毛細管等電聚焦電泳儀簡介
毛細管等電聚焦電泳儀(CIEF)是根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、分離機理:毛細管內充有兩性電解質載體(合成的具有不同等電點范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物),陽極端裝稀H3PO4溶液,陰極端裝稀NaOH溶液。當施加直流電壓(6~8V)時,管內將建立一個由陽極到陰極逐步升高的pH梯度。在電場作用下,蛋白質在此pH梯度中泳動,當遷移至pH值等于pI處時不再泳動,而被濃縮成狹窄的區帶。CIEF是在毛細管中進行等電聚焦,關鍵是減小電滲流,找到使分離區帶遷移的辦法。運行步驟包括進樣、聚焦和遷移等。二、特點:1、具有極高的分辨率,可分離ΔpI<0.01pH單位的兩種蛋白質。2、由載體兩性電解質作為載體。三、應用:1、可用于分離不同等電點的兩性大分子,尤其在分離蛋白質方面顯示了較大的優越性。2、除用于測定pI外,還可用于分離其它方法無法分離的蛋白質,如免疫球蛋白、血紅蛋白、血清轉鐵蛋白和低濃度生物樣品。......閱讀全文
毛細管等電聚焦電泳儀簡介
毛細管等電聚焦電泳儀(CIEF)是根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、分離機理:毛細管內充有兩性電解質載體(合成的具有不同等電點范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物),陽極端裝稀H3PO4溶液,陰極端裝稀NaOH溶液。當施加直流電壓(6~8V)時,管內將建立一個由陽極到陰極逐步升高的pH梯
全柱成像毛細管等電聚焦電泳儀
全柱成像毛細管等電聚焦電泳儀是一種用于農學領域的分析儀器,于2016年4月12日啟用。 技術指標 檢測分離技術: 不同于傳統的單點檢測等電聚焦技術,無需蛋白的移動,保持蛋白高分離度和高重復性,采用CMOS成像技術,全柱成像檢測,可以動態監測聚焦過程和變化,快速得到等電聚焦實驗結果(10分鐘之
全柱成像毛細管等電聚焦電泳儀
全柱成像毛細管等電聚焦電泳儀是一種用于農學領域的分析儀器,于2016年4月12日啟用。 技術指標 檢測分離技術: 不同于傳統的單點檢測等電聚焦技術,無需蛋白的移動,保持蛋白高分離度和高重復性,采用CMOS成像技術,全柱成像檢測,可以動態監測聚焦過程和變化,快速得到等電聚焦實驗結果(10分鐘之
毛細管等電聚焦電泳儀分離譜帶的移動方法
毛細管等電聚焦電泳儀是以載體兩性電解質為介質,不同等電點的分子分別聚集在不同的位置上不作遷移,形成電泳譜帶而彼此分離。聚焦后分離譜帶的移動方法有正極移動、負極移動和壓力移動等。一、正極移動:??????? 在正極加電解質如NaCl,使聚焦后分離的譜帶向該極移動。二、負極移動:??????? 在負極加
毛細管等電聚焦的概念
中文名稱毛細管等電聚焦英文名稱capillary isoelectric focusing;CIEF定 義在毛細管內進行的等電聚焦。毛細管內壁經涂層處理使電滲流減到最小,再將樣品和兩性電解質混合進樣,兩個電極槽中分別為酸和堿,加高電壓后,在毛細管內產生pH梯度,樣品的各成分在毛細管中遷移至各自的等
毛細管電泳芯片等電聚焦分離
芯片等電聚焦分離芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3
毛細管等電聚焦的定義和應用特點
中文名稱毛細管等電聚焦英文名稱capillary isoelectric focusing;CIEF定 義在毛細管內進行的等電聚焦。毛細管內壁經涂層處理使電滲流減到最小,再將樣品和兩性電解質混合進樣,兩個電極槽中分別為酸和堿,加高電壓后,在毛細管內產生pH梯度,樣品的各成分在毛細管中遷移至各自的等
AES毛細管等電聚焦電泳耗材試劑上線
毛細管等電聚焦電泳(以下簡稱:CIEF )是一種簡便、快速、高效的分離分析方法, 特別適用于氨基酸、多肽、蛋白質、酶類和抗體等的 分離分析, 能夠滿足組分定量、雜質檢出、質量控制、 臨床診斷等方面的要求。 CIEF 是目前處理蛋白質分辨率最高的 CE 技 術之一。隨著研究工作的不斷深入, CI
固相pH梯度等電聚焦實驗——等電聚焦
試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液過硫酸銨貯液實驗步驟打開循環水浴,設置冷卻溫度,一般為 10℃。將制好的固相 pH 梯度凝膠鋪在冷卻板上,注意正負極。其間涂以液體石蠟或煤油,避免氣泡陷入,以保證膠板和冷卻板之間的良好接觸。用合適的電極溶液(參見表 7.7) 潤濕濾紙電極條,分別放置凝膠的酸、堿側。有的儀
毛細管等電聚焦電泳色譜儀分析技術
毛細管等電聚焦電泳色譜儀(CIEF)是以載體兩性電解質為介質,根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、載體兩性電解質應具備的條件:載體兩性電解質是兩性分子,使其在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可作為載體,但兩性電解質不能用于等電聚焦。只有載體兩性電解質,即具有好的電導和緩沖
等電點聚焦電泳
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
芯片等電聚焦分離
芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚物芯片,
什么是等電聚焦?
等電聚焦是一個物理學名詞。等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上。
等電聚焦(isoelectric-focusing)
等電點聚焦就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦于與其等電點相當的pH位置上,電聚焦的優點是:有很高的分辨率,可將等電點相差0.01-0.02pH單位的蛋白質分開;一般電泳由于受擴散作用的
高效毛細管等電聚焦電泳色譜儀分析技術
高效毛細管等電聚焦電泳色譜儀(CIEF)是以載體兩性電解質為介質,根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、載體兩性電解質應具備的條件:??????? 載體兩性電解質是兩性分子,使其在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可作為載體,但兩性電解質不能用于等電聚焦。只有載體兩性電解質,即
毛細管電泳法的芯片等電聚焦分離系統介紹
芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同,都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。 Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚
等電聚焦注意事項
1.等電聚焦后可用一根染色的細線(0.1mm)標出染料前沿的位置; 2.不同品牌的載體兩性電解質性質上有細微的差別,使用不同來源的載體兩性電解質凝膠時候蛋白質分離樣式略有差異,若要獲得最好的重復性一般不要更換載體兩性電解質的品牌; 3.通常,窄范圍的pH梯度可以提高分辨率,但是需要時間也比較
載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳儀特點
載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同,在一個穩定的、連續的、線性或非線性的pH梯度中進行分離,具有以下特點:一、優點:1、分辨率高,區帶清晰、窄。2、加樣部位自由,重現性好。3、可測定蛋白和多肽的等電點。二、缺點:1、載體兩性電解質合成過程復雜,影響蛋白質點
載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳儀介紹
載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同,在一個穩定的、連續的、線性或非線性的pH梯度中進行分離。一、載體兩性電解質的概念:載體兩性電解質是兩性的,使它們在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可以作為載體。兩性電解質不能用于等電聚焦,只有載體兩性電解質,即
等電聚焦電泳的技術特點
是將兩性電解質加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當其處在低于其本身等電點的環境中則帶正電荷,向負極移動;若其處在高于其本身等電點的環境中,則帶負電向正極移動。當泳動到其自身特有的等電點時,其凈電荷為零,泳動速度下降到零,具有不同等電點的物質最后聚焦在各自等電點位置,形成一個個清晰的區帶,分辨率極高。
等電聚焦電泳的梯度組成
pH梯度的組成方式有二種,一種是人工pH梯度,由于其不穩定,重復性差,現已不再使用。另一種是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或電泳管正負極間引入等電點彼此接近的一系列兩性電解質的混合物,在正極端引入酸液,如硫酸、磷酸或醋酸等,在負極端引入堿液,如氫氧化鈉、氨水等。電泳開始前兩性電解質的
等電點聚焦電泳的定義
中文名稱等電點聚焦電泳英文名稱isoelectric focusing electrophoresis定 義一種根據蛋白質等電點不同而將蛋白質在凝膠介質中分離的電泳方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
等電聚焦凝膠電泳原理
等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在電場中移
毛細管電泳儀簡介
毛細管電泳(capillary electrophoresis,CE)是20世紀80年代初發展起來的一種新型分離分析技術,乃經典電泳技術和現代微柱分離有機結合的產物,是繼gao效液相色譜(HPLC)之后,分析科學領域的又一次革命。 毛細管電泳泛指以高壓電場為驅動力,以毛細管為分離通道,依據樣品
毛細管電泳儀簡介
毛細管電泳(capillary electrophoresis,CE)又稱高效毛細管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅動力的新型液相分離技術。實際上包含電泳、色譜及其交叉內容,它使分
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦(Isoelectric focusing,簡稱 IEF)是六十年代中期出現的新技術。近年來等電聚焦技術有了新的進展,已迅速發展成為一門成熟的近代生化實驗技術。目前等電聚焦技術已可以分辨等電點(pI)只差 0.001pH 單位的生物分子。由于其分辨力高,重復性好,樣品容量大,操作簡便迅速,在
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小于其等電點的 pH 環境中解離成帶正由荷的陽離子,向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的 pH 環境中,即蛋白質所帶的凈電荷為零時才能停止。如果在一個
載體兩性電解質pH梯度等電聚焦實驗—薄層分析等電聚焦
實驗方法原理利用蛋白質分子或其他兩性分子的等電點的不同,在一個穩定的、連續的、線性 pH 梯度中進行蛋白質的分離和分析。所以利用等電聚焦技術分析的對象只限于蛋白質和兩性分子。分析的條件是凝膠中有穩定的、連續的和線性的 pH 梯度。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液過硫酸銨貯液儀器、耗材注射器水浴實驗步驟一
毛細管等電聚焦電泳色譜儀分離蛋白質的原理
蛋白質是一種兩性電解質分子,當它在大于其等電點的pH環境中時,會解離成帶負電的離子,在電場中向正極泳動;當它在小于其等電點的pH環境中時,會解離成帶正電荷的離子,在電場中向負極泳動。這種泳動作用到達它的等電點的pH環境中,即它的凈電荷為零時才會停止,此時蛋白質在電場作用下的遷移運動與擴散運動達到平衡