特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定
一、基本原理本方法先借助長期混合淋巴細胞培養法獲得抗原特異性CTL，然后再進行細胞毒試驗。其原理為：外周血淋巴細胞包含針對不同抗原的特異性CTL克隆，在體外經某一特定（或同種異體細胞）抗原刺激后，能識別該抗原的T細胞克隆被選擇性激活、增殖，而其他T細胞克隆則逐漸死亡；經3~4次刺激后，存活的均為識別特異性MHC/抗原肽復合物的細胞，即抗原特異性CTL 。二、試劑及材料1. 絲裂霉素C（Sigma）：用培養液或PBS配制300μg/ml。2. 含20%的新生牛血清的RPMI 16403. EB病毒轉化的B淋巴母細胞株三、操作方法1. 特異性CTL的誘導和制備① 取作者外周血分離PBMC，無血清1640洗兩遍，用含20%的新生牛血清的RPMI 1640調成1.5×106 /ml，置于24孔板中，于5% CO2 培養箱中4小時使單核細胞貼壁以去除之，然后收集細胞，計數；② 取EB病毒轉化的B淋巴母細胞，加入絲裂......閱讀全文
特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定
一、基本原理本方法先借助長期混合淋巴細胞培養法獲得抗原特異性CTL，然后再進行細胞毒試驗。其原理為：外周血淋巴細胞包含針對不同抗原的特異性CTL克隆，在體外經某一特定（或同種異體細胞）抗原刺激后，能識別該抗原的T細胞克隆被選擇性激活、增殖，而其他T細胞克隆則逐漸死亡；經3~4次刺激后，存活的均為識別
特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定
一、基本原理本方法先借助長期混合淋巴細胞培養法獲得抗原特異性CTL，然后再進行細胞毒試驗。其原理為：外周血淋巴細胞包含針對不同抗原的特異性CTL克隆，在體外經某一特定（或同種異體細胞）抗原刺激后，能識別該抗原的T細胞克隆被選擇性激活、增殖，而其他T細胞克隆則逐漸死亡；經3~4次刺激后，存活的均為識別
特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定
實驗概要本方法先借助長期混合淋巴細胞培養法獲得抗原特異性CTL，然后再進行細胞毒試驗。其原理為：外周血淋巴細胞包含針對不同抗原的特異性CTL克隆，在體外經某一特定（或同種異體細胞）抗原刺激后，能識別該抗原的T細胞克隆被選擇性激活、增殖，而其他T細胞克隆則逐漸死亡；經3~4次刺激后，存活的均為識別特異
特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定
特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定主要應用于（1）免疫細胞功能的測定（2）臨床自身免疫性疾病的診斷（3）多克隆次級信號轉導分子。實驗方法原理本方法先借助長期混合淋巴細胞培養法獲得抗原特異性CTL，然后再進行細胞毒試驗。其原理為：外周血淋巴細胞包含針對不同抗原的特異性CTL克隆，在體外經某一特定（
特異性抗原誘導的細胞毒性T細胞功能測定
實驗試劑絲裂霉素C（Sigma）：用培養液或PBS配制300μg/ml含20%的新生牛血清的RPMI 1640實驗材料EB病毒轉化的B淋巴母細胞株實驗步驟1.?? 特異性CTL的誘導和制備1)?? 取作者外周血分離PBMC，無血清1640洗兩遍，用含20%的新生牛血清的RPMI 1640調成1.5×
細胞毒性T淋巴細胞的誘導及檢測
基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培養基H
T細胞分化抗原測定
【中文名稱】T細胞分化抗原測定【概述】T細胞膜表面有100多種特異性抗原，現已制備了多種單克隆抗體，WHO（1986）統稱為白細胞分化抗原（cluster differentiation，CD）。例如CD3代表總T細胞，CD4代表T輔助細胞（TH），CD8代表T細胞毒性細胞（TC）等。應用這些細胞的
嵌合抗原受體T細胞治療及其相關毒性
隨著CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，嵌合抗原受體T細胞免疫療法）的出現，腫瘤免疫治療進入了一個新的時代。CAR-T細胞治療作為一種新興的腫瘤免疫治療手段，近年來取得了極大的進展，尤其是在復發/難治性惡性B細胞腫瘤的治療方面
T細胞分化抗原測定介紹
【中文名稱】T細胞分化抗原測定【概述】T細胞膜表面有100多種特異性抗原，現已制備了多種單克隆抗體，WHO（1986）統稱為白細胞分化抗原（cluster differentiation，CD）。例如CD3代表總T細胞，CD4代表T輔助細胞（TH），CD8代表T細胞毒性細胞（TC）等。應用這些細胞的
細胞毒性T細胞的細胞試驗
該試驗測定被特定抗原攻擊后抗原特異性CD8+T淋巴細胞的裂解或者引起的炎癥反應。用細胞毒性T淋巴細胞（CTL）測試細胞介導免疫需要成功的抗原呈遞，以及隨之產生的細胞因子、細胞接觸依賴的信號轉導來產生記憶T淋巴細胞，這是T細胞應答的基礎。CTL試驗曾用于小鼠和大鼠，也用于大型動物模型，但標準的臨床
細胞毒性T細胞簡介
細胞毒性T淋巴細胞（CTL），是白細胞的亞部，為一種特異T細胞，專門分泌各種細胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細胞等抗原物質具有殺傷作用，與自然殺傷細胞構成機體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。 細胞毒性T淋巴細胞又稱殺傷性T淋巴細胞，是機體抗腫瘤機制的重要環節，也是腫瘤免疫過繼療法主要效應細
MHC－Tetramer－技術：檢測抗原特異性－T－細胞的金標準
MHC 四聚體（MHC Tetramer）是一類免疫學試劑，由四個主要組織相容性復合體（Major Histocompatibility Complex，MHC）與抗原肽結合的單體分子組成，并標記有熒光，用于 T 細胞免疫分析的 MHC 四聚體檢測（MHC Tetramer Assay，
細胞毒性T細胞的分類特征
CTL是以克隆為單位的不均質的細胞群，根據其細胞表面標志（表面抗原和表面受體）可分為3類： 1、細胞毒或殺傷性T細胞（Tc）：其表面抗原為CD3+，CD4+，CD8+，TCR有a和β兩條多肽鏈組成。 2、細胞毒性T輔助細胞（CTh）：其細胞表面標志為CD3+，CD4+，CD8+，TCRaβ，
細胞毒性T細胞的作用機制
當細胞毒性T細胞遇到受感染或是不健康的體細胞，細胞毒性T細胞會釋放出細胞毒素，如穿孔素、顆粒酶，以及顆粒溶解素。這些酵素會進入目標細胞的細胞質，并使細胞內的絲氨酸蛋白酶誘發胱天蛋白酶的級聯反應，這個反應會使一連串的胱胺酸蛋白酶活化，引發細胞凋亡。另外一種誘發細胞凋亡的途徑是借由細胞表面受體的結合。細
超級抗原誘導調節性T細胞研究新進展
超級抗原分子可高效激活T細胞，對腫瘤產生免疫殺傷和免疫監視，是一種理想的免疫抗腫瘤候選藥物。但是，T細胞的過渡激活可能誘導具有免疫抑制功能的調節性T細胞（Tregs）的產生，這是免疫抗腫瘤藥物開發所需揭示和解決的重要問題。 中國科學院沈陽應用生態研究所微生物資源與生態課題組，依托“沈陽市超級抗
T細胞抗原受體
1、在外周淋巴器官中大多數成熟T細胞（95%）的TCR分子，由α鏈和β鏈經二硫鍵連接的異二聚體分子，也稱TCR-2.T細胞特異性免疫應答主要是這一類T細胞完成。 2、少數成熟T細胞的TCR分子是由γ鏈和δ鏈組成的異二聚體分子，結構與TCRαβ相似，也稱TCR-1.它可直接識別抗原（多肽、類脂分
細胞毒性T細胞殺傷靶細胞的過程
CTL殺傷靶細胞是一個連續過程，可分為三個階段，主要研究內容如下： 1、效應靶細胞結合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結合，此時膜上的淋巴細胞功能相關抗原Ⅰ與靶細胞膜上的配基Ⅰ，又稱細胞內粘附分子相互作用，即靶細胞與效應細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可
T細胞的抗原受體
成熟T細胞表面具有特異性識別抗原并與之結合的分子結構，稱為T細胞抗原受體醫學教育|網。TCR是一種雙肽鏈分子，按肽鏈編碼基因不同可分為兩類： 1、在外周淋巴器官中大多數成熟T細胞（95%）的TCR分子，由α鏈和β鏈經二硫鍵連接的異二聚體分子，也稱TCR-2.T細胞特異性免疫應答主要是這一類T細
關于γδT細胞的細胞毒性的介紹
細胞毒性是γδT細胞的主要生物學效應，也是其發揮抗腫瘤作用的主要方式。TCRγδ能夠識別在腫瘤細胞內積聚的異戊烯焦磷酸(IPP)和二甲基烯丙基焦磷酸，進而激活γδT細胞。激活的γδT細胞能夠通過多種途徑殺傷腫瘤細胞：? 1、通過凋亡誘導蛋白配體途徑Fas-FasL和相關凋亡誘導配體受體誘導腫瘤
間歇循環刺激法制備抗原特異性T細胞克隆
間歇循環刺激法 是制備抗原特異性T細胞克隆的傳統方法，即經抗原間隔刺激多個循環。[材料和試劑]（1）抗原致敏供者的單個核細胞(MNC)和經過3300rad照射的自身MNC（2）抗原（3）含10％人AB型血清的完全RPMI 1640培養液（4）細胞分離及T細胞培養增殖所需的其他試劑和器材。[操作步驟
四聚體——抗原特異性T細胞檢測金標準
實驗概要 抗原特異性T細胞在細胞免疫應答中發揮著核心作用，因此定量測定抗原特異性T細胞數量在判定機體細胞免疫功能方面提供重要的信息。傳統的抗原特異性T細胞功能檢測方法有經典的Cr51釋放試驗、有限稀釋法（LDA）、酶聯免疫斑點試驗（ELISPOT）等，但是這些方法或多或少都存在操作繁瑣、檢測結果誤差
四聚體——抗原特異性T細胞檢測金標準
實驗概要 ?? ? ?抗原特異性T細胞在細胞免疫應答中發揮著核心作用，因此定量測定抗原特異性T細胞數量在判定機體細胞免疫功能方面提供重要的信息。傳統的抗原特異性T細胞功能檢測方法有經典的Cr51釋放試驗、有限稀釋法（LDA）、酶聯免疫斑點試驗（ELISPOT）等，但是這些方法或多或少都存在操作繁瑣、
抗原特異性T細胞克隆的制備——間歇循環刺激法
實驗概要本實驗利用間歇循環刺激法制備了抗原特異性T細胞克隆。實驗原理間歇循環刺激法是制備抗原特異性T細胞克隆的傳統方法，原理是經抗原間隔刺激多個循環。主要試劑1. 含10％人AB型血清的完全RPMI 1640培養液。主要設備1.?24孔培養板；2.?CO2?溫箱；3.?高速離心機；4.?96孔板；5
細胞毒性T細胞的發育過程介紹
T細胞會在胸腺成熟，成為成熟胸腺細胞。免疫系統必須有能力辨識數百萬種抗原，但身體內卻只有30,000對基因，所以不可能一個抗原就花費一組基因來辨識。因此，身體內采用的勢必是另一套機制。骨髓中的未成熟白血球DNA會改變，制造出特定的白血球受體，而每一種白血球則可以與不同的抗原結合。但這種方式制造出來的
細胞毒性T細胞的活化方式介紹
除了一些少數細胞和沒有細胞核的細胞（如紅血球），宿主的細胞表面幾乎都會表現第一類MHC分子。當細胞被病毒感染時（或其他胞內病原體），細胞會降解外來蛋白質，并由第一類MHC分子將蛋白質片段表現于細胞表面，以利于CD8+?T細胞辨識，此動作稱為抗原呈現。細胞毒性T細胞的活化取決于T細胞表面的分子和抗原呈
細胞毒性t細胞活化后的變化
細胞毒性t細胞活化后的變化如下。1、T細胞分化成各種效應T細胞亞群，這些效應T細胞亞群要么控制細胞內病原體，要么激活B細胞以靶向細胞外病原體。2、CD8T細胞成為裂解病毒感染或腫瘤細胞的細胞毒性T細胞。3、CD4T細胞分化成輔助T細胞的各種亞群，激活其他免疫細胞（即Th1細胞激活巨噬細胞，Th2細胞
B細胞對T細胞依賴抗原的應答
一般情況下當大量抗原進入未經免疫的機體后，誘發初次免疫應答時其抗原呈遞細胞多由巨噬細胞完成。經Mφ活化TH細胞后再由活化的TH細胞輔助B細胞產生抗體和形成記憶B細胞。但當再次免疫應答發生時，抗原呈遞細胞則主要由已擴增的B細胞克隆承擔。由于其膜Ig受體親和力增高故對少量抗原也能攝取，故可取代巨噬細
細胞毒性T淋巴細胞的細胞試驗過程
該試驗測定被特定抗原攻擊后抗原特異性CD8+T淋巴細胞的裂解或者引起的炎癥反應。用細胞毒性T淋巴細胞（CTL）測試細胞介導免疫需要成功的抗原呈遞，以及隨之產生的細胞因子、細胞接觸依賴的信號轉導來產生記憶T淋巴細胞，這是T細胞應答的基礎。CTL試驗曾用于小鼠和大鼠，也用于大型動物模型，但標準的臨床前評
抗原特異性CD8+T細胞的高通量、高維度單細胞分析方法
抗原特異性對T細胞功能至關重要，但由于技術局限，其在T細胞高通量多組學分析中常常被忽略。美國德克薩斯大學奧斯汀分校的研究團隊揭示了一種用于抗原特異性CD8+T細胞的高通量、高維度單細胞分析方法。該研究成果于近日發表在《Nature Immunology》上，題為：High-throughput
科學家提出抗原特異性CD8+T細胞的單細胞分析方法
抗原特異性對T細胞功能至關重要，但由于技術局限，其在T細胞高通量多組學分析中常常被忽略。美國德克薩斯大學奧斯汀分校的研究團隊揭示了一種用于抗原特異性CD8+T細胞的高通量、高維度單細胞分析方法。該研究成果于近日發表在《Nature Immunology》上，題為：High-throughput