入到疏水環境，如 S D S 微粒或蛋白質-S D S 復合物中時，便顯示出強烈的熒光增強作用。尼 羅 紅 不 會 與 S D S 單體發生顯著作用》利用這一特點開發出了一種適合 S D S 凝膠的迅速
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀
一、PCR實驗室平面布局設計要點分析 （一）平面功能分區要點分析 根據《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》1.1條的要求，PCR實驗室一般由試劑儲備區、標本制備區、擴增區、擴增分析區4個區域組成。 PCR實驗室區域的設置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明： 1、如果
近日，MarketsandMarkets咨詢公司發布了全球western blotting市場的分析報告。據MarketsandMarkets預測，全球western blotting的市場規模將從2016年的5.75億美元增長到2021年的7.31億美元，復合年均增長率達4.9%。另一家Futur