目的意義:了解禽源病毒雞胚培養的意義及用途掌握病毒雞胚培養的基本方法基本原理:雞胚培養是培養某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分離、增殖、毒力滴定、中和試驗及生產疫苗等。病毒接種雞胚的途徑有多種,主要有卵黃囊接種、絨毛尿囊腔接種、絨毛尿囊膜接種、羊膜腔接種途徑等,應根據需要選擇適當的途徑。器材及試劑:病毒:雞新城疫病毒弱毒疫苗;雞胚:9-11日齡白殼受精卵;孵卵箱、檢卵燈、鋼針、注射器、2.5%碘酒、75%乙醇、固體石蠟、眼科剪、眼科鑷等。實驗步驟:1 . 準備雞胚:接種前用檢卵燈觀察是否為受精卵及其活力。雞胚發育正常,可見清晰的血管及活動的雞胚,。未受精和死胚胚體固定在一端不動,看不到血管或血管消散,應剔除。雞胚的日齡根據接種途徑和接種材料而定。 (1)卵黃囊接種,選用6~8日齡的雞胚; (2)絨毛尿囊腔接種,用9~10 齡雞胚; (3)絨毛尿囊膜接種,用9~13日齡的雞胚。2接種(本實驗選擇絨毛......閱讀全文
1. 流感病毒的形態及實驗室分離純化:l#61472;引起人類流感的病毒是冠狀病毒。冠狀病毒只感染脊椎動物。l#61472;感染流感病毒后會引起人與動物的呼吸道、消化道與神經系統病患。l#61472;流感病毒的代表型在上世紀 60年代被查明, 60年代后對各種流感病毒的完整形態已進行了深入研究。冠狀
1. 流感病毒的形態及實驗室分離純化: 引起人類流感的病毒是冠狀病毒。冠狀病毒只感染脊椎動物。 感染流感病毒后會引起人與動物的呼吸道、消化道與神經系統病患。 流感病毒的代表型在上世紀 60年代被查明, 60年代后對各種流感病毒的完整形態已進行了深入研究。冠狀病毒的基因圖譜序列(包括各種蛋白酶和病毒內
正粘病毒診斷 根據流感的典型臨床癥狀及其高度的接觸傳染性、急性發作和迅速傳播等特點,常可作出初步診斷。但為了弄清是由哪一型或哪一亞型病毒引起的,則必須進行實驗診斷,即必須進行病毒分離和鑒定或作血清學檢查,才能獲得確診,尤其是在首次發現疫情的地區。 (1)病毒的分離和鑒定&n
馬流感是早有報道的疾病。Short(1749年)最早認為馬流感與人類疾病可能有關。他談到1688年在英格蘭和愛爾蘭發生人流感前,馬就有類似人流感的癥狀。Thompson(1852年)也報道了1732年在英國愛丁堡發生人流感之前,有不少馬匹發生咳嗽、流鼻涕等癥狀。Gibson(1754年)對這次馬流感
衛生部回應甲流疫苗副作用質疑 稱國產疫苗安全 衛生部通報,上周境內31個省份報告甲型H1N1流感確診病例12500例,住院治療3765例,死亡74人。流感哨點監測結果顯示,上周境內流感病例占流感樣病例的比例為57.7%,與前一周(55.9%)相比略有上升;甲流病例占流感病例的比例為91.0
甲流告急!疫苗告急! 一周來,多國政府先后宣布進入應對甲流大爆發的緊急狀態。中國國務院10月28日召開常務會議,緊急部署疫苗接種,要求擴大疫苗產能。國務院總理溫家寶10月31日再次強調,要積極有序做好甲流疫苗接種工作。 衛生部有關負責人11月1日表示,目前,我國已有8家疫苗企業生產的
病毒或毒素與相應的抗體結合后,失去對易感動物的致病力,謂之中和試驗。本試驗主要用于:(1)從待檢血清中檢出抗體,或從病料中檢出病毒,從而診斷病毒性傳染病;(2)用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑒定細菌的毒素類型;(3)測定抗病毒血清或抗毒素效價;(4)新分離病毒的鑒定和分型,中和試驗不僅可在易感的實驗
流感疫苗的生產: I. 什么是流感疫苗:流感疫苗是無菌的滅活病毒懸液,由 A(甲)型或 B(乙)型流感病毒的一株或多株或二型混合液組成,病毒在雞胚中分別單獨培養。流感疫苗分為三種:用適當方法滅活的全病毒懸液;用物理化學方法部分或完全裂介處理病毒顆粒的無菌懸液(裂介疫苗)經處理后主要由血凝素和神經氨基
病毒必須在易感的活細胞內才能增殖,因此,根據不同病毒選擇敏感動物,離體組織細胞和雞胚進行分離培養。實驗方法原理雞胚培養方法操作簡便,適用于流感病毒,痘病毒,皰疹病毒和腦炎病毒等的培養。最常用的雞胚接種方法有四種,即絨毛尿囊膜接種法,羊膜腔(羊水囊)接種法,尿囊腔接種法和卵黃囊接種法。根據不同病毒和不
實驗方法原理 本實驗用痘苗病毒和雞新城疫病毒接種雞胚。痘苗病毒適宜于在絨毛尿囊膜上生長,經培養后,產生肉眼可見的白色痘皰樣病變,似小結節或白色小片云翳狀。雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內,生長后,雞胚全身皮膚出現出血點,以腦后最顯著。實驗材料 痘苗病毒(Vavvinia virus)
實驗方法原理 雞胚培養方法操作簡便,適用于流感病毒,痘病毒,皰疹病毒和腦炎病毒等的培養。最常用的雞胚接種方法有四種,即絨毛尿囊膜接種法,羊膜腔(羊水囊)接種法,尿囊腔接種法和卵黃囊接種法。根據不同病毒和不同目的采用適宜的接種方法。實驗步驟 1. 雞胚的檢查將9~11 日齡雞胚置于檢卵器上
當下我國正處于新型冠狀病毒2019-nCoV疫情發展階段,該病毒感染主要會造成的新型的急性肺炎癥狀(WHO已將其名為NCOVID19),疫情已在全國范圍內肆虐超過20天,對我國民生健康和經濟造成極大影響。目前網上涌現多篇關于新型冠狀病毒2019-nCoV實驗室檢測技術的文章,文章質量水平千差萬別
一、血液學檢查 病毒感染相關的血液學檢查主要包括血常規、血生化以及其他針對性的檢測項目,相關指標為臨床常用的病毒感染診斷指標,為疾病的輔助診斷提供依據。 1、血常規 血常規中的許多項具體指標都是一些常用的敏感指標,對機體內許多病理改變都有敏感反映,其中又以白細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白和
當下我國正處于新型冠狀病毒2019-nCoV疫情發展階段,該病毒感染主要會造成的新型的急性肺炎癥狀(WHO已將其名為NCOVID19),疫情已在全國范圍內肆虐超過20天,對我國民生健康和經濟造成極大影響。目前網上涌現多篇關于新型冠狀病毒2019-nCoV實驗室檢測技術的文章,文章質量水平千差萬別
病毒的雞胚培養可用于:(1)某些病毒分離、增殖;(2)病毒的毒力測定、中和試驗;(3)生產疫苗等。實驗方法原理 羊膜腔接種主要應用于從臨床材料(如患者咳嗽液等)分離流感病毒等。這種接種途徑可直接感染羊膜腔的內胚層,也可被雞胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊
口蹄疫病毒檢驗Foot-and-mouth disease virus,FMDV口蹄疫病毒(Food and mouth disease virus,FMDV)是牛、豬、羊等偶蹄動物口蹄疫的病原。FMD:OIE A類傳染病之一,是全球性最重要的動物健康問題之一。1898年,德國科學家Loeffler
病毒學的研究初期,由于當時人們在顯微鏡下觀察不到病毒粒體,加之病毒又不能進行人工培養,因而分離到病毒對于明確病毒的生物學特性顯得十分重要。在當時尚無高速離心機的情況下,人們試圖用馬力離心機來從病組織中分離病毒。直到高速和超速離心機問世后,人們才有可能依據病毒學性分離和制備病毒。時至今日,病毒的分離,
實驗方法原理本實驗用痘苗病毒和雞新城疫病毒接種雞胚。痘苗病毒適宜于在絨毛尿囊膜上生長,經培養后,產生肉眼可見的白色痘皰樣病變,似小結節或白色小片云翳狀。雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內,生長后,雞胚全身皮膚出現出血點,以腦后最顯著。實驗材料痘苗病毒(Vavvinia virus)雞新城疫病毒(
疫苗是如何生產出來的呢?近日,在工作人員的帶領下,記者實地探訪了甲型H1N1流感疫苗企業,看到了“種在”雞蛋里的甲感疫苗。 名詞解釋: 疫苗就是病毒,不過這種病毒已經剔除致病能力。當人體接種疫苗時,免疫系統就會產生一定的保護物質。當人再次接觸該類病毒時,人的免疫系
雖然2013年8月份的流感疫苗貨源充足、效果顯著,美國的疫苗供應商們已經著手開始大量運送新的流感疫苗,為即將到來的9月和10月的流感季做好充分的防御,打響了美國今秋流感反擊戰的第一炮。 美國疾病預防控制中心(Centers for Disease Control and Prevent
細胞懸浮培養是利用生物反應器大規模培養動物細胞生產生物制品的核心技術,是當前國際上生物制品生產的主流模式,其最大優勢是通過更為精確有效的工藝控制手段,在獲得最大產量的同時能穩步提高產品的質量。但該技術目前在國內尚未得到廣泛應用,生物制品生產仍主要采用病毒產率低、生產成本高、勞動強度大的轉瓶細胞培養方
3.增殖 豬瘟病毒能在豬腎細胞和其它一些哺乳動物細胞內增殖。病毒成分在胞 漿內合成和裝配后,以芽生法成熟并釋放。 細胞培養物中病毒的傳播呈三種方式。一是從感染細胞內釋放的病毒粒子經培養液 感染新的易感細胞;二是被感染細胞通過有絲分裂直接傳給子細胞,向培養液中加入豬 瘟抗血清不影響病
流感疫苗的應用:重要性:流感會引起區域甚至世界性大流行發病率和死亡率很高,對于兒童與老年人,發病率與死亡率更高。由于目前全世界各國老年人口增加比例高于其他年齡段,流感大范圍流行的后果將十分嚴重。目前唯一可行的預防措施是疫苗接種。流感全病毒滅活疫苗在全世界范圍內使用已半個多世紀,50多年來由全病毒滅
雙抗體夾心法(測抗原) 間接法(測抗體) 競爭法測抗原 實驗方法原理 圖1. 雙抗體夾心法測抗
酶聯免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各種細胞內成份的定位。(2)研究抗酶抗體的合成。(3)顯現微量的免疫沉淀反應。(4)定量檢測體液中抗原或抗體成份。實驗方法原理圖1. 雙抗體夾心法測抗原示意圖 本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品
一、標本的采集與處理(一)標本的采集1、病毒分離標本的采集病毒分離成功與否很大程度上取決于采集標本的質量,及其保存、運輸等環節。多數標本取自患者上呼吸道鼻咽腔,其次為氣管和支氣管分泌物,有時也采用肺活檢材料等。標本采集后應立即放入適當的采樣液中低溫保存,常用的采樣液為:普通肉湯,pH7.4-7.6的
一、目的要求掌握雞胚尿囊腔接種培養新城疫病毒的操作技術。二、器材1.雞胚 應選用健康雞群的受精蛋,接種雞的雞胚應無母源抗體,以免影響病毒在胚胎中的增殖。實驗用的雞胚多采用9—10日齡的活胚。2.接種材料 新城疫I系疫苗3.各種器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml結核菌素注射器、41/2號注射針
實驗方法原理50% 終點 (50% endpoint) 法是將病毒懸浮液經一系列稀釋后,接種至動物、雞胚或培養成單層的細胞,將每個稀釋度造成的動物、雞胚致死量或細胞病變做成曲線,找出造成 50% 動物、雞胚死亡或細胞病變的終點稀釋度。 LD50 (50 % Lethal dose) 為造成 50%動
7.免疫乙腦病毒產生堅強的持久免疫力,迄今沒有見到臨床病例在痊愈后第二 次感染發病 的報道。且如上述,乙腦病毒的抗原變異不顯著,尚未發現在免疫保護力方面明顯不同 的型或亞型,這就為流行性乙型腦炎的特異性預防提供了良好的基礎。目前應用的乙腦 疫苗有滅活疫苗和弱毒疫苗兩種。滅活疫苗的制造方
三、病毒學的發展歷程病毒病害的病原研究階段; 病毒化學和結構研究階段。(一)病毒病害的病原研究階段 自病毒發現直到上個世紀30年代初,病毒學研究主要集中在:分離和鑒定引起各種病毒性疾病的病毒;病毒對疾體所引起的特異性病理效應;病毒的傳播方式和感染宿主范圍;各種理化因子對病毒感染的影響等方面。 在