病毒滴度的測定
稀釋計數法滴度單位:TU/ml,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒顆粒數。”TU”為”transducing units”的縮寫,中文為“轉導單位”,表示可以感染并進入到靶細胞中的病毒基因組數。第一天 細胞準備將生長狀態良好的293T細胞消化計數后稀釋至1×105/ml,加入96孔板,100μl/孔,為每個病毒準備10個孔。放入37℃,5%CO2培養箱中培養。第二天 加病毒在EP管中做10倍梯度稀釋,連續10個稀釋度。稀釋方法如下:每種病毒準備10個1.5ml EP管,每管加入90μl培養液,往第一個管中加入10μl病毒原液,混勻后,吸取10μl加入第二個管混勻。依此類推,做十個稀釋度(10~10-8)。吸取96孔板中原有的培養基,加入含稀釋好的病毒液。并做好標記。第三天 追加培養液在每個孔再加入100μl完全培養液,利于細胞的生長。第五天 觀察結果并計算滴度在熒光顯微鏡下觀察結果,并數出最后兩個有熒光的熒光細胞克隆數。假設為X......閱讀全文
病毒滴度的測定
稀釋計數法滴度單位:TU/ml,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒顆粒數。”TU”為”transducing units”的縮寫,中文為“轉導單位”,表示可以感染并進入到靶細胞中的病毒基因組數。第一天 細胞準備將生長狀態良好的293T細胞消化計數后稀釋至1×105/ml,加入96孔板,100μl/孔
病毒滴度的概念
也即病毒的毒力,或毒價,衡量病毒滴度的單位有最小致死量(MLD)、最小感染量(MID)和半數致死量(LD50),其中以LD50最常用。它是指在一定時間內能使半數實驗動物致死的病毒量。然而,病毒對實驗動物的致病作用不一定都以死亡為標志,例如以感染發病作指標,則可以半數感染量(ID50)測定;此外,當實
血凝試驗和干擾滴定測定病毒滴度
實驗方法原理?實驗材料?待檢的病毒標本試劑、試劑盒?0.85% 的無菌生理鹽水阿氏 (Alsever)液磷酸鹽緩沖液 (PBS) 紅細胞懸液儀器、耗材?96 孔微量血凝板滅菌注射器三角燒瓶離心管實驗步驟?1. 選擇適當的 96 孔微量血凝板,如果使用雞或火雞紅細胞,應選用 V 型微量血凝板;如果使用
血凝試驗和干擾滴定測定病毒滴度
實驗材料待檢的病毒標本試劑、試劑盒0.85% 的無菌生理鹽水阿氏 (Alsever)液磷酸鹽緩沖液 (PBS)紅細胞懸液儀器、耗材96 孔微量血凝板滅菌注射器三角燒瓶離心管實驗步驟1. 選擇適當的 96 孔微量血凝板,如果使用雞或火雞紅細胞,應選用 V 型微量血凝板;如果使用豚鼠或人"O"型紅細胞,
50%終點法測定病毒滴度實驗
實驗方法原理50% 終點 (50% endpoint) 法是將病毒懸浮液經一系列稀釋后,接種至動物、雞胚或培養成單層的細胞,將每個稀釋度造成的動物、雞胚致死量或細胞病變做成曲線,找出造成 50% 動物、雞胚死亡或細胞病變的終點稀釋度。 LD50 (50 % Lethal dose) 為造成 50%動
50%終點法測定病毒滴度實驗
實驗方法原理 實驗材料?病毒試劑、試劑盒?含 2%小牛血清的 Eagle's 維持液儀器、耗材?細胞培養箱、細胞培養板實驗步驟 1. 制備細胞 先制備好單層細胞培養物,在低倍顯微鏡下觀察,挑選生長良好的細胞,按「傳代細胞培養」法進行,將細胞單層洗滌、消化、計數。配制所需濃度的細胞懸液
痘苗病毒儲液制備——噬斑分析測定滴度
實驗方法原理經胰酶作用的系列稀釋病毒儲液常被用于感染適當的細胞系。經過幾天的培養后,吸出培養基,將細胞用結晶紫染色。由于感染細胞變縮、變圓和脫落,形成直徑 1~2 mm 顏色較淡的噬斑。實驗材料生長良好的貼壁培養的單層 BSC-1 細胞病毒儲液試劑、試劑盒0.1% 結晶紫(溶于 20% 乙醇)儀器、
慢病毒行業新標準——絕對定量滴度測定
絕對定量時代——引領慢病毒行業新標準 高大上的慢病毒是怎樣煉成的(一) 慢病毒活性滴度用什么單位? 看TU!看TU!看TU! TU=transducing units,即每毫升中含有的具有生物活性的病毒顆粒數。其他的VG/mL,VP/mL都是所有病毒顆粒數,死的活的都算上
桿狀病毒滴度檢測
實驗概要本實驗介紹了檢測病毒滴度的方法。實驗原理根據噬菌斑數計算病毒滴度。主要試劑1. 4% agarose gel:2g agrose ? 50ml 水,高壓滅菌2. 2×Grace(unsupplemented):9.14g粉末(invitrogen) 0.07gNaHCO3 H2O,調PH6.
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗
實驗方法原理 空斑形成單位 (plaque forming units, PFUs)試驗,是將不同稀釋倍數的動物病毒與平鋪于平板表面的宿主細胞混合,當病毒顆粒在一大片宿主細胞上引發感染時,會造成細胞被溶解而形成空斑,每個空斑系由一個病毒顆粒所造成,計算空斑數目再乘以稀釋倍數,即可得知原來的病毒感
絕對定量滴度測定
慢病毒活性滴度用什么單位?看TU!看TU!看TU!TU=transducing units,即每毫升中含有的具有生物活性的病毒顆粒數。其他的VG/mL,VP/mL都是所有病毒顆粒數,死的活的都算上,一片虛假繁榮,請自由玩兒去!慢病毒活性滴度怎么標定最準?絕對定量!絕對定量!絕對定量!又絕對又定量的方
反轉錄病毒產毒細胞系建立實驗——測定病毒滴度
實驗材料病毒原液試劑、試劑盒G418儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1. ?感染的前1天按1:10至1:20將靶細胞NIH 3T3分傳于6 cm 培養皿中。?2. ?進行感染的當天,移去靶細胞的培養液,加入含有病毒原液的培養液。用1~2 ml 含 有0.01 μl~0.1 ml 病毒原液的培養液感染6
桿狀病毒儲液制備實驗——噬斑試驗測定滴度
實驗材料對數生長期單層培養的 Sf 9 細胞試劑、試劑盒桿狀病毒儲液昆蟲細胞培養液儀器、耗材瓊脂糖頂層覆蓋物臺盼藍頂層覆蓋物(選用)60 mm 組織培養皿27℃ 培養箱1.5 ml 帶螺口蓋的凍存管實驗步驟1. 用含 10% 胎牛血清的 TNM-FH 培養液稀釋處于對數生長期的 Sf 9 細胞至約
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗4
在細胞培養板內做病毒空斑形成單位試驗實驗材料病毒試劑、試劑盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle儀器、耗材細胞培養板實驗步驟(1) 用細胞培養板 (6孔),若用舊板,洗凈后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外線照射 2-4 h備用,新板可直接使用。(2) 將傳代細胞系經胰酶消化分散后
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗3
用傳代細胞系平皿法測量病毒空斑形成單位實驗材料病毒細胞系試劑、試劑盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培養液儀器、耗材培養皿實驗步驟(1) 將單層細胞 (2X 106/ml, 6 ml)培養在直徑 60 mm 的平皿上,生長液為含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培養液,加
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗2
蟲媒病毒在雞胚成纖維細胞中的空斑形成單位試驗實驗方法原理病毒常殺死被病毒感染的細胞?即產生致細胞病變作用。用只染活細胞(如中性紅)或只染死細胞(如臺盼蘭)的染料對單層細胞染色以檢測空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT)?進行染色,使用?MTT?的優點是黃色的?MTT?能將活細胞染成深藍色
噬菌體滴度的測定的方法
在宿主細胞過量的情況下,噬斑的數量隨著噬菌體的增加呈線性增加。由于這個原因,在感染以前,要將噬菌體進行稀釋,而不是將宿主細胞稀釋。以低MOI(感染重復性)鋪板,也可確保每一個噬斑僅包含一個DNA 序列。材料和試劑1. 微波爐2. LB/IPTG/Xgal培養 板3. lb培養基4. 頂層瓊脂糖凝膠操
噬菌體滴度的測定的方法
在宿主細胞過量的情況下,噬斑的數量隨著噬菌體的增加呈線性增加。由于這個原因,在感染以前,要將噬菌體進行稀釋,而不是將宿主細胞稀釋。以低MOI(感染重復性)鋪板,也可確保每一個噬斑僅包含一個DNA 序列。材料和試劑1. 微波爐2. LB/IPTG/Xgal培養 板3. lb培養基4. 頂層瓊脂糖凝膠操
MVA-病毒儲液制備實驗——免疫染色法滴度測定
實驗方法原理MVA 病毒滴度通常是用免疫染色法進行測定,因為 MVA 不能在 CEF 或 BHK-21 細胞中形成噬斑。實驗材料CEF 或 BHK-21 細胞MVA病毒儲液試劑、試劑盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基1:1 丙酮/甲醇PBS(含和不含3% FBS兩種)PBS/H2O2兔抗
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗_蝕斑試驗法
實驗方法原理空斑形成單位 (plaque forming units, PFUs)試驗,是將不同稀釋倍數的動物病毒與平鋪于平板表面的宿主細胞混合,當病毒顆粒在一大片宿主細胞上引發感染時,會造成細胞被溶解而形成空斑,每個空斑系由一個病毒顆粒所造成,計算空斑數目再乘以稀釋倍數,即可得知原來的病毒感染單位
pfu及噬菌體滴度測定方法
pfu指的是噬菌體的空斑形成單位。以下是關于測定M13效價的一個方法:測定噬菌體滴度只有當噬菌體的感染復度MOI (multiplicity of infection)值遠低于1時(即細胞過量時),噬菌斑的數量才會隨著加入噬菌體的量而呈線性增加。正因如此,建議檢測噬菌體貯液的滴度時,在感染前進行
滴度的概念
滴度,是一種表述濃度的用詞,通常在化學,病理學和免疫學中使用。滴度是稀釋度的倒數。病毒滴度即病毒懸液的濃度,又稱病毒的效價,噬菌斑形成單位數或感染中心數,就是指pfu的數值。
進口胎牛血清對細胞及病毒滴度的影響
進口胎牛血清是妊娠后期未出生的剖腹取胎牛的血清。胎牛血清營養成分完全而豐富,代謝產物極少,微生物感染的可能性zui小,品質zui高,是組織細胞培養和病毒增殖培養的重要營養來源。 血清是一種成分復雜的混合物,不同批次血清對細胞生長的促進作用不同大規模細胞培養中由血清引起的細胞生長狀態不佳及病毒滴
梅毒滴度的概念
? 梅毒滴度的概念是:梅毒滴度是梅毒血清血檢查是檢查血清中抗體的點子,滴度的高低就是反應患者血清中抗體的多少。 梅毒滴度患者是唯一的傳染源。性接觸傳染占95%。關鍵通過性交由破損處傳染,梅毒滴度螺旋體好多存在于皮膚粘膜傷害外貌,也見于唾液、乳汁、精液、尿液中。未經治療的患者在勸化梅毒滴度一年內最具
抗體滴度定義
打個比方,通過間接庫姆伯斯試驗(indirect Coombs test)檢測一個孕婦血清中anti-Rh 抗體。一個患者可能報告通過此試驗檢出的抗體滴度為16,這表示只要血清的稀釋度不超過1/16(1份比例的血清和15份比例的稀釋液),此試驗都能得到陽性結果,即可識別出抗原。如果稀釋度超過1/
養多細胞皿數會提高慢病毒滴度嗎
上清液滴度是一樣的,因為你養的皿數多了,培養基體積也相應的增加了,如果濃縮的話肯定對滴度提高是有幫助的。ps:慢病毒滴度主要與細胞狀態、質粒質量、轉染效率相關性比較大,在這三個因素都比較好的情況下提高皿數更有利于滴度的提高。如果本身出毒量比較低,只是提高皿數成本比較高。
慢病毒包裝試劑盒包出病毒的滴度一般是多少
過表達慢病毒>10^8 PFU/ml干擾慢病毒>10^8 PFU/ml
什么是抗體滴度
抗體滴度用來衡量某種抗體(antibody)識別特定抗原決定部位(epitope)所需要的最低濃度(也即最大稀釋度)。一般表示為:仍能產生陽性結果的最大稀釋度。通常通過ELISA方法來檢測抗體滴度。
關于乙肝抗體滴度的簡介
乙肝抗體指的是乙肝保護性抗體,即乙肝表面抗體,而乙肝抗體滴度指的是乙肝表面抗體的濃度。當乙肝表面抗體濃度達到一定程度時才能夠更有效的保護人體免受乙肝病毒的入侵。
乙肝抗體滴度的產生途徑介紹
產生乙肝表面抗體一般有兩種途徑: 1、曾經感染的乙肝病毒,但是由于自身的免疫功能強大,消滅了乙型肝炎病毒并且產生了乙肝表面抗體。 2、注射乙肝疫苗后產生的。所以在打完乙肝疫苗后檢查乙肝抗體滴度主要是看其濃度,乙肝抗體滴度的值越大,那就說明患者抵御乙肝病毒的能力越強。