一、固定細胞的染色方法 1)PI單染色法 方法一 1.收集細胞(1~5)×106個,500~1000r/min離心5min,棄去培養液。 2.3ml PBS洗一次。 3.離心去PBS,加入冰預冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.離心棄去固定液,3ml PBS重懸5min。 5.400目的篩網過濾1次,500~1000r/min離心5min,棄去PBS。 6.用1ml PI染液,4℃避光30min。 7.流式細胞儀檢測:PI用氬離子激發熒光,激發光波波長為488nm,發射光波波長大于630nm,產生紅色熒光,可分析前散射光對側散射光的散點圖及PI熒光的直方圖。 方法二 1.收集細胞(1×106個),500~1000r/min離心5min,棄去培養液。 2.1ml PBS/FCS洗一次。 3.500~......閱讀全文
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:細胞凋亡后呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后(細胞凋亡,細胞凋亡通路,細胞凋亡檢測)核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜 不
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法[1]。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
細胞凋亡的定性檢測依賴于形態學觀察及DNA電泳,其定量檢測則需借助于流式細胞檢查。使用碘化丙啶(PI)染色檢測DNA含量是最早出現的凋亡定量檢測方法[1]。進入90年代,檢測DNA斷裂點的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
一、形態學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核 呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染色:如果
流式細胞儀定量分析,細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡,應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點:1)
流式細胞儀定量分析,細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡,應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點:1)
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜 的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的
一、檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點1、檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相關
一、檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點:1、檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測
前言:細胞凋亡是細胞程序性死亡中最具特征性的一種。它在生物發展,體內平衡,甚至在不同的疾病,例如:癌癥,的發病機制都扮演著重要的角色。在過去的幾十年里,科學家們對細胞凋亡進行了廣泛的研究。細胞凋亡的過程中,細胞會有不同的形態變化。同時,細胞膜(plasma membrane),線粒體(mitocho
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法) 細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3羥基在末斷轉移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下,
凋亡細胞的原位末斷轉移酶標記法(TUNEL法)細胞凋亡的多步驟機制作用的最終環節是;細胞內源性核酸內切酶的激活而導致核染色質DNA雙鏈的斷裂。大量DNA片段暴露出的3 羥基在末斷轉移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用
1 流式細胞儀的概念及其發展歷史1.1 流式細胞儀的基本概念 流式細胞儀(flow cytonletry,FCM)是對高速直線流動的細胞或生物微粒進行快速定量測定和分析的儀器,主要包括樣品的液流技術、細胞的計數和分選技術,計算機對數據的采集和分析技術等。流式細胞儀以流式細胞術為理論基礎,是流體力學、
摘要:隨著科技水平的不斷深入,科研設備的不斷更新,國家對科研投入的不斷增多,植物檢測技術也得到了進一步的發展。流式細胞儀植物檢測技術是近幾年在我國剛剛興起的一項新技術,對許多植物科技工作者來說還比較陌生。本文用比較通俗的語言介紹了進行流式細胞儀分析所必須的基本概念、發展歷史、工作原理、知名品牌、常見
摘要:隨著科技水平的不斷深入,科研設備的不斷更新,國家對科研投入的不斷增多,植物檢測技術也得到了進一步的發展。流式細胞儀植物檢測技術是近幾年在我國剛剛興起的一項新技術,對許多植物科技工作者來說還比較陌生。本文用比較通俗的語言介紹了進行流式細胞儀分析所必須的基本概念、發展歷史、工作原理、知名品牌、常見
(一)細胞膜蛋白分子的檢測原理:細胞膜表面的抗原或受體可特異地與相應的抗體或配體結合,將針對細胞表面抗原的抗體或配體用不同的熒光素標記,根據不同熒光物質的最大激發和發射波長的不同,即可準確定量每種熒光物質的強度,從而推出相應細胞表面抗原表達量1 直接法:細胞+熒光素標記的抗CD分子的抗體→4oC反應
為了進一步提高檢測基因的效率,我們對螢光素酶基因序列的密碼子進行了優化,使得它在多種哺乳細胞中的表達水平提高了5~10倍;同時,為了減少對基因的非特異性調控,我們也對螢光素酶的載體進行了優化,去除了載體上哺乳動物轉錄因子結合序列的保守序列,從而大大降低了實驗的本底,顯著提高了實驗的相對信號強度。優化
熒光分析技術是一種強大的分析手段,廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,是多功能酶標儀的重要應用,如TECAN(M1000、M200等),Thmeral(Varioskan Flash),Bio-tek(Synergy 4等),MD(M2、M5)都可以應用于熒光檢測。
自20世紀80年代以來,單克隆抗體作為治療性藥物得到快速的發展。與小分子藥物相比,單克隆抗體的優勢在于具有較高的靶向特異性、毒副作用小和半衰期長的優勢。而不足之處包含復雜的生產、純化過程,以及翻譯后修飾(PTM)導致單克隆抗體結構和功能的異質性。 在這些翻譯后修飾的情況中,Fc區域的糖基化是導
自20世紀80年代以來,單克隆抗體作為治療性藥物得到快速的發展。與小分子藥物相比,單克隆抗體的優勢在于具有較高的靶向特異性、毒副作用小和半衰期長的優勢。而不足之處包含復雜的生產、純化過程,以及翻譯后修飾(PTM)導致單克隆抗體結構和功能的異質性。 在這些翻譯后修飾的情況中,Fc區域的糖基化是導
Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平臺多功能的MAGPIX 只需一臺即可達到多臺儀器共同作用才能完成的效果,具有更大的靈活性和更多的選擇性。無論是單一指標還是多重指標,檢測核酸還是蛋白,MAGPIX均可為您簡化實驗,提供高超的分析性能。 蛋白研究
1.概述室溫下,大多數分子處于基態的zui低振動能級,處于基態的分子吸收能量(光能、化學能、電能或熱能)后躍遷至激發態,激發態不穩定,將很快衰變到基態,以光的形式放出能量,這種現象稱為“發光現象”。分子發光包括熒光,磷光,化學發光,生物發光等。受到光照時發光,光照切斷時發光立即消失的叫熒光,光照切斷
流式細胞儀構成與工作原理 張 藝 (南京師范大學生命科學院 ,江蘇 南京 210046) [摘 要]流式細胞儀是分選細胞結構與功能 ,準確迅速選標記細胞的儀器。本文講述流式細胞儀的主要組件,工作原理及其實 際應用。 [關鍵詞]流式細胞儀 ;流式細胞術 [中圖分類號] T H776 [文獻
具有全新成像模塊和目標識別軟件的多功能微孔板檢測系統摘要當需獲得高質量、多種參數的數據時,我們需要一種能夠進行復雜的基于細胞學檢測的儀器來提高數據獲取速度。這里我們通過一系列基于細胞學檢測的結果,來介紹一款將細胞成像系統和多功能微孔板檢測系統整合于一體的儀器,它即能夠提高檢測的通量,也能夠增加檢測數
熒光分析技術是一種強大的分析手段,廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,是多功能酶標儀的重要應用。 1.概述 室溫下,大多數分子處于基態的zui低振動能級,處于基態的分子吸收能量(光能、化學能、電能或熱能)后躍遷至激發態,激發態不穩定,將很快衰變到基態,以光的形式放出能量