蛋白印跡(Western Blot)常用試劑>>>蛋白抽提貨號品名規格價格備注WB003組織蛋白抽提試劑100ml300全蛋白抽提WB004RIPA裂解液100ml100全蛋白抽提WB005細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑100次680WB006膜蛋白和胞質蛋白抽提試劑100次680WB007改良Western及IP細胞裂解液100ml320WB008蛋白酶抑制劑混合物(20X)1ml200WB010蛋白酶+磷酸酶抑制劑混合物(20X)1ml380WB011流式用破膜劑50T1300Invitrogen原裝WB012淋巴細胞分離液(小鼠、大鼠、豬、兔等)250ml400WB013紅細胞裂解液(10X)10ml280WB015總RNA抽提試劑100ml480國產WB016人淋巴細胞分離液(Lymphocyte Separation Medium)250ml100國產>>>蛋白含量測定貨號品名規格價......閱讀全文
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。 蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾
Westerns blot是分析蛋白表達的有力技術。通過這種測定方法,可以評估單個蛋白的分子量,翻譯后修飾蛋白和蛋白表達豐度。 蛋白印跡相對簡單,不需要昂貴的設備或試劑,使其成為許多實驗室蛋白檢測方法。 成功的western blot的關鍵是使用與單一蛋白特異性反應并且與其他蛋白幾乎沒有交叉反
上期小編為大家介紹了以單一看家蛋白作為定量Western Blot內參蛋白的分析方法,這次咱不得不說說以全蛋白為內參的分析方法。 期刊JBC(The Journal of Biological Chemistry)在Western Blot數據要求中指出,對于半定量蛋白表達的實驗,最佳
免疫印跡western實驗中內參基因的選擇和注意事項 Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。 雖然,順利的時候Western blot做
Western blot是檢測蛋白質的一項經典技術,幾十年來一直受到人們的歡迎。不過,令人尷尬的是,這也是一個相當耗時并且難以重現的過程,有時帶來驚喜,有時則是驚嚇。 典型的Western blot流程大家都清楚,首先是蛋白電泳,分離后將蛋白質轉移到膜上,然后進行一系列的處理,包括封閉、一抗孵
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們,實
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們,實
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們,實驗做
Western Blot全自動分析儀與傳統WB方法的比較,傳統Western blot方法是利用抗原抗體的免疫反應,先將蛋白通過SDS-PAGE電泳分離開來,然后再利用電場力的作用將膠上的蛋白轉移到固相載體(硝酸纖維素膜即NC膜)上,然后再加抗體形成抗原抗體復合物,利用發光或顯色原理將結果顯示到
Western Blot全自動分析儀與傳統WB方法的比較,傳統Western blot方法是利用抗原抗體的免疫反應,先將蛋白通過SDS-PAGE電泳分離開來,然后再利用電場力的作用將膠上的蛋白轉移到固相載體(硝酸纖維素膜即NC膜)上,然后再加抗體形成抗原抗體復合物,利用發光或顯色原理將結果顯示到膜或
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
Western blot封閉步驟為什么重要? 樣品從凝膠轉印到膜上后,在抗體孵育之前都要進行封閉的步驟。 了解封閉的工作原理可提高western blot的質量,提高數據的特異性,靈敏度和信噪比。 蛋白封閉液是如何工作的? 通用的PVDF膜和NC膜具有很強的蛋白結合能力
背景: 蛋白質印跡的發明者是斯坦福大學George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被稱為Western Blot。最開始做印跡的是一個叫Southern的科學家,但印跡的對象是DNA鏈,他把這種技術稱為Southe
Western blot封閉步驟為什么重要?樣品從凝膠轉印到膜上后,在抗體孵育之前都要進行封閉的步驟。 了解封閉的工作原理可提高western blot的質量,提高數據的特異性,靈敏度和信噪比。蛋白封閉液是如何工作的?通用的PVDF膜和NC膜具有很強的蛋白結合能力,如果跳過封閉步驟,一抗或二抗可能非
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
蛋白質免疫印跡雜交實驗(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單,但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差,導致剛進實驗室的小伙伴們
蛋白提取蛋白樣品提取是蛋白定量和分析的基礎。天然蛋白質分子結構、化學性能各異,選擇適當的細胞裂解液制備蛋白樣品至關重要。選擇細胞裂解液時,除了要考慮蛋白產量,還要考慮所選擇的一抗的是否能識別線性的抗原表位。一些含有十二烷基硫酸鈉(SDS)和強離子去污劑(如脫氧膽酸鈉等)的蛋白質裂解液能夠從組織或細胞
蛋白樣品提取是蛋白定量和分析的基礎。天然蛋白質分子結構、化學性能各異,選擇適當的細胞裂解液制備蛋白樣品至關重要。選擇細胞裂解液時,除了要考慮蛋白產量,還要考慮所選擇的一抗的是否能識別線性的抗原表位。一些含有十二烷基硫酸鈉(SDS)和強離子去污劑(如脫氧膽酸鈉等)的蛋白質裂解液能夠從組織或細胞中提
3.抗體T.做細胞信號傳導,要做磷酸化某因子Western Blot,其二抗有何要求?解答:對二抗無要求,要看你實驗條件來選擇,一般推薦用HRP標記的二抗。U.同一公司的另外抗體用這個稀釋度做出來效果很好,所以沒做預試,怕費時間,用什么樣的稀釋度比較好呢?我用的ELL+plus試劑盒顯色。轉膜過夜,
4. 濾紙、膠和膜的問題X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龍膜怎樣鑒別?解答:尼龍膜是較理想的核酸固相支持物,有多種類型;硝酸纖維素膜是目前應用最廣的一種固相支持物,價格最便宜;PVDF膜介于二者之間。就結合能力而言:尼龍膜結合DNA和RNA能力可達480-600μg/cm2,可結合短至10bp的核酸
蛋白提取蛋白樣品提取是蛋白定量和分析的基礎。天然蛋白質分子結構、化學性能各異,選擇適當的細胞裂解液制備蛋白樣品至關重要。選擇細胞裂解液時,除了要考慮蛋白產量,還要考慮所選擇的一抗的是否能識別線性的抗原表位。一些含有十二烷基硫酸鈉(SDS)和強離子去污劑(如脫氧膽酸鈉等)的蛋白質裂解液能夠從組織或細胞
實驗概要本實驗將釀酒酵母作為胞內晶體蛋白的攜帶和表達宿主,同時,作為可能的營養體喂養海洋線蟲P. redivivus將所表達的目的蛋白導入線蟲機體,觀察線蟲的生長、發育、繁殖或是死亡情況,探討胞內晶體蛋白對昆蟲病原線蟲以外的線蟲是否具有營養作用。為此,首先構建一種重組大腸桿菌,其所攜帶的重組質粒能夠
Western Blot(免疫印跡法)主要包括以下4個基本步驟:n 樣品制備n 電泳分離n 蛋白的膜轉移n &
五、核酸分子雜交的類型 隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板
五、核酸分子雜交的類型 隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板
四、轉膜以下以使用半干轉膜為例。對于轉印90kd以下的蛋白,轉膜液都不用加SDS,如果是蛋白分子量大的話可以加入0.037%的SDS。在電泳結束前20min開始準備轉膜所需的東西。轉一張膜需準備6張的濾紙(長一般為8.1~8.3cm,寬度根據裁的膠大小實際測量,但膠一般會縮水,所以裁8cm就行)和1
實驗概要本實驗介紹了蛋白質印跡與探測(Western Blot)實驗原理、方法與步驟。實驗原理Western Blot(蛋白質印跡或免疫印跡)技術,以蛋白質為檢測對象,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。實驗采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)將樣品蛋白質分離,再轉移到固相載體(PVDF
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術:一、原理二、 分類i.放射自顯影ii.底物化