MDCK細胞培養
本人具有數年的細胞培養經驗,期間經歷了無數次的失敗和成功,回想起來有苦也有甜,現在把中國疾病預防控制中心和我自己的經驗結合起來,制作成MDCK細胞培養SOP,歡迎大家參閱:一、目的MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員,必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員 。三、程序(一)生物安全要求實驗室生物安全級別:BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進行。(二)材料1. 生長成片的MDCK細胞2. 無菌的T25細胞培養瓶3. D-MEM培養液(含有L-谷氨酰胺)4. 青、鏈霉素母液(10000 U/mL青霉素G;10000μg/mL硫酸鏈霉素),分裝后保存于-20℃5. HEPES緩沖液,1M母液6. 胎牛血清7. EDTA-胰酶(0.05%胰酶,0.53mM EDTA-4Na),分裝后保存于-20℃8. 7.5%牛血清白蛋白組分V......閱讀全文
MDCK細胞培養
本人具有數年的細胞培養經驗,期間經歷了無數次的失敗和成功,回想起來有苦也有甜,現在把中國疾病預防控制中心和我自己的經驗結合起來,制作成MDCK細胞培養SOP,歡迎大家參閱:一、目的MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員,必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二
MDCK細胞培養所需材料和操作步驟
MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員,必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員 。三、程序(一)生物安全要求實驗室生物安全級別:BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進行。(二)材料1. 生長成片的MDCK
MDCK(NBL-2)細胞,正常,狗腎細胞
MDCK(NBL-2)細胞,正常,狗腎細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?直接
WAVETM 生物反應器中的 Cytodex? 微載體細胞培養工藝(二)
用于MDCK和 Vero細胞的生物反應器? WAVE? Bioreactor 系統由一個帶有一次性塑料細胞培養袋的搖動平臺組成,配備CO2 氣體混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD?控制塔用于控制pH、溫度、氧氣和混合。MDCK細胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50?
WAVETM 生物反應器中的 Cytodex? 微載體細胞培養工藝(一)
摘要 ??? WAVE? Bioreactor 系統多用于懸浮細胞的培養。然而,用于細胞治療和疫苗生產的多種細胞為貼壁依賴型的,需要一個可貼附的生長表面。在本研究中,Cytodex 微載體被應用在 CellbagTM 生物反應器中以擴增 Madine-Darby Canine Kidney
動物病毒毒力測定
實驗方法原理 溶細胞性病毒的毒力與其致細胞病變的能力直接相關,固可用不同含量的病毒液接種敏感的宿主細胞培養物測定毒力。實驗中病毒的毒力以其致細胞病變效應(cytopathic effect CPE)的程度確定,即觀察病毒致細胞病變的最高和最低量,以半數細胞病變為病毒感染劑量。然而,實驗中所能
WAVETM 生物反應器中的 Cytodex? 微載體細胞培養工藝(五)
MDCK細胞的生長和放大(2% FBS)???? 為了研究在 Cellbag 生物反應器中 MDCK細胞擴增的可放大性,在兩種不同大小的袋子之間比較最大細胞密度和細胞生長速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培養體積采用最大工作體積的40%(即Cellbag-1
動物病毒毒力測定實驗——TCID50 的測定方法
病毒感染能力測定是評估其毒力的常用方法之一,通常采用測定實驗動物的半數致死量(50% lethel dose,LD50)和測定細胞培養物的半數組織(細胞)培養物感染量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)來評估病毒的感染能力(毒力)。用細胞培養物測定病
生物工程中的無血清細胞培養
無血清培養基的出現是培養基發展歷程上的一個里程碑,其一般是在合成培養基的基礎上,引入成分完全明確的或部分明確的血清替代成分,使培養基能滿足動物細胞培養的要求,又可有效的克服因使用血清所引發的問題。進入20世紀80年代后,新的無血清培養基不斷問世,人們經過研究發現,只要在培養基中增加某些適于細胞生長的
WAVETM 生物反應器中的 Cytodex? 微載體細胞培養工藝(四)
微載體用量為3 g/l的 Cytodex3,接種細胞密度為0.3×106細胞/ml。培養條件為37℃,pH 7.3,5% CO2,采用光纖溶氧電極監測溶氧水平。培養基含有 2%? FBS。每小時取樣并用結晶紫染色測定總細胞密度,上清中的懸浮細胞和死細胞用臺盼藍染色。MDCK細胞在接種后1 h