單層細胞的胰蛋白酶處理
實驗方法原理 下述方案描述的是釆用胰蛋白酶處理細胞,進行細胞的傳代或收集。維持細胞系的方法通常為每周傳代一次,在傳代的前一天換培養液;但是某些細胞系需要更頻繁的傳代。每種細胞系應單獨傳代以免細胞系交叉污染。超凈工作臺內不能同時放置個以上細胞系。 實驗步驟 1) 吸干培養單層細胞的細胞培養瓶或培養皿中的培養液。2) 加入 0.05% 胰蛋白酶工作液(T-25 細胞培養瓶加入 1 ml;T-75 細胞培養瓶加入 3 ml)。無菌的 10x 或 1x 胰蛋白酶/EDTA 工作液可從 Life Technologies 購買或按照下列配方配制:胰蛋白酶 1x 工作液(0.05%)胰蛋白酶/EDTA 10x 儲存液 ......閱讀全文
溫胰蛋白酶解離組織
實驗方法原理組織切碎后于胰蛋白酶中攪拌數小時,每隔半小時收集已分離的細胞,離心后加入含血清的培養基。實驗材料組織DBSS粗制胰蛋白酶D-PBSA試劑、試劑盒生長培養基皮氏平皿儀器、耗材培養瓶離心管瓶子磁力攪拌機鑷子移液管血球計數儀實驗步驟1. 將組織(1~5 g)移入加有新配制的無菌 DBSS (5
血清胰蛋白酶簡介生化檢驗
血清胰蛋白酶雖然胰液中含有大量的胰蛋白酶,正常時卻很少進入血循環,健康人血清中存在的主要為游離胰蛋白酶原~1,沒有游離的胰蛋白酶。 急性胰腺炎時,血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可達參考值上限的2~400倍,兩種胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的類型及嚴重程度有關。輕型者80%~99%為游離胰蛋
冷胰蛋白酶解離組織
實驗方法原理 剪碎的組織放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后溫育并于溫培養基中分散細胞。實驗材料 組織DBSS粗制胰蛋白酶試劑、試劑盒 生長培養基皮氏平皿儀器、耗材 培養瓶鑷子移液管錐形瓶剪刀冰浴實驗步驟 1. 將組織(1~5 g,預先稱重)移入加有新配制的無菌 DBSS 的皮
冷胰蛋白酶解離組織
實驗方法原理剪碎的組織放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后溫育并于溫培養基中分散細胞。實驗材料組織DBSS粗制胰蛋白酶試劑、試劑盒生長培養基皮氏平皿儀器、耗材培養瓶鑷子移液管錐形瓶剪刀冰浴實驗步驟1. 將組織(1~5 g,預先稱重)移入加有新配制的無菌 DBSS 的皮氏培養皿中
α1抗胰蛋白酶介紹
α1-抗胰蛋白酶介紹:α1抗胰蛋白酶是一種糖蛋白。含糖10%~20%,主要由肝臟合成。它是血清中最主要的蛋白酶抑制劑,對凝血酶、尿激酶等其他酶也有抑制作用;也是一種急性時相反應蛋白,在炎癥性疾患時,α1抗胰蛋白酶可透過毛細血管進入組織液,在炎癥局部往往濃度很高,對急性炎性疾病有一定限制作用。 α1
溫胰蛋白酶解離組織
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 組織切碎后于胰蛋白酶中攪拌數小時,每隔半小時收集已分離的細胞,離心后加入含血清的培養基。 實驗材料 組織 DBSS
冷胰蛋白酶解離組織
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 剪碎的組織放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后溫育并于溫培養基中分散細胞。 實驗材料 組織 DBSS
溫胰蛋白酶解離組織
方案12.5 溫胰蛋白酶解離組織實驗方法原理組織切碎后于胰蛋白酶中攪拌數小時,每隔半小時收集已分離的細胞,離心后加入含血清的培養基。實驗材料組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DBSS ? ? ? ?
冷胰蛋白酶解離組織
經驗交流(0)實驗方法原理剪碎的組織放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后溫育并于溫培養基中分散細胞。實驗材料組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DBSS ? ? ? ? ? ?
EDTA胰蛋白酶的配制
問:請問哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多謝!答:1、胰酶是0.25%,這是質量體積比,就是說0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,盡量不要用水來溶,因為要保持滲透壓。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根據細胞消化的難易程度自己調整。EDTA并不是必須的,容易消
α1抗胰蛋白酶介紹
1、縮寫詞AAT 或 A1AT?2、定義α1-抗胰蛋白酶(Alpha-1 antitrypsin,AAT 或 A1AT)是測定AAT 或 A1AT在你血清中的含量。?3、如何完成這個實驗從靜脈抽血,常常從肘內側或手背部。穿刺部位用抗菌劑清潔。彈性帶放到上臂的上部增加壓力,引起靜脈的充盈。Blood
血清胰蛋白酶的測定意義
正常時胰蛋白酶很少進入血循環,健康人血清中存在的主要為游離胰蛋白酶原-1,沒有游離的胰蛋白酶。 急性胰腺炎時,血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可達參考值上限的2~400倍,兩種胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的類型及嚴重程度有關。 輕型者:80%~99%為游離胰蛋白酶原-1及極少的結合型的胰蛋
胰蛋白酶阻礙因子的性質
大豆中含有一種毒性物質,叫做胰蛋白酶阻礙因子(TI)。是在1944年發現的,一年后康尼茲( Kuntiz)成功地制成結晶。其性質概括如下:等電點為4.5,與球蛋白相似,相對分子質量21500,氨基酸殘基數為194,N末端是天冬氨酸,C末端是亮氨酸,含有兩個胱氨酸基而不含半胱氨酸基的鏈狀蛋白質。
關于胰蛋白酶的相關介紹
胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 為蛋白酶的一種,EC 3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶,它
關于α抗胰蛋白酶的介紹
α-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1AT或AAT),是具有蛋白酶抑制作用的一種急性時相反應蛋白,分子量為5.5萬,P1值4.8,含有10%-12%糖。在醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳中泳動于α1區帶,是這一區帶的主要組分。區帶中的另2個主要組分;α1-酸性糖蛋白含糖量特別高,α1-脂蛋白
關于胰蛋白酶的作用簡述
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時,胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2
胰蛋白酶的基本信息
中文名稱:胰蛋白酶中文同義詞:胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(豬胰臟);胰蛋白酶1:300(豬胰臟);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶類? ?英文名稱:Trypsin? ?英文同義詞:TRYPSIN;TRYPSIN, 1-250;TRYPSIN, 1-300;TRYP
胰蛋白酶的物化性質
胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取,純化獲得的結晶,再制成的凍干制劑。易溶于水,不溶于三氯甲烷、乙醇、乙醚等有機溶劑。在pH1.8時,短時間煮沸幾乎不失活;在堿溶液中加熱則變性沉淀,Ca2+有保護和激活作用,胰蛋白酶的等電點為pH10.1。牛胰蛋白酶原有229個氨基酸組成,含6對二硫鍵,其氨基酸排列順
胰蛋白酶原的基本信息
胰蛋白酶原trypsinogen胰蛋白酶原trypsinogen 為胰蛋白酶的前體。在胰臟中合成,存在于胰液里,分泌到十二指腸中,通過十二指腸粘膜中的腸激酶的作用,在6位賴氨酸和7位異亮氨酸之間切斷。從N端到第6位置之間的肽鏈(H-val-Asp4-Lys-OH)切斷時便出現活性(如牛)。這種激活作
胰蛋白酶的特點和來源
胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 為蛋白酶的一種,EC 3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶,它能把
胰蛋白酶的基本信息
中文名稱:? ?胰蛋白酶? ?中文同義詞:? ?胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(豬胰臟);胰蛋白酶1:300(豬胰臟);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶類? ?英文名稱:? ?Trypsin? ?英文同義詞:? ?TRYPSIN;TRYPSIN, 1-250;TRYP
胰蛋白酶的藥理作用
胰蛋白酶為肽鏈內切酶,對精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用,可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。由于血清中含有非特異性抑肽酶,故胰蛋白酶不會消化正常組織,而能分解黏痰、膿性痰等黏性分泌物,能促進抗生素、化療藥物向病灶滲透。
?胰蛋白酶原的基本信息
胰蛋白酶原trypsinogen 為胰蛋白酶的前體。在胰臟中合成,存在于胰液里,分泌到十二指腸中,通過十二指腸粘膜中的腸激酶的作用,在6位賴氨酸和7位異亮氨酸之間切斷。從N端到第6位置之間的肽鏈(H-val-Asp4-Lys-OH)切斷時便出現活性(如牛)。這種激活作用也可以通過胰蛋白酶的自我催化反
抗胰蛋白酶的作用機制
α1-AT具有較強的血管通透性,在肺組織中的濃度較其它絲氨酸蛋白酶抑制因子或α2-巨球蛋白的濃度高,而且對NE的專一性更強,因而它主要抑制肺臟中彈性蛋白酶的活性,保護肺部不受彈性蛋白酶的酶解損傷。α1-AT抑制蛋白酶的過程是一個自毀模式的反應過程,α1-AT除了被其捕獲的蛋白酶緩慢裂解外,同時α
血清胰蛋白酶的測定意義
正常時胰蛋白酶很少進入血循環,健康人血清中存在的主要為游離胰蛋白酶原-1,沒有游離的胰蛋白酶。急性胰腺炎時,血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可達參考值上限的2~400倍,兩種胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的類型及嚴重程度有關。輕型者:80%~99%為游離胰蛋白酶原-1及極少的結合型的胰蛋白酶-1。重
血清胰蛋白酶的測定意義
正常時胰蛋白酶很少進入血循環,健康人血清中存在的主要為游離胰蛋白酶原-1,沒有游離的胰蛋白酶。急性胰腺炎時,血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可達參考值上限的2~400倍,兩種胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的類型及嚴重程度有關。輕型者:80%~99%為游離胰蛋白酶原-1及極少的結合型的胰蛋白酶-1。重
胰蛋白酶用于細胞培養
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時,胰酶溶液的作用能力zui強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因 Ca2+ 、 M
胰蛋白酶及其系列酶制備
酶是細胞產生的以蛋白質為主要成分的生物催化劑,與化學催化劑相比較,具有作用條件溫和、反應專一性強、反應副產物少等優點,因而廣泛應用于醫藥、化工、食品、日化、農業、飼料、環保等領域,應用種類及用量均逐年遞增。例如蛋白酶,應用于醫藥工業中,作為生化藥物促進食物蛋白質消化;應用在食品工業中,水解蛋白質成膚
如何制作胰蛋白酶補充劑?
胰蛋白酶是一種消化酶,通常在藥店購買。不建議自行制作胰蛋白酶補充劑,因為這可能導致劑量不準確、不安全或效果不佳。
胰蛋白酶的制備要求
本品應從檢疫合格的豬、羊或牛胰中提取所用動物的種屬應明確,生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規范》的要求。本品為動物來源,工藝中應進行病毒的安全性控制。