流式細胞儀檢測的免疫熒光樣品標記
用于流式細胞儀檢測的常用熒光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5，PE和PI，在以上各種熒光染料中，PE熒光最強，適用于弱表達抗原；FITC最便宜，適用于強表達抗原，適用范圍廣。 1．直接免疫熒光標記法 取一定量的細胞懸液(濃度約l×l06個/m1)，直接加入熒光素標記抗體進行免疫反應(如做雙重標記或多重標記染色，可把幾種標記有不同熒光素的抗體同時加入)。4℃孵育15～30分鐘后，用l/15mol/LPBS(pH 7．2～7．4)洗l～2次，加入緩沖液重懸，上機檢測。 本方法操作簡便，結果準確，易于分析，適用于同一細胞群多參數同時測定。雖然直接熒光抗體標記試劑成本較高。但減少了間接標記法中較強的非特異熒光干擾，因此更適用于臨床標本的檢測。 2．間接免疫熒光標記法 取一定量的細胞懸液(濃度約5×106個/......閱讀全文
熒光強度和熒光效率的關系
溫度 溫度對于溶液的熒光強度有著顯著的影響。在一般情況下，隨著溫度的升高，熒光物質溶液的熒光效率和熒光強度將降低。這是因為，當溫度升高時，分子運動速度...
熒光素和熒光素酶是什么
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低，因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發和發射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統
熒光二抗如何選擇Dylight熒光與傳統熒光標記的比較
熒光二抗的選擇——Dylight熒光與傳統熒光標記的比較顧名思義，熒光二抗通常指代的就是帶熒光團標記的二抗，這樣的二抗可以通過觀察其在不同波長下熒光的強度來確定其二抗的含量。常見的熒光團包括FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Cy系列等。比如FITC即異硫*酸熒光素，是目前應用最
熒光光譜儀的偏振熒光分析和時間分辨熒光分析
1、偏振熒光分析。熒光體的熒光偏振與熒光各向異性值的測定，能夠提供與熒光體在激發態壽命期間動力學相關的信息，因此熒光偏振技術被廣泛應用于研究分子間的作用，例如蛋白質與核酸、抗原與抗體、蛋白質與多肽的結合作用等。 2、時間分辨熒光分析。由于不同分子的熒光壽命不同，可在激發與檢測之間延緩一段時間，
熒光分子的微環境是怎樣影響熒光強度的熒光強度
1．溶劑的影響同一種熒光物質存不同溶劑中，其熒光光譜的位置和強度可能有明顯不同。例如，許多共軛芳香烴化合物的熒光強度隨溶劑極性：的增加而增強，且熒光峰波長向長波方向發時發生了π→π*躍遷，其激發態比基態的極性更大，隨著溶劑極性的增大，對激發態比對基態產生更大的穩定作用，結果使熒光光譜發生了紅移。2．
熒光分子的微環境是怎樣影響熒光強度的熒光強度
1．溶劑的影響同一種熒光物質存不同溶劑中，其熒光光譜的位置和強度可能有明顯不同。例如，許多共軛芳香烴化合物的熒光強度隨溶劑極性：的增加而增強，且熒光峰波長向長波方向發時發生了π→π*躍遷，其激發態比基態的極性更大，隨著溶劑極性的增大，對激發態比對基態產生更大的穩定作用，結果使熒光光譜發生了紅移。2．
熒光檢測器熒光產生相關介紹
從電子躍遷的角度來講，熒光是指某些物質吸收了與它本身特征頻率相同的光線以后，原子中的某些電子從基態中的最低振動能級躍遷到較高的某些振動能級。電子在同類分子或其他分子中撞擊，消耗了相當的能量，從而下降到第一電子激發態中的最低振動能級，能量的這種轉移形式稱為無輻射躍遷。由最低振動能級下降到基態中的某
熒光蘑菇助專家合成人工熒光素
在巴西分布的一種熒光蘑菇在黑暗中會發出綠色熒光，俄羅斯和巴西科研人員通過分析這種蘑菇的發光機制，人工合成熒光素分子，有望用于開展其他生物化學實驗。 在巴西部分地區的棕櫚樹下長有一種當地人俗稱“椰子花”的熒光蘑菇。在日光下這種蘑菇呈現黃白相間的顏色，但在夜里或黑暗的洞穴中它能發出綠色熒光，吸引昆
熒光光譜儀的熒光分析特點
（1）熒光分析的主要特點是靈敏度高、選擇性好，熒光分析的靈敏度要比吸收光譜測量高2-3個數量級。分光光度法通常在 10-7 級，而熒光的靈敏度達10-9。 （2）強選擇性強，熒光物質具有兩種特征光譜：激發光譜和吸收光譜，相對于分光光度法單一的吸收光譜來說，熒光光譜可根據激發光譜和發射光譜來鑒定
熒光鏡檢術熒光顯微鏡
熒光鏡檢術-熒光顯微鏡熒光鏡檢術是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體，使之受激發后而產生長波長的熒光，然后觀察。熒光鏡檢術廣泛應用于生物，醫學等領域。1．熒光鏡檢術一般分為透射和落射式兩種類型。（1）透射式：激發光來自被檢物體的下方，聚光鏡為暗視野聚光鏡，使激發光不進入物鏡，而使熒光進入物鏡
熒光蘑菇助專家合成人工熒光素
在巴西分布的一種熒光蘑菇在黑暗中會發出綠色熒光，俄羅斯和巴西科研人員通過分析這種蘑菇的發光機制，人工合成熒光素分子，有望用于開展其他生物化學實驗。 在巴西部分地區的棕櫚樹下長有一種當地人俗稱“椰子花”的熒光蘑菇。在日光下這種蘑菇呈現黃白相間的顏色，但在夜里或黑暗的洞穴中它能發出綠色熒光，吸引昆
病毒免疫熒光實驗_熒光抗體的制備
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光色素的選擇 可以產生明亮熒光的染料物質，稱熒光色素 (fluorochrome) 。目前常用的熒光色素有以下幾種：(1) 異硫氰酸熒光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在堿性條件下， FITC 的異硫氰酸基在水溶液
病毒免疫熒光實驗_?熒光素標記抗體
實驗材料熒光色素試劑、試劑盒抗體實驗步驟熒光標記抗體方法有直接標記法和間接標記法兩種。(1) 直接法：較為常用，具體步驟是：1) 抗體溶液的制備：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 將待標記抗體稀釋至 20mg/ml;2) 熒光素：根據待標記抗體的總量，按 0.01mg 熒光素/mg 蛋白
熒光定量PCR熒光化學物質
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下： 1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；P
如何提高熒光光譜儀接收熒光？
如何提高熒光光譜儀接收到的熒光？對于一些物質來說，產生熒光的能力是非常弱，以至一些普通探測器都無法響應。為了使熒光光譜儀能夠接收到更多的熒光，往往采用以下幾個措施：1、提高激發光的強度：可以用激光器來代替鹵素燈源，激光器的功率密度往往比鹵素燈高的多。使用該方法，根據激光器功率的不同，熒光有幾倍到幾個
熒光光譜儀同步熒光分析簡介
同步熒光分析。它與常用熒光測定最大的區別是同時掃描激發和發射兩個單色器波長，由測得的熒光強度信號與對應的激發波長(或發射波長)構成光譜圖，即同步熒光光譜。步熒光分析具有光譜簡單，譜帶窄、分辨率高、光譜重疊少等優點，可提高選擇性，減少散射光等的影響，非常適合多組分混合物的分析，在環境、藥物、臨床、
葉綠素熒光儀之葉綠素熒光名詞解釋
葉綠素熒光，作為光合作用研究的探針，得到了廣泛的研究和應用。葉綠素熒光不僅能反映光能吸收、激發能傳遞和光化學反應等光合作用的原初反應過程，而且與電子傳遞、質子梯度的建立及ATP合成和CO2固定等過程有關。幾乎所有光合作用過程的變化均可通過葉綠素熒光反映出來，而熒光測定技術不需破碎細胞，不傷害生物
怎么從熒光光譜圖判斷熒光熄滅
用熒光光譜只能得到穩態法的熒光猝滅信息。 也就是說，先檢測一份純樣品的熒光光譜，然后再檢測一份加入猝滅劑后的樣品的熒光光譜，對比前后兩次檢測結果的區別。一般來說，具有熒光猝滅現象的光譜會比純樣品的熒光強度低很多，甚至檢測不到熒光峰。 另外，如果你的實驗室有脈沖激光器和響應時間足夠快的數據采集卡（
熒光定量PCR實驗時，熒光基團如何選擇？
?原則一? ? 每個反應只檢測一個基因的，方法就比較簡單，對5’端熒光基團的選擇以及3’端淬滅基團的選擇余地都是比較大的。比如5’-FAM? +? 3’-BHQ，就是比較常見的方案。? ? 下表為常用熒光染料（基團）的顏色及波長參數，供參考。? ??? ? 原則二? ? 如果在每個反應中要檢測的目的
蛋白質的內源熒光與熒光探針
利用熒光光譜法研究蛋白質一般有兩種方法。一是測定蛋白質分子的自身熒光(內源熒光)，另一種是當蛋白質本身不能發射熒光時，通過非共價吸附或共價作用向蛋白質分子的特殊部位引入外源熒光(也稱熒光探針)，然后測定外源熒光物質的熒光。 ?蛋白質的內源熒光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan?,Trp
熒光分光光度計（分子熒光）
1、基本原理 在室溫下分子大都處在基態的最低振動能級，當受到光的照射時，便吸收與它的特征頻率相一致的光線，其中某些電子由原來的基態能級躍遷到第一電子激發態或更高電子激發態中的各個不同振動能級，這就是在分光光度法中所述的吸光現象。躍遷到較高能級的分子，很快通過振動弛豫、內轉換等方式釋放能量后下
熒光免疫層析法要用熒光筆嗎
不用熒光筆，熒光免疫層析法抗原試劑檢測盒是新冠抗原檢測試劑盒的一種，是國務院聯防聯控機制綜合組推行的作為核酸檢測的一種補充檢測手段。與另外兩種抗原檢測試劑盒不同，熒光免疫層析法試劑檢測盒既可以采用專業免疫熒光分析儀間接觀察并判讀檢測結果也可以配合專業紫外線燈直接觀察判讀檢測結果。
石蠟切片免疫熒光如何消除自發熒光
可以用遠紅外波長的熒光范圍內的二抗，在此范圍內基本看不到自發熒光的信號；也可以用丙酮固定不用醛類物質。都可以減少自發熒光的產生
免疫熒光技術的所需熒光物質介紹
⑴熒光物質1）熒光色素許多物質都可產生熒光現象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有：⑴異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）為黃色或橙黃色結晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑。
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子（reporter molecule）結
與透射熒光相比，反射激發熒光的優點
目前熒光顯微鏡使用二種激發照明方式，一為透射方法，另一為反射方法。透射激發是過去沿用下來的方法，往往只需在普通顯微鏡前方設置一個超高壓汞燈作光源，燈前設置激發濾光片，在目鏡處設置遏止濾光片，這樣即可作一般透射熒光觀察，比較經濟實用，使用也很習慣。目前專用的透射熒光顯微鏡，其聚光鏡用暗場聚光鏡，暗場熒
穩態熒光測量和時間分辨熒光的區別
時間分辨熒光技術有基于時域和基于頻域兩種測量方法。由于時間分辨結果數據包含有比穩態熒光數據更多的信息,近年來,時間分辨熒光技術已成為生物化學與生物物理領域的主要研究工具之一。熒光壽命成像技術可以同時獲得分子狀態以及空間分布的信息,在生物學和醫學領域也得到了越來越廣泛的應用。以下將從原理、儀器及應用等
什么是熒光
熒光是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光（通常是紫外線或X射線）照射，吸收光能后進入激發態，并且立即退激發并發出比入射光的的波長長的出射光（通常波長在可見光波段）；而且一旦停止入射光，發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。
什么是熒光
熒光是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光（通常是紫外線或X射線）照射，吸收光能后進入激發態，并且立即退激發并發出比入射光的的波長長的出射光（通常波長在可見光波段）；而且一旦停止入射光，發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。
熒光成像系統
用熒光顯微鏡進行3D球狀體熒光成像時，需要進行儀器設置優化和使用高級功能才能得到更好的成像結果。對球狀體進行Z軸層掃時，需要選擇合適的物鏡并進行合適地聚焦才能拍出更清晰的圖片。EVOS細胞成像系統和配套的CellesteTM成像分析軟件可以完美地對球狀體的大小、結構和蛋白表達水平進行定性和定量分析。