瓊脂糖凝膠電泳遷移速率的影響因素
1、DNA的分子大小及構型 不同構型DNA的移動速度次序為：供價閉環DNA（covalently closed circular，cccDNA）>直線DNA>開環的雙鏈環狀DNA。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難于在凝膠孔隙中蠕行，因而遷移得越慢。當瓊脂糖濃度太高時，環狀DNA（一般為球形）不能進入膠中，相對遷移率為0（Rm=0），而同等大小的直線雙鏈DNA（剛性棒狀）則可以長軸方向前進（Rm>0），由此可見，這三種構型的相對遷移率主要取決于凝膠濃度。2、瓊脂糖濃度一個給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率的對數與凝膠濃度成線性關系。凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小。分離小于0.5kb的DNA段所需膠濃度是1.2-1.5%,分離大于10kb的DNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%......閱讀全文
瓊脂糖凝膠電泳實驗——瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳可應用于：（1）DNA切膠回收；（2）DNA分離；（3）佐證DNA是否重組，質粒等是否切開以及其他分子生物學研究。實驗方法原理用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻
瓊脂糖凝膠配方
瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾后熔點降低的低熔點瓊脂 糖，瓊脂糖的熔點在62?65°C之間，融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。多用于對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質、DNA的
瓊脂糖凝膠怎么配制
把瓊脂糖，即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂，溶于熱水，倒入玻璃杯中，冷卻制成的凝膠。融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。制成的小顆粒用于凝膠過濾，適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾，若使用5%以下濃度的凝膠，也能夠分級分離細胞顆粒、
瓊脂糖凝膠怎么配制
把瓊脂糖，即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂，溶于熱水，倒入玻璃杯中，冷卻制成的凝膠。融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。制成的小顆粒用于凝膠過濾，適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾，若使用5%以下濃度的凝膠，也能夠分級分離細胞顆粒、
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳可以用于：（1）檢測PCR結果；（2）分離不同大小的DNA條帶。實驗方法原理瓊脂糖是 D- 和 L- 半乳糖殘基通過 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L- 半乳糖殘基在 3 和 6 位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維，后者再聚合成半徑 20~30 n
瓊脂糖凝膠電泳
在凝膠電泳中，首先應用的是瓊脂電泳，它具有下列優點：（1）瓊脂含液體量 大，可達98-99%，近似自由電泳，但是樣品的擴散度比自由電泳小，對蛋白質的吸附 極微。（2）瓊脂作為支持體有均勻，區帶整齊，分辨率高，重復性好等優點。（3） 電泳速度快。（4）透明而不吸收紫外線，可以直接用紫外檢測儀作定量測定
瓊脂糖凝膠的特點
天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳1.??????用封邊帶封住塑料托盤開放的兩邊或清潔干燥的玻璃板的邊緣形成一個模具，置一個水平支架上。2.??????配制足量的電泳緩沖液（1×TAE或0.5×TBE）用以灌滿電泳槽和配制凝膠。?配膠和灌滿電泳槽使用同一批緩沖液。3.??????根據欲分離DNA片段大小用電泳緩沖液配制
瓊脂糖凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 瓊脂糖是 D- 和 L- 半乳糖殘基通過 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L- 半乳糖殘基在 3 和 6 位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維，后者再聚合成半徑 20~30 nm 的超螺旋結構。
瓊脂糖凝膠的配制
稱量、溶膠、倒膠、拔梳。配置步驟如下：1、稱量，小膠板0.8%的膠需要瓊脂粉0.104gTBE13mL。2、熔膠，將所稱量的瓊脂粉與TBE在錐形瓶中混合，在微波爐內反復加熱2到3次至瓊脂粉溶解并無氣泡。3、倒膠，干凈的膠槽內擺好梳子，往膠內滴加1uL左右核酸染料，混勻，待冷卻至不燙手，輕輕倒入膠板內
什么是瓊脂糖凝膠？
瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾后熔點降低的低熔點瓊脂 糖，瓊脂糖的熔點在62?65°C之間，融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。多用于對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質、DN
瓊脂糖凝膠的制備
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫
瓊脂糖凝膠怎么配制
把瓊脂糖，即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂，溶于熱水，倒入玻璃杯中，冷卻制成的凝膠。融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。制成的小顆粒用于凝膠過濾，適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾，若使用5%以下濃度的凝膠，也能夠分級分離細胞顆粒、
瓊脂糖凝膠的簡介
瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾后熔點降低的低熔點瓊脂 糖，瓊脂糖的熔點在62?65°C之間，融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。多用于對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質、DN
瓊脂糖凝膠電泳
學習瓊脂糖凝膠電泳的基本原理； （2） 掌握使用水平式電泳儀的方法； （3）掌握核酸瓊脂糖凝膠電泳的基本操作 2實驗原理 瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量，而且還取決于分子大小
瓊脂糖凝膠電泳
實驗方法原理 瓊脂糖是 D- 和 L- 半乳糖殘基通過 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L- 半乳糖殘基在 3 和 6 位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維，后者再聚合成半徑 20~30 nm 的超螺旋結構。實驗材料 DNA 樣品DNA 大小標準品試劑、試劑盒 瓊脂
瓊脂糖凝膠的制備
一、瓊脂糖凝膠的瓊脂糖凝膠的制備特點?天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現
瓊脂糖凝膠怎么配制
把瓊脂糖，即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂，溶于熱水，倒入玻璃杯中，冷卻制成的凝膠。融化后在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。制成的小顆粒用于凝膠過濾，適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾，若使用5%以下濃度的凝膠，也能夠分級分離細胞顆粒、
瓊脂糖凝膠的制備
]瓊脂糖凝膠的制備1、 取5×TBE 緩沖液20ml 加水至200ml,配制成0.5×TBE 稀釋緩沖液,待用。2、 膠液的制備：稱取0.4g 瓊脂糖,置于200ml 錐形瓶中,加入50ml 0.5×TBE 稀釋緩沖液,放入微波爐里(或電爐上)加熱至瓊脂糖全部熔化,取出搖勻,此為0.8％瓊脂糖凝膠液
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的，是由D-半乳糖和3、6-脫水-L-半乳糖結合的鏈狀多糖，含硫酸根比瓊脂少，因而分離效果明顯提高。瓊脂糖電泳具有以下優點：①瓊脂糖含液體量大，可達98％～99％，近似自由電泳，但樣品的擴散度比自由電泳小，對蛋白質的吸附極微；⑦瓊脂糖作為支持體有分辨率高、重復性好等優點；③電
瓊脂糖凝膠的配制
稱量、溶膠、倒膠、拔梳。配置步驟如下：1、稱量，小膠板0.8%的膠需要瓊脂粉0.104gTBE13mL。2、熔膠，將所稱量的瓊脂粉與TBE在錐形瓶中混合，在微波爐內反復加熱2到3次至瓊脂粉溶解并無氣泡。3、倒膠，干凈的膠槽內擺好梳子，往膠內滴加1uL左右核酸染料，混勻，待冷卻至不燙手，輕輕倒入膠板內
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠：
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠：
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
?瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠：
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。 一、高純度
瓊脂糖凝膠電泳實驗
實驗方法原理 用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量，而且還取決于分子大小，這就大
瓊脂糖凝膠電泳實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分
簡述瓊脂糖的凝膠性能
瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強度表示。強度越高,凝膠性能越好。質量較好的瓊脂糖強度通常在1200克/cm2以上（1%膠濃度）。瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致,凡是能破壞氫鍵的
瓊脂糖凝膠的基本結構
瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網狀結構，網狀結構的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下，它的結構是穩定的，可以在許多條件下使用（如水，pH4-9范圍內的鹽溶液）。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化，也不能高壓消毒，可用化學滅菌活處理。瓊脂糖 Agarose，縮寫為AG，是瓊脂中不帶電荷的中性組