流式細胞術定量檢測細胞凋亡的3種方法研究比較
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dUTP nick end labeling)技術成為凋亡定量檢測的主流。1995年Vermes 首次使用熒光素標記的膜聯蛋白V(FITC- Annexin V)聯合PI染色雙參數技術定量檢測凋亡，目前國內尚未見報道［2］。我們同時使用上述3種方法對地塞米松處理的小鼠胸腺細胞進行凋亡檢測對比研究，借以探討這一新的方法的應用價值，現報道如下。 1 材料與方法 1.1 材料 4周齡雄性昆明小鼠12只。PI(Sigma)。TUNEL試劑盒(德國Boehringer Mannheim)。Annexin V/PI試劑盒(法國國際免疫公司)。流式......閱讀全文
流式細胞術定量檢測細胞凋亡的3種方法研究比較
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
流式細胞術定量檢測細胞凋亡3種方法的比較研究
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法［1］。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
流式細胞儀檢測細胞凋亡的幾種方法的比較
目的:探索運用流式細胞儀來檢測細胞凋亡的方法.方法:采用流式細胞儀對DNA含量、磷脂酰絲氨酸、線粒體膜電位、鈣離子濃度的檢測,分析細胞凋亡情況.結果:DNA含量測定存在一定誤差;磷脂酰絲氨酸測定能準確反映細胞早晚期凋亡情況;線粒體膜電位、鈣離子濃度測定能準確反映凋亡細胞的生理指標,如果結合形態學分析
流式細胞術檢測細胞凋亡
實驗概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis.?實驗原理Apoptosis ?is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal ?part o
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟 根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2． 懸浮細胞在低溫環境中，用PBS洗滌細胞2次（800～
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟 根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2．
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟 根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2．
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2． 懸浮細胞在低溫環境中，用PBS洗滌細胞2次（800～1
檢測細胞凋亡的實驗方法比較3
◆ 細胞壞死與細胞凋亡細胞凋亡與壞死是兩種完全不同的細胞凋亡形式，根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別，可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多，下面介紹幾種常用的測定方法。?一、細胞凋亡的形態學檢測? 根據凋亡細胞固有的形態特征，人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。
流式細胞儀檢測實驗_用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞
實驗材料要分析的細胞試劑、試劑盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反應液TdT 生物素-dUTP混合液異硫氰酸熒光素（FITC)-鏈霉親和素（streptavidin)結合物儀器、耗材12 mm×75 mm圓底離心管配有269模型轉子的IEC 6R6000離心機（或相當的
流式細胞儀檢測實驗用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞
實驗材料要分析的細胞試劑、試劑盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反應液TdT 生物素-dUTP混合液異硫氰酸熒光素（FITC)-鏈霉親和素（streptavidin)結合物儀器、耗材12 mm×75 mm圓底離心管配有269模型轉子的IEC 6R6000離心機（或相當的
流式細胞儀細胞凋亡檢測
一 PI單染色法??基本原理? 其原理主要是根據細胞?凋亡時在細胞、亞細胞和分子?水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1.?細胞核的改變：由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料
流式細胞儀檢測細胞凋亡
細胞凋亡的檢測方法眾多，流式細胞儀檢測凋亡，是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此，具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下，首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體，線粒體的功能發生衰退；后是cas
流式細胞儀定量分析細胞凋亡
流式細胞儀定量分析，細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡，應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點：1）
流式細胞儀定量分析細胞凋亡
流式細胞儀檢測具有以下特點：1）、檢測的細胞數量大，因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2）、可以做許多相關性分析3）、結合被檢測細胞的DNA含量的分析，可確定凋亡的細胞所處的細胞周期■檢測形態學及細胞膜完整性的Hoechs-PI雙染色法細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性液增加，但其程度介于正常細胞和
流式細胞儀定量分析細胞凋亡
流式細胞儀定量分析，細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時，其細胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點，被檢測細胞懸液用熒光素染色，利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡，應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點：1）
流式細胞術檢測細胞的原理
流式細胞術檢測細胞的原理主要包括以下幾個方面：細胞懸液制備：將待檢測的細胞制成單細胞懸液。熒光標記：使用特異性的熒光染料或熒光標記的抗體與細胞內或細胞表面的特定成分結合。流體動力學聚焦：細胞懸液被壓力驅動進入流動室，在鞘液的包裹下，細胞逐一排列成單列，以極快的速度逐個通過檢測區。激光照射：當細胞通過
流式細胞術的檢測原理
流式細胞術的檢測原理主要基于以下幾個方面：液流系統：細胞樣本被制成單細胞懸液，通過一定壓力被注入流動室，在鞘液的包裹下，細胞排成單列，逐個快速通過激光檢測區。光學系統：通常使用氬離子激光器或其他類型的激光器作為光源。激光照射到細胞后，會產生散射光和熒光。前向散射光（FSC）：與細胞的大小有關，反映細
細胞凋亡（apoptosis）的檢測3
【結果判斷】細胞出現程序化細胞死亡時，在瓊脂糖凝膠電泳帶上呈現有一定間隔的梯狀條帶，而細胞壞死時則呈模糊的片狀條帶（無間隔），陰性對照者僅在近電泳點樣處出現基因組條帶。（3）流式細胞儀觀察－PI染色法【原理及意義】細胞凋亡時，流式細胞檢測可呈現亞二倍體核型峰的特征。此外，根據細胞光散射特點，應用碘化
細胞凋亡檢測：流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術?一、固定細胞的染色方法?1?）?PI?單染色法?方法一1．?收集細胞（?1?～?5?）×?106?個，?500?～?1000r/min?離心?5min?，棄去培養液。2．?3ml PBS?洗一次。3．?離心去?PBS?，加入冰預冷的?70?％的乙醇固定，?4?℃，?1h
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1）PI單染色法?方法一?1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。?2．3ml PBS洗一次。?3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。?4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。?5．400目的篩網過濾
細胞凋亡檢測：流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術一、固定細胞的染色方法1）PI單染色法方法一1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。2．3ml PBS洗一次。3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。5．40
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1）PI單染色法?方法一?1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。?2．3ml PBS洗一次。?3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。?4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。?5．400目的篩網過濾
流式細胞術的3大要素
一、流式細胞術的3大要素 1. 流式細胞儀：現在市面上有多種型號的流式細胞儀，但其基本結構都是相同的，分析性流式細胞儀有液流系統、光路系統、監測分析系統。 （1）液流系統 （2）光路系統 光路系統始于激光器，其分類分法很多，最常用的分類方法是根據其發射的激光的波長來分，如常見的有488n
檢測細胞凋亡的實驗方法比較
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法? 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端
檢測細胞凋亡的實驗方法比較
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較 TUNEL法 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'
用流式細胞儀檢測細胞凋亡
? 細胞凋亡的檢測方法眾多，流式細胞儀檢測凋亡，是常用的方法。由于流式細胞儀固有的特點――可以準確的進行凋亡細胞的計數。因此，具有其它方法無可比擬的優越性。下面我們就簡單明了地介紹流式在檢測凋亡方面的應用。在凋亡誘導劑的作用下，首先是細胞色素C和apa f-1形成復合體，線粒體的功能發生衰退;后是c
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
實驗方法原理 實驗材料 要分析的細胞在FACS緩沖液中試劑、試劑盒 FACS緩沖液冰冷的100%乙醇（如果細胞是抗體標記的則用70%乙醇）1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙錠（PI)的PBS儀器、耗材 流式細胞儀實驗步驟 1)凋亡刺激后，從培養液中沉淀所要分析的細胞，同樣沉淀一
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變zui具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性