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實驗方法原理 無菌操作從蛋中取出雞胚放入培養皿中。實驗步驟 材料：無菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高濃度抗生素的 BSS，見附錄 I)，裝在 25?50 ml 的螺口試管或通用容器內BSS：50 ml 盛于無菌燒杯中，用于冷卻燒過的器械20?50 ml 小燒杯或蛋杯直頭和彎頭鑷子9 cm 皮氏培養皿 非滅菌材料孵化 10 天的受精卵70%乙醇棉簽 孵箱（非 C02) 操作步驟1. 在濕潤的環境中于 38.5℃：條件下孵卵，每天轉動 180°，然雞卵孵育也需要 20?21 天，但它們的發育階段不同于鼠胚。分離整個胚胎進行細胞培養，需在大約第 8 天時進行。若分離器官則大約在第 10?13 天（在英國第 10 天是要許可證的最后期限）。2. 用 70% 乙醉棉簽消毒雞卵，鈍端向上放于小燒杯內（圖 12.4a）。3. 用無菌鑷打破卵殼（圖 12.4b）, 剝離卵殼直到氣旗的邊緣（圖 1......閱讀全文
實驗方法原理 本實驗用痘苗病毒和雞新城疫病毒接種雞胚。痘苗病毒適宜于在絨毛尿囊膜上生長，經培養后，產生肉眼可見的白色痘皰樣病變，似小結節或白色小片云翳狀。雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內，生長后，雞胚全身皮膚出現出血點，以腦后最顯著。實驗材料 痘苗病毒（Vavvinia virus）
一、目的要求掌握雞胚尿囊腔接種培養新城疫病毒的操作技術。二、器材1.雞胚 應選用健康雞群的受精蛋，接種雞的雞胚應無母源抗體，以免影響病毒在胚胎中的增殖。實驗用的雞胚多采用9—10日齡的活胚。2.接種材料 新城疫I系疫苗3.各種器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml結核菌素注射器、41/2號注射針
實驗方法原理本實驗用痘苗病毒和雞新城疫病毒接種雞胚。痘苗病毒適宜于在絨毛尿囊膜上生長，經培養后，產生肉眼可見的白色痘皰樣病變，似小結節或白色小片云翳狀。雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內，生長后，雞胚全身皮膚出現出血點，以腦后最顯著。實驗材料痘苗病毒（Vavvinia virus）雞新城疫病毒（
目的意義：了解禽源病毒雞胚培養的意義及用途掌握病毒雞胚培養的基本方法基本原理：雞胚培養是培養某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分離、增殖、毒力滴定、中和試驗及生產疫苗等。病毒接種雞胚的途徑有多種，主要有卵黃囊接種、絨毛尿囊腔接種、絨毛尿囊膜接種、羊膜腔接種途徑等，應根據需要選擇適當的途徑。器材
病毒的雞胚培養可用于：（1）某些病毒分離、增殖；（2）病毒的毒力測定、中和試驗；（3）生產疫苗等。實驗方法原理 羊膜腔接種主要應用于從臨床材料（如患者咳嗽液等）分離流感病毒等。這種接種途徑可直接感染羊膜腔的內胚層，也可被雞胚咽下或吸入，引起全胚胎感染。另外，病毒也可被排泄到尿囊腔中，使尿囊
病毒必須在易感的活細胞內才能增殖，因此，根據不同病毒選擇敏感動物，離體組織細胞和雞胚進行分離培養。實驗方法原理雞胚培養方法操作簡便，適用于流感病毒，痘病毒，皰疹病毒和腦炎病毒等的培養。最常用的雞胚接種方法有四種，即絨毛尿囊膜接種法，羊膜腔（羊水囊）接種法，尿囊腔接種法和卵黃囊接種法。根據不同病毒和不
一、標本的采集與處理（一）標本的采集1、病毒分離標本的采集病毒分離成功與否很大程度上取決于采集標本的質量，及其保存、運輸等環節。多數標本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物，有時也采用肺活檢材料等。標本采集后應立即放入適當的采樣液中低溫保存，常用的采樣液為：普通肉湯，pH7.4-7.6的
實驗方法原理 羊膜腔接種主要應用于從臨床材料（如患者咳嗽液等）分離流感病毒等。這種接種途徑可直接感染羊膜腔的內胚層，也可被雞胚咽下或吸入，引起全胚胎感染。另外，病毒也可被排泄到尿囊腔中，使尿囊腔中含有大量病毒。因此，在用羊膜腔接種分離病毒時，除可收獲羊水以外，還可收獲尿囊液。實驗材料 雞胚試劑、試劑
薛社普 著名細胞生物學家、實驗胚胎學家和生殖生物學家，中國醫學科學院研究員、北京協和醫學院教授。廣東新會人，1917年出生，1943年畢業于重慶中央大學博物系，1951年獲美國華盛頓大學（圣路易斯）理科哲學博士學位。1991年當選為中國科學院院士。對細胞分化規律及其可調控性提供了重要理論依據；為
實驗方法原理50% 終點 (50% endpoint) 法是將病毒懸浮液經一系列稀釋后，接種至動物、雞胚或培養成單層的細胞，將每個稀釋度造成的動物、雞胚致死量或細胞病變做成曲線，找出造成 50% 動物、雞胚死亡或細胞病變的終點稀釋度。 LD50 (50 % Lethal dose) 為造成 50%動
當下我國正處于新型冠狀病毒2019-nCoV疫情發展階段，該病毒感染主要會造成的新型的急性肺炎癥狀（WHO已將其名為NCOVID19），疫情已在全國范圍內肆虐超過20天，對我國民生健康和經濟造成極大影響。目前網上涌現多篇關于新型冠狀病毒2019-nCoV實驗室檢測技術的文章，文章質量水平千差萬別
一、血液學檢查 病毒感染相關的血液學檢查主要包括血常規、血生化以及其他針對性的檢測項目，相關指標為臨床常用的病毒感染診斷指標，為疾病的輔助診斷提供依據。 1、血常規 血常規中的許多項具體指標都是一些常用的敏感指標，對機體內許多病理改變都有敏感反映，其中又以白細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白和
當下我國正處于新型冠狀病毒2019-nCoV疫情發展階段，該病毒感染主要會造成的新型的急性肺炎癥狀（WHO已將其名為NCOVID19），疫情已在全國范圍內肆虐超過20天，對我國民生健康和經濟造成極大影響。目前網上涌現多篇關于新型冠狀病毒2019-nCoV實驗室檢測技術的文章，文章質量水平千差萬別
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白為淡黃色粉末，雖易潮解結塊，但不影響使用。 不同批號和牌號質量有差異。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解后的產物，含有豐富的氨基酸。開始時它是專為猴腎細胞培養設計的，而實際上它對許多細胞系(株)，如Hela細胞和原代細胞都是一種優良培養基。使用時用Hanks液配制成0
實驗方法原理 無菌操作從蛋中取出雞胚放入培養皿中。 實驗步驟 材料：無菌材料DBSS: 取材用
實驗方法原理組織培養是目前培養病毒應用最廣的一種培養方法，其優點是①經濟適用，結果正確且敏感；②較實驗動物易于控制。原代細胞單層培養法，是指動物（包括脊椎動物和無脊椎動物）的組織自機體取出后，經胰酶或其他細胞分散劑消化處理，得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中，加入細胞生長所必需的營養液，置合
實驗方法原理絨毛尿囊膜接種常用于牛痘病毒、天花病毒、單純皰疹病毒的分離，因為這些病毒在絨毛尿囊膜上可形成肉眼可見的斑點狀或痘皰狀病灶。另外，病毒可在絨毛尿囊膜上進行滴定，因為感染性病毒顆粒的數目可以通過產生的斑和痘的數目來計算。該方法還可用于抗病毒血清的滴定試驗，即在有抗體存在的情況下，痘皰形成受到
實驗方法原理卵黃囊接種法主要用于蟲媒病毒、衣原體及立克次體等的分離和繁殖。這些大的病原體主要在卵黃囊的內皮細胞生長，且生長速度很快，立克次體在染色后也可看到。實驗材料雞胚試劑、試劑盒消毒劑 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）儀器、耗材檢卵燈照明燈卵杯卵盤雞胚開孔器等實驗步驟1. 接種步驟與方法(1
實驗方法原理 實驗材料 小鼠或雞的整個胚胎、組織或外植體試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定劑β-半乳糖苷酶洗滌緩沖液β-半乳糖苷酶染色液儀器、耗材 5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽蓋的試管或1.5?2 mL的離心管轉動平臺染色用密閉箱附有蓋玻片的下陷載玻片或箱式載玻片
“喂好傲嬌的細胞，口糧選擇很重要”培養基供給細胞營養，促使細胞增殖，也是細胞賴以生長的環境。細胞要吃什么？選擇什么樣的培養基？是細胞培養能否成功的重要因素經典培養基包括MEM、DMEM、RPMI1640、DMEM：F12McCoy's 5A 、M-199 它們各自有什么成分？適用于什么細胞？
一、什么是禽流感？禽流感（AI）是由A 型流感病毒（AIV ）引起的禽類疾病綜合癥。禽類感染AIV 后表現為：輕度上呼吸道感染、精神萎縮、食欲減退，有類似人類A 型流感的癥狀。初期還會引起肉用雞停止增重，蛋雞產蛋量大大下降，種蛋孵化率下降等。發病很急，很短時間就會發展到全身致死性疾病綜合癥。AIV
病毒學的研究初期，由于當時人們在顯微鏡下觀察不到病毒粒體，加之病毒又不能進行人工培養，因而分離到病毒對于明確病毒的生物學特性顯得十分重要。在當時尚無高速離心機的情況下，人們試圖用馬力離心機來從病組織中分離病毒。直到高速和超速離心機問世后，人們才有可能依據病毒學性分離和制備病毒。時至今日，病毒的分離，
實驗方法原理雞胚浸出液內含有生長因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等，有刺激細胞生長作用，為早年培養使用的培養用液，現已被合成培養液所代替，但在某些研究中仍有一定應用價值。實驗材料雞卵試劑、試劑盒酒精碘酒BSS儀器、耗材孵化箱燒杯注射器離心機實驗步驟1. 孵化選健康受精雞卵，置入37 ℃溫
3.1.3 討論 使用 Sepharose 4FF分子篩分析柱對濃縮液進行分析，快速檢定濃縮液中雜質的殘留，并比較病毒和雜質的分離情況，結果見圖 5所示。 使用兩種不同的超濾膜進行濃縮，所得濃縮液中病毒顆粒的積分面
半乳糖苷酶活性的整體封片染色和免疫組化檢測 準備大組織的厚切片進行β-半乳糖苷酶染色 實驗方法原理
實驗方法原理無菌操作從蛋中取出雞胚放入培養皿中。實驗步驟材料：無菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高濃度抗生素的 BSS，見附錄 I)，裝在 25?50 ml 的螺口試管或通用容器內BSS：50 ml 盛于無菌燒杯中，用于冷卻燒過的器械20?50 ml 小燒杯或蛋杯直頭和彎頭鑷子9 cm 皮氏培
實驗方法原理 背根神經節(dorsalrootganglion,DRG)細胞起源千神經峙，外源性神經營養因子(NGF)能刺激DRG細胞生長發育并形成廣泛的神經網絡。目前，利用培養的DRG細胞進行軸突生長發育的研究，是最為經典和常用的方法之一。實驗材料 孵化8-12d的雞胚。孕15d及新生1-3d的大
實驗方法原理 研磨用膠原蛋白處理的整塊骨骼肌，以分散為單肌纖維。在 Matrigel 上培養單肌纖維，然后收集遷出的細胞。實驗材料 MatrigelDMEM L-谷氨酰胺Ⅰ型膠原蛋白試劑、試劑盒 青霉素和鏈霉素混合液雞胚提取液馬血清胎牛血清接種培養液增殖培養液儀器、耗材 Petri培養皿改良Past
實驗方法原理 不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差別，沉降速度差別（相差）在一個或幾個數量級的粒子，可用本法分離提取。實驗材料 待純化的病毒試劑、試劑盒 無儀器、耗材 差速離心機實驗步驟 將被分離的樣品交替進行低速離心與高速（或超速）離心。差速離心適用于從組織培養液、雞胚尿囊液或經過紅細胞吸附－釋
一、兩棲綱蛙與蟾蜍與人類的關系疏遠、個體小、易于飼養。有冬眠、體外受精繁殖。蛙在發育過程中呼吸系統的鰓轉變成肺。蟾蜍的皮膚薄，有毒腺能分泌蟾蜍素，特別是耳下腺分泌量最多。蛙的離體心臟常為生理、藥理研究心臟生理、藥物作用的標本。腓腸肌坐骨神經標本可作神經肌肉試驗。刺激蛙的皮膚可觀察反射弧的