PCR技術應用一:診斷單基因疾病
自1987年秋以來,PCR技術的應用開創性地推動了產前單基因缺陷者及攜帶者的 診斷。目前PCR還不能用于診斷所有已知缺陷疾病,但極大地擴大了實驗診斷學家對 診斷方法的選擇。JohnHopkins大學的研究人員表明,在診斷基因缺陷疾病方面PCR技 術具有快速、準確、操作靈活等特點。每項進展的實例在以后描述。在1987年10月 前,我們用Southern印跡法產前診斷鐮刀紅細胞貧血癥通常需要兩周或更長時間,而 1987年10月以后,應用PCR只需2-4天。在1987年以前,幾乎所有的β-地中海貧血癥 的產前診斷都是通過檢測在β-珠蛋白簇中連鎖DNA的多態間接完成的,一般需要2-4 周。1987年10月以后,用PCR擴增β-珠蛋白基因區后,直接檢測致病突變即可完成 β-地中海貧血癥的產前診斷。這個方法既增加了準確性,又縮短了時間,一般只需 一周時間。該項改進技術的作用,(1)如果我們不能確定在父母雙方中β-地中海 貧血......閱讀全文
PCR技術應用一:診斷單基因疾病
? 自1987年秋以來,PCR技術的應用開創性地推動了產前單基因缺陷者及攜帶者的 診斷。目前PCR還不能用于診斷所有已知缺陷疾病,但極大地擴大了實驗診斷學家對 診斷方法的選擇。JohnHopkins大學的研究人員表明,在診斷基因缺陷疾病方面PCR技 術具有快速、準確、操作靈活等特點。每項進展的實例
PCR技術應用八:DMS/BMD基因診斷
DMD(Duchenne Muscular Dystrophy)和BMD(Becker Muscular Dystrophy)是一種常見的X連鎖隱性遺傳病,主要發生于男性,其發病率為1/3500活產男嬰,其發生的原因是Dystrophin(抗肌萎縮蛋)其固缺陷所致.一、DMD/BMD的臨床表現
PCR技術應用六:血友病A基因診斷
血友病A是常見的遺傳性凝血障礙,它是由凝血因子Ⅷ的基因缺陷而致其功能異 常的致其發病率改為1/1000男性,女性患者極為少見.在臨床上,血友病大都有家族 史,亦有約20~30%的患者為散發病例,為新生基因突變所致.一、血友病的遺傳學 本病為X連鎖隱性遺傳病,其基因定痊于Xq28.因子Ⅷ(FVⅢ
分子診斷技術、PCR技術、基因測序技術的區別、原理(一)
分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗簡單
一文讀懂分子診斷技術、PCR技術、基因測序技術
四、定量PCR(quantitative PCR,qPCR) 相比于其他分子診斷檢測技術,qPCR具有2項優勢,即核酸擴增和檢測在同一個封閉體系中通過熒光信號進行,杜絕了PCR后開蓋處理所帶來擴增產物的污染;同時通過動態監測熒光信號,可對低拷貝模板進行定量。正是由于上述技術優勢,qPCR已經成
PCR技術在性傳播性疾病診斷中的應用
性傳播疾病(STD)對人類的健康危害很大,近年輕內性傳播性疾病的發病率成倍增加,因此對STD的防治日益迫切而且重要。1986年國務院下達了制止性病蔓延的(15)號文件,1987年中央辦公廳(15)號文件又要求在中學普遍開展性教育,衛生部自85年起建立了性病防治研究中心等機構。40年代所說的性病主要
基因芯片技術的應用醫學疾病診斷
基因芯片作為一種先進的、大規模、高通量檢測技術,應用于疾病的診斷,其優點有以下幾個方面:一是高度的靈敏性和準確性;二是快速簡便;三是可同時檢測多種疾病。如應用于產前遺傳性疾病檢查,抽取少許羊水就可以檢測出胎兒是否患有遺傳性疾病,同時鑒別的疾病可以達到數十種甚至數百種,這是其他方法所無法替代的,非常有
基因芯片技術在疾病診斷領域的應用
基因芯片作為一種先進的、大規模、高通量檢測技術,應用于疾病的診斷,其優點有以下幾個方面:一是高度的靈敏性和準確性;二是快速簡便;三是可同時檢測多種疾病。如應用于產前遺傳性疾病檢查,抽取少許羊水就可以檢測出胎兒是否患有遺傳性疾病,同時鑒別的疾病可以達到數十種甚至數百種,這是其他方法所無法替代的,非常有
PCR技術應用基因克隆的應用
運用 PCR 技術、基因克隆和亞克隆比傳統的方法具有更大的優點。由于 PCR 可以對單拷貝的基因放大上百萬倍,產生微克(μg)級的特異 DNA 片段,從而可省略從基因組 DNA 中克隆某一特定基因片段所需要的 DNA的酶切、連接到載體 DNA 上、轉化、建立 DNA 文庫及基因的篩選、鑒定、亞克隆等
PCR對于癌變基因的診斷應用
癌基因的表達增加和突變,在許多腫瘤早期和良性的階段就可出現。PCR技術不但能有效的檢測基因的突變,而且能準確檢測癌基因的表達量,可據此進行腫瘤早期診斷、分型、分期和預后判斷。幾乎所有慢性骨髓性白血病患者都可檢測到原癌基因易位導致的BCR/ABL融合基因形成,定量PCR技術可通過檢測BCR/ABL融合
應用PCR技術擴增Hbβ基因
復習細胞內DNA復制條件和過程。 一、目的 1:學習PCR技術的基本原理 2:掌握從全血中制備DNA的方法‘ 3:掌握應用PCR擴增Hbβ基因的基本操作 4:熟悉Hb基因結構 二、原理 1:PCR擴增的原理 聚合酶鏈反應—PCR是一種體外基因擴增技術,是在引物和四種脫氧核苷三磷酸存在下,利用DNA
PCR技術應用二:-骨腫瘤診斷
骨腫瘤較罕見,惡性骨腫瘤只占全身惡性腫瘤的1%,男多于女,性別比約為1.6 ∶1,均好發于10-30歲間,良性者以骨軟骨瘤最多,依次為骨巨細胞瘤、內生軟骨瘤 等,惡性者以骨肉瘤最多,依次為軟骨肉瘤、纖維肉瘤等.骨惡性腫瘤的發生機理目 前認為是癌基因顯性作用與抗癌基因失活的結果,是多種癌基因多階段
澳將用基因測序技術診斷罕見基因疾病
澳大利亞加文醫學研究所27日宣布,全澳罕見病患者現在可以通過全基因測序技術獲得更準確的診斷。澳大利亞也成為繼美國后第二個向公眾提供該項測試的國家。 全基因測序技術可以將罕見病的確診幾率提高三倍。這項前沿技術現在已經走出實驗室,應用于遺傳病檢測。加文研究所主任、約翰·馬蒂克教授認為,這項技術的普
PCR技術應用基因工程的應用
基因融合通過 PCR 反應可以比較容易地將兩個不同的基因融合在一起。在兩個 PCR 擴增體系中,兩對引物分別有其中之一在其5'末端和3'末端引物帶上一段互補的序列。混合兩種 PCR 擴增產物,經變性和復性,兩組 PCR 產物通過互補序列發生粘連,其中一條重組雜合鏈能在 PCR 條件下
基因芯片的應用疾病診斷
基因芯片作為一種先進的、大規模、高通量檢測技術,應用于疾病的診斷,其優點有以下幾個方面:一是高度的靈敏性和準確性;二是快速簡便;三是可同時檢測多種疾病。如應用于產前遺傳性疾病檢查,抽取少許羊水就可以檢測出胎兒是否患有遺傳性疾病,同時鑒別的疾病可以達到數十種甚至數百種,這是其他方法所無法替代的,非常有
PCR技術應用三:突變基因檢測
? 基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因,檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學,醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點,它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 \意義,分子生物學技術的發展,尤其是PCR技
PCR技術應用三:突變基因檢測
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因,檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學,醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點,它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 \意義,分子生物學技術的發展,尤其是PCR技術
PCR技術應用十一:病毒學診斷
甲型肝炎病毒是甲型肝炎的病原體.甲型肝炎呈世界性分布,其傳染源是甲型肝炎病人及病毒攜帶者.HAV主要隨糞便排出,但在血液、唾液、膽汁和十二指腸液也可查出.本病的傳播主要是通過糞--口途徑,如經日常生活接觸傳播,經污染飲水或食物而傳播.其中無黃疸型肝炎患者容易漏診或誤診,是重要的傳染源,具有重要的
PCR技術應用四:遺傳病診斷
自從1985年PCR技術首次應用于遺傳病基因診斷以來,已有近百種遺傳病可用PCR 技術進行診斷和產前診斷,利用PCR技術診斷遺傳病的途徑有五個,①基因突變位點 的直接檢出②篩查與遺傳病③④有關的點突變③遺傳多態性標記連鎖分析間接診斷④ 利用cmRNA逆轉錄為cDNA進行分析或直接分析cmRNA.
PCR技術應用十二:結核桿菌診斷
結核桿菌可以導致全身性疾病,特別是在發展中國家,其發病率較高,危害性極大.近幾年結核桿菌的變異性較大,對抗癆藥物的耐藥性增加,從而使結核病的發病大幅度增高.雖然傳統的涂片抗酸染色、細菌培養以及胸片檢查對大部分結核能作出正確的診斷,但對某些病人亦可造成誤診或漏診;動物接種雖特異性較高,但因時間較長
熒光定量PCR技術及其應用(一)
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡
熒光定量PCR技術及其應用(一)
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill?Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase?chain?reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。這也
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
分子診斷技術、PCR技術、基因測序技術的區別、原理(二)
二、核酸序列測定 測序反應是直接獲得核酸序列信息的唯一技術手段,是分子診斷技術的一項重要分支。雖然分子雜交、分子構象變異或定量PCR技術在近幾年已得到了長足的發展,但其對于核酸的鑒定都僅僅停留在間接推斷的假設上,因此對基于特定基因序列檢測的分子診斷,核酸測序仍是技術上的金標準。 (一)第1代
PCR-技術的應用應用于癌基因檢測
與臨床診斷有關的癌基因可分為3類,即腫瘤非特異性癌基因、腫瘤特異性癌基因和暫未證明臨床意義的癌基因。用于臨床診斷的癌基因主要為前兩類,包括致癌基因與抗癌基因,轉移基因和轉移抑制基因。目前 PCR 的臨床主要用于:①檢測血液系統惡性腫瘤染色體易位,尤其是對微小殘余病灶的檢測,有助于判斷白血病的療效。②
感染性疾病基因診斷進展(一)
感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查,體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體,抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況,或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應( P
PCR技術遺傳病診斷上的應用
自從1985年PCR技術首次應用于遺傳病基因診斷以來,已有近百種遺傳病可用PCR 技術進行診斷和產前診斷,利用 PCR技術診斷遺傳病的途徑有五個,①基因突變位點 的直接檢出②篩查與遺傳病③有關的點突變④遺傳多態性標記連鎖分析間接診斷⑤ 利用cmRNA逆轉錄為cDNA進行分析或直接分析cmRN
PCR技術(一):PCR技術概論
?PCR技術概論PCR技術簡史PCR技術的基本原理PCR反應體系與反應條件PCR反應特點PCR擴增產物的分析 聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自動化等突出