轉基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1） 點燃酒精燈，調節火焰到最佳。捏持玻璃毛細吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋轉過火。2） 當吸管開始變軟，快速撤離火焰，向外急劇扯拉使吸管變長，形成口徑大約200?l的吸管。注意制備過程中離開火焰的時間以及扯拉的力度，盡量保證制備吸管的一致性。3） 為吸管評分，輕柔地折斷吸管，辨別其聲音是否清脆，或扯拉吸管或只做彎曲直到兩根同分數的吸管斷裂為止。4） 解剖鏡下(要在熔斷儀上)檢查吸管，并對其進行調整，確定其口徑以及管口光滑平整。[移卵管的制作]用于轉移注射后受精卵到假孕鼠體內的吸管制作過程同上洗卵管。不同的是，這些吸管的口徑稍微小一些，大約150?m(150-160?m)，直徑比單受精卵的口徑略大一些，將促使卵細胞精細的充滿移卵管并轉移到輸卵管。移卵管在打磨過程中要求管口更光滑平整以減輕插入輸卵管時對輸卵管的損傷，同時必須注意移卵管頭在火焰上時間不可太長，防止融化堵塞。......閱讀全文
轉基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1）? 點燃酒精燈，調節火焰到最佳。捏持玻璃毛細吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋轉過火。2）? 當吸管開始變軟，快速撤離火焰，向外急劇扯拉使吸管變長，形成口徑大約200?l的吸管。注意制備過程中離開火焰的時間以及扯拉的力度，盡量保證制備吸管的一致性。3）? 為吸管評分，輕柔地折斷吸管，辨別
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
10）? 移卵操作完成后，撤回移卵管，去除器械，按原本位置將各器官重置于腹腔內。10）縫合切口，用小夾夾持皮膚。常用自動小夾代替縫線，這樣可以避免小鼠啃嘶縫線，切口裂開。11）若進行雙側手術，則于另一側子宮角重復上述操作。12）手術完成后，安置小鼠于清潔的籠中。麻醉狀態下，小型哺乳動物無法有效維持機
轉基因小鼠模型的建立(SOP)8
（1）? RNA的分離：根據實驗者的需要從轉基因小鼠組織或細胞中提取總RNA或mRNA。分離總RNA比較簡單，且適合做基因做基因轉錄分析。實驗操作參見第一章的第四節。（2）? Northern 印跡分析：該技術用于定性檢測轉基因動物組織或細胞中轉基因轉錄的相對水平。其實驗操作參見第一章的第九節。（3
轉基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之處]（1）外源基因隨機整合；（2）個別原核不清晰，需進行特殊處理；（3）需大型精密儀器，費用昂貴；（4）操作周期相對較長。（二）實驗器材的準備1．輸精管切除術用器材：彎式有齒鑷、直式有齒鑷、顯微鑷、手術剪、自動小夾涂藥器、自動小夾、帶彎針4/0絲線及持針器、直徑為10cm塑料 Petri氏培
轉基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受體母鼠的準備輸卵管轉移的受體鼠應該為4-6周齡大小，體重在20-25克左右，嚴禁用低體重以及超重母鼠，若體重較低，其體能不足以維持妊娠，可能導致受精卵的重新吸收；若體重較重，麻醉劑被吸收入脂肪組織，降低麻醉效果，可能使手術困難，而且脂肪組織的存在意味著靜脈的存在，所以手術時切掉脂肪組織可能導
轉基因小鼠模型的建立(SOP)7
4）? 如果未見DNA溶液流，則輕輕摩擦持樣器鈍緣，漸漸的打開注射器針頭。針頭重新進入油內確定DNA溶液流的存在。5）? 移動持卵管回到受精卵下部。通過微分驅動水壓控制系統使持卵管內產生溫和的負壓，并使持卵管末端吸住受精卵。此操作必須確保受精卵基底部與凹玻片基底部輕輕接觸。注意不宜吸得過緊，否則會使
轉基因小鼠模型的建立(SOP)1
名稱：轉基因小鼠模型的建立(SOP)關鍵詞：轉基因小鼠目的：在動物體研究轉化基因原理：轉基因動物是指染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一類動物。整合到動物染色體基因組的外源基因稱為轉基因。轉基因技術則是指制備轉基因動物所需的一套技術，它涉及外源基因的構建、載體和受體的篩選、基因導人技術、供
轉基因小鼠模型的建立(SOP)4
（6）? 為保暖包裹小鼠于紗布中或將其放置于熱墊內使其蘇醒，處于麻醉狀態下的小鼠應該嚴格監護直到其完全蘇醒。手術后小鼠飼養2周后確定手術是否成功。（7） 實驗性飼養：將1-2只母鼠與輸精管切除小鼠合籠飼養，次晨進行陰道栓檢查。有陰道栓的母鼠，用磷酸緩沖液處理后24小時，其輸卵管潮紅。卵細胞應該處于單
轉基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．顯微注射（1）導入DNA的制備：顯微注射首先涉及導入DNA的制備，顯微注射的轉入基因通常為去除載體序列的線狀DNA，轉基因所用載體是真核表達載體，即含有在哺乳動物細胞內表達的真核啟動子。所謂組織特異性的實現多是通過組織特異性啟動子來實現組織特異性表達的。制備轉基因小鼠，必須對待導入DNA進行分離
顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程
實驗概要本實驗詳細介紹了顯微注射法建立轉基因小鼠模型的操作流程。實驗原理轉基因小鼠制備的基本原理是將改建后的目的基因(或基因組片段)用顯微注射法注入供體小鼠的受精卵(或著床前胚胎細胞)，然后將此受精卵(或著床前胚胎細胞)再植入受體動物的輸卵管(或子宮)中，使其發育成攜帶有外源基因的轉基因動物，通過分
小鼠腦出血模型的建立
實驗材料小鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉儀器、耗材鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟1．固定小鼠?a．用繩子將已麻醉的小鼠俯臥（背朝上）固定在鼠板上，繩子用活結，這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。?b．用棉花將小鼠的頭微微墊高，這樣方便切開皮膚。?2．鉆
小鼠腦出血模型的建立
實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 戊巴比妥鈉儀器、耗材 鉆孔器注射器含抗凝血劑的試管鼠板縫合方針和線實驗步驟 1．固定小鼠?a．用繩子將已麻醉的小鼠俯臥（背朝上）固定在鼠板上，繩子用活結，這樣不易打滑。固定時要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線上。?b．用棉花將小鼠的頭微微墊高，這樣方便切開皮膚。
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立實驗
昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立可以：（1）建立一個能真實模擬臨床胃癌的理想動物模型；（2）深人研究胃癌的轉移機制和尋找新的治療方法；（3）為人胃癌轉移機理與抗轉移治療提供一個有價值的工具。皮下移植塊原位移植法實驗方法原理采用兩種不同的腫瘤細胞株分別在昆明小鼠胃部原位建立胃癌模型。造模后對原位移植瘤的
最新RNAi技術可媲美轉基因小鼠模型
基因編輯技術一直都是生命科學的熱門研究領域，近來編輯領域出現了可與轉基因小鼠技術相媲美的新RNAi干擾技術，該技術由洛克菲勒大學的研究人員研制出，在全基因組水平上首次對小鼠進行RNAi篩查研究，并在數月內發現了導致表皮腫瘤生長的基因，研究成果發表在《自然》期刊上。 RNAi技術篩查致病基因
人胰腺癌裸小鼠模型的建立實驗
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人胰腺癌裸小鼠模型的建立實驗
實驗方法原理 將人胰腺癌細胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養，HE 染色。 實驗材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌細胞株8988 試劑、
人胰腺癌裸小鼠模型的建立實驗
實驗方法原理 將人胰腺癌細胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養，HE 染色。實驗材料 裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌細胞株8988試劑、試劑盒 RPMI-1640 完全
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5/6腎切除致慢性腎衰小鼠模型的制備方法
慢性腎衰竭（chronicrenalfailure, CRF）是指各種腎臟病導致腎臟功能漸進性不可逆性減退，直至功能喪失所出現的一系列癥狀和代謝紊亂所組成的臨床綜合征，簡稱慢性腎衰。伴發心血管病變是CRF高死亡率的主要病因。慢性腎衰動物模型的建立有利于CRF的發病機理，組織形態的變化與生態指標及
我國科學家建立世界首例Tau轉基因猴模型
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509520.shtm
Protein－－Cell：農科院團隊建立新冠病毒小鼠感染模型
據中國農科院最新消息，該院哈爾濱獸醫研究所研究員步志高團隊研究建立了能同時在小鼠上呼吸道和下呼吸道穩定、有效復制的新冠病毒（COVID-19）感染模型。研究發現，自然情況下，小鼠對新冠病毒不易感，因而研發出對新冠病毒具有易感性的小鼠感染模型具有無可替代的價值，為深入探索新冠病毒的感染與免疫機制提
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生老病死是自然規律，人總會不可避免地衰老，并伴隨著健康狀況下降、能量穩態下降、脆弱性增加。眾所周知，人類整個生命過程中，染色體末端的端粒會隨著細胞分裂而不斷縮短，就像是生命的一個時鐘，當端粒縮短到一定程度，生命也就隨之停止。 就在幾天前，Nature Communications 期刊發表了一
大鼠癲癇模型的建立
[摘要]目的:用氯化鋰—匹魯卡品制備Wistar 大鼠癲癇模型,探討匹魯卡品合適的用量及用法。方法: Wistar 大鼠腹腔注射氯化鋰3mmol /kg , 24h 后,給予不同劑量的匹魯卡品腹腔注射。結果:40mg/ kg 組和30mg/ kg 一次注入組的持續性癲癇大發作(SE) 出現率和亡
振動篩的模型建立
振動篩篩箱模型建立 利用有限元分析ANSYS軟件建立篩箱的有限元模型，有兩種方法，一種是直接利用ANSYS軟件建立篩箱的實體模型，或在PRO/E軟件中建立實體模型然后導入到ANSYS中，這種方法要耗費較長的時間建模、計算，而且有可能計算不出理想結果；第二種方法是利用ANSYS軟件中的殼單元和板
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