SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理： SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部分相結合，破壞其折疊結構，并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣品介質和凝膠中加入強還原劑和去污劑后，電荷因素可被忽略。蛋白亞基的遷移率取決于亞基分子量。 二. 試劑和器材： 試劑：1. 5x樣品緩沖液（10ml）：0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8)，5ml 50％甘油，2ml 10％的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1％溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。 2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯酰胺0.8g，加重蒸水溶解后，定容到100ml。過濾后置棕色瓶中，4℃保存，一般可放置1個月。 3. pH8.9分離膠緩沖液： ......閱讀全文
凝膠色譜柱
凝膠色譜柱:由于凝膠色譜柱是根據被分離物質的分子量大小而分離物質,通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑(0.2%-1%NP-40或Lubrol)沖洗可除去大部分的結合物質,如果一些污染物仍然不能清除時,用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去親水蛋白,用蛋白水解酶處理可分
凝膠過濾色譜
根據分離的對象是水溶性的化合物還是有機溶劑可溶物，又可分為凝膠過濾色譜（GFC）和凝膠滲透色譜（GPC）。凝膠過濾色譜凝膠過濾色譜一般用于分離水溶性的大分子，如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列，洗脫溶劑主要是水。
凝膠過濾實驗
實驗步驟 操作 采用分子篩層析獲得的洗脫圖譜如圖 23.1 A 所 75。零 洗 脫 體 積 (zero elution volu m e ) 是指上樣于層析固定相的樣品體積。無法進入介質的分子的洗脫體積定義為無效體 積 V
凝膠色譜講義
第一章? 前言一、高聚物及多糖平均分子量及其分布1、高聚物的平均分子量除天然聚合物外，合成聚合物都是以單體為原料經過聚合反應而制得的。每個聚合物分子都是由數目很大的單體分子加成或縮合而成，所以合成聚合物的分子量比單體要大千百倍甚至成萬倍。另一方面，根據絕大多數的聚合反應機理預示，生成的聚合物的分子量
凝膠的制備
凝膠的制備商品凝膠是干燥的顆粒使用前需直接在欲使用的洗脫液中膨脹。為了加速膨脹，可用加熱法，即在沸水浴中將濕凝膠逐漸升溫至近沸，這樣可大大中速膨脹，通常在1-2小時內即可完成。特別是在使用軟膠時， 自然膨脹需24小時至數天，而用加熱法在幾小時內就可完成。這種方法不但節約時間，而且還可消毒，除去凝膠中
凝膠過濾實驗
操作采用分子篩層析獲得的洗脫圖譜如圖 23.1 A 所 75。零 洗 脫 體 積 (zero elution volu m e ) 是指上樣于層析固定相的樣品體積。無法進入介質的分子的洗脫體積定義為無效體 積 V 。，它表示顆粒外部的體積。可以進人介質的分子的體積定義為總體積％, 它表示
凝膠的選擇
凝膠的選擇根據所需凝膠體積，估計所需干膠的量。 一般葡聚糖凝膠吸水后的凝膠體積約為其吸水量的2倍，例如Sephadex G-20的吸水量為20，1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝膠體積約40ml。凝膠的粒度也可影響層析分離效果。粒度細胞分離效果好，但阻力大，流速慢。一般實驗室分離蛋白質
如何制作凝膠
原料列表： 1、 高分子膠 ------------------------------- 0.5g(1/2匙) 1g-6.00元 2、 純水或蒸餾水 --------------------------- 83ml 自備-0.00元 缺 貨 3、 三乙醇胺 -------------
凝膠選擇指導
Invitrogen提供了大量的涵蓋面廣的蛋白分離預制膠，包括不同的成分，百分比濃度和格式。使用合適的膠百分比濃度，緩沖系統，上樣孔格式以及膠的厚度，對于獲得最好的結果非常重要。以下提供了幫助你選擇適合你應用的正確凝膠的信息。E-PAGE? 96 High-Throughput System是整合的
凝膠滲透色譜
凝膠滲透色譜?定義：凝膠滲透色譜(Gel Permeation Chromatography、GPC)是1964年，由J.C.Moore首先研究成功。不僅可用于小分子物質的分離和鑒定，而且可以用來分析化學性質相同分子體積不同的高分子同系物。(聚合物在分離柱上按分子流體力學體積大小被分離開)原理：1、
如何制作凝膠
原料列表： 1、 高分子膠 ------------------------------- 0.5g(1/2匙) 1g-6.00元 2、 純水或蒸餾水 --------------------------- 83ml 自備-0.00元 缺 貨 3、 三乙醇胺 -------------
凝膠色譜（圖）
原理： 以多孔性物質作固定相，樣品分子受固定相孔徑大小的影響而達到分離的一種液相色譜分離模式。樣品分子與固定相之間不存在相互作用力（吸附、分配和離子交換等），因而凝膠色譜又常被稱作體積排斥色譜、空間排阻色譜、分子篩色譜等。比固定相孔徑大的溶質分子不能進入孔內，迅速流出色譜柱
凝膠色譜（圖）
原理：?以多孔性物質作固定相，樣品分子受固定相孔徑大小的影響而達到分離的一種液相色譜分離模式。樣品分子與固定相之間不存在相互作用力（吸附、分配和離子交換等），因而凝膠色譜又常被稱作體積排斥色譜、空間排阻色譜、分子篩色譜等。比固定相孔徑大的溶質分子不能進入孔內，迅速流出色譜柱，不能被分離。比固定相孔徑
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。 一、高純度瓊脂糖
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠：
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。 一、高純度
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠：
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠種類
?瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束，而形成大網孔型凝膠。一、高純度瓊脂糖凝膠
凝膠過濾層析常用支持物和凝膠介紹
支持物是人工合成的交聯高聚物，在水中膨脹后成為凝膠。凝膠內為內水層，凝膠周圍的水為外水層。控制交聯度以形成不同孔徑的網狀結構。交聯度小的孔徑大，交聯度大的孔徑小。凝膠只允許被分離物質中小于孔徑的分子進入，大于孔徑的分子被排斥在外水層，最先被洗脫下來。而進入孔徑的分子也按分子量大小大致分離成不同的區帶
蛋白質凝膠電泳凝膠的制備方法
【材料與試劑】（1）30%的丙烯酰胺：分別稱取29g 丙烯酰胺，1g N,N -亞甲雙丙烯酰胺加溫熱的去離子水60ml，加熱至37℃溶解，補加水至終體積為100ml,過濾，即配成30%（w/v）丙烯酰胺貯存溶液。丙烯酰胺和雙丙烯酰胺在貯存過程中緩慢轉變為丙烯酸和雙丙烯酸，這一脫氨基反應是光催化或堿催
大豆蛋白凝膠制備和凝膠強度檢測方法
目前大豆蛋白凝膠制備和凝膠強度檢測方法沒有相關可以參考的標準，各處使用的方法都不相同。以下為從各參考文獻中摘錄的方法。來源于各大院校和科研單位。序號凝膠制備方法凝膠檢測方法文獻來源凝膠制備參考文獻1、不同 pH 條件下凝膠的制備：用 pH 值為3.5~11.5 的磷酸鹽緩沖液( 0.0062mol/
SDSPAGE凝膠電泳凝膠的制備方法
SDS-PAGE電泳可用于分離蛋白質和核苷酸?，這里綜述了SDS-PAGE實驗原理、試劑和器材、以及實驗操作步驟。一. 實驗原理：SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子?量不同來進行分離的。SDS是一種去垢劑，可與蛋白質的疏水部
葡聚糖凝膠層析（分子排阻層析或凝膠過濾）
【實驗目的】1.掌握葡聚糖凝膠的特性及凝膠層析的原理。2．學習葡聚糖凝膠層析的基本操作技術。 【實驗原理】 凝膠層析又稱分子排阻層析或凝膠過濾，是以被分離物質的分子量差異為基礎的一種層析分離技術，這一技術為純化蛋白質等生物大分子提供了一種非常溫和的分離方法。層析的固定相載體是凝膠顆粒，目前應
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠的制備
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究，為DNA分子及其片段的分子量測定和DNA分子構象分析提供了重要手段。 瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的
瓊脂糖凝膠電泳儀凝膠的制備
瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究，為DNA分子及其片段的分子量測定和DNA分子構象分析提供了重要手段。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使
油田聚合物凝膠堵劑的凝膠強度測定
油田出水是目前油田開發中存在的一個普遍問題，由于油藏的非均質性和復雜的油水關系造成注水沿井間的高滲透層或裂縫突進和指進，降低了注入水的波及系數，造成中、低滲透層動用程度較低或根本未動用。尋找適合的堵劑對提高采收率具有一定的現實意義。?質構儀作為一種物性分析儀器，可以用于測定硬度、彈性、斷裂強度、拉伸
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瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳，廣泛用于核酸的研究，為DNA分子及其片段的分子量測定和DNA分子構象分析提供了重要手段。瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖，是由1，3連接的β－D吡喃半乳糖和1，4連接的3，6脫水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物質。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使
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油田聚合物凝膠堵劑的凝膠強度測定
油田出水是目前油田開發中存在的一個普遍問題，由于油藏的非均質性和復雜的油水關系造成注水沿井間的高滲透層或裂縫突進和指進，降低了注入水的波及系數，造成中、低滲透層動用程度較低或根本未動用。尋找適合的堵劑對提高采收率具有一定的現實意義。 質構儀作為一種物性分析儀器，可以用于測定硬度、彈性、斷裂
瓊脂糖凝膠電泳，凝膠電泳條帶
原理 瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有"分子篩"和"電泳"的雙重作用。 瓊脂糖凝膠具有網格結構，電泳分子通過時會受到阻力，大分子物質在泳動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量，而且還取決于