一、層析分離技術原理:層析分離技術是利用混合物中各組份物理化學性質的差別(如分子吸引力、分子親和力、分子形狀、分子大小、分子極性和分配系數等),使各組分以不同的分配比例分布在固定相和流動相中,從而達到分離目的。層析分離技術常與離心機分離技術結合使用。二、層析分離技術發展歷程:1903年利用層析分離技術分離植物色素,分離后的葉綠素和葉黃素等在碳酸鈣的吸附柱上從上到下排列成色譜,故層析分離又稱為色層分離。1931年利用氧化鋁柱分離了胡蘿卜素的兩種同分異構體,顯示了層析分離技術的高度分辨力,從此引起了人們的廣泛關注。1944年利用濾紙作為固定支持物的紙層析誕生后,層析分離技術發展的越來越快。1950年以來,相繼出現了氣相層析、液相層析、薄層層析、親和層析和凝膠層析等。三、層析分離技術分類:1、按層析分離機理可分:吸附層析、分配層析、離子交換層析、凝膠層析和親和層析等。2、按流動相不同可分:氣相層析和液相層析。3、按操作形式可分:紙層析......閱讀全文
5. 正相色譜與反相色譜 正相色譜是指固定相的極性高于流動相的極性,因此,在這種層析過程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動的速度快,先從柱中流出來。 反相色譜是指固定相的極性低于流動相的極性,在這種層析過程中,極性大的分子比極性小的分子移動的速度快而先從柱中流出。&
離子交換劑的總交換容量通常以每毫克或每毫升交換劑含有可解離基團的毫克當量數(meq / mg或meq / ml)來表示。通常可以由滴定法測定。陽離子交換劑首先用HCl處理,使其平衡離子為H?。再用水洗至中性,對于強酸型離子交換劑,用NaCl充分置換出H?,再用標準濃度的NaOH滴定生成的HCl,
分辨率: 由上式可見,Rs值越大,兩種組分分離的越好。當Rs = 1時,兩組分具有教好的分離,互相沾染約2%,即每種組分的純度約為98%。當Rs=1.5時,兩組分基本完全分開,每種組分的純度可達到99.8%。如果兩種組分的濃度相差較大時,尤其要求較高的分辨率。 為了提高分辨率Rs 的值,可采用以下方
3)采用適當的流速,也可使理論塔板的高度降低,增大理論塔板數。太高或太低的流速都是不可取的。對于一個層析柱,它有一個最佳的流速。特別是對于氣相色譜,流速影響相當大。②改變容量因子D(固定相與流動相中溶質量的分布比)。一般是加大D,但D 的數值通常不超過10,再大對提高Rs 不明顯,反而使洗脫的時
薄層層析分離是把支持劑均勻涂布于支持板(常用玻璃板和滌綸布等)上形成薄層,待分離樣品點在支持板上,然后用相應的溶劑進行展開,使樣品中各組分得到分離的過程。薄層層析分離根據固定相支持劑的不同,分薄層吸附層析分離、薄層分配層析分離、薄層離子交換層析分離和薄層凝膠層析分離等。一般實驗中應用較多的是薄層吸附
薄層層析分離是把支持劑均勻涂布于支持板(常用玻璃板和滌綸布等)上形成薄層,待分離樣品點在支持板上,然后用相應的溶劑進行展開,使樣品中各組分得到分離的過程。薄層層析分離根據固定相支持劑的不同,分薄層吸附層析分離、薄層分配層析分離、薄層離子交換層析分離和薄層凝膠層析分離等。一般實驗中應用較多的是薄層吸附
一、層析分離技術原理:層析分離技術是利用混合物中各組份物理化學性質的差別(如分子吸引力、分子親和力、分子形狀、分子大小、分子極性和分配系數等),使各組分以不同的分配比例分布在固定相和流動相中,從而達到分離目的。層析分離技術常與離心機分離技術結合使用。二、層析分離技術發展歷程:1903年利用層析分離技
隨著生物制藥的快速發展及監管部門對生物藥的要求越來越高,使得生物制藥的分離純化難度越來越大。層析技術由于具有極高的分離純化效率且應用條件溫和,在分離純化過程中容易保持目標分子的生物活性,因此層析技術已成為生物制藥最重要的純化工具。層析介質制備技術難度大、門檻高,目前主要由美國GE、日本Tosoh
親和層析(Affinity Chromatography)是利用生物分子間專一的親和力而進行分離的一種層析技術。人們很早就認識到蛋白質、酶等生物大分子物質能和某些相對應的分子專一而可逆的結合,可以用于對生物分子的分離純化。但由于技術上的限制,主要是沒有合適的固定配體的方法,所以在實驗中沒有廣泛的
一、薄層層析分離中的顯色:薄層層析分離中的薄層板展開后,從展開裝置中取出,放入干燥器中干燥,然后根據被分離物質的種類和性質,選用相應的顯色劑顯色或用紫外光檢測被分離物質的斑點,測量和計算各斑點的遷移率。樣品所含溶質較多或某些組分在單相薄層層析分離中的遷移率比較接近,不易明顯分離時,可采用雙相薄層層析
三. 薄層板上原位化學反應 本法使直接在薄層板上進行的化學反應,又稱原位反應薄層。先將樣品滴加在薄層板上,然后滴上適當的溶劑展開反應物。有時先在試官內進行反應,而后在薄層板上進行層析檢識。根據原化合物的Rf值再聯系產物的層析行為,Rf值,可供鑒別一個化合物或者提供鑒定一個化合
層析技術概述引言層析法又稱色層分析法或色譜法(Chromatography),它是在 1903~1906年由俄國植物學家M. Tswett首先提出來的。他將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱,并繼續以石油醚淋洗,由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同,色素被逐漸分離,在管柱中出現了不同
3.1 層析技術概述3.1.1 引言層析法又稱色層分析法或色譜法(Chromatography),它是在1903-1906年由俄國植物學家M. Tswett首先系統提出來的。他將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱,并繼續以石油醚淋洗,由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同,色素被逐漸分
層析法又稱色層分析法或色譜法(Chromatography),它是在1903-1906年由俄國植物學家M. Tswett首先系統提出來的。他將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱,并繼續以石油醚淋洗,由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同,色素被逐漸分離,在管柱中出現了不同顏色的譜帶或稱
一、薄層層析分離中的顯色: 薄層層析分離中的薄層板展開后,從展開裝置中取出,放入干燥器中干燥,然后根據被分離物質的種類和性質,選用相應的顯色劑顯色或用紫外光檢測被分離物質的斑點,測量和計算各斑點的遷移率。
液相微萃取(LPME) LPME技術具有操作簡便、快捷、成本低廉、易與色譜系統聯用等優點。近年來,作為一種新型的樣品前處理技術,已經引起藥物分析領域研究人員的注意。 室溫離子液體(Room Temperature Ionic Liquids),是指在室溫或室溫附近溫度下呈液態的僅由
3.4.5 親和層析的應用親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為免疫親和層析。例如將抗原結合于親和層析基質上,就可以從血清中分離其對應的抗體。在蛋白質工程菌發酵液中所需蛋白
親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。1.抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為免疫親和層析。例如將抗原結合于親和層析基質上,就可以從血清中分離其對應的抗體。在蛋白質工程菌發酵液中所需蛋白質的濃度通常較低,用離
(一)層析技術的原理層析法是目前廣泛應用的一種分離技術。本世紀初俄國植物學家M.Tswett發現并使用這一技術證明了植物的葉子中不僅有葉綠素還含有其它色素。現在層析法已成為生物化學、分子生物學及其它學科領域有效的分離分析工具之一。層析法是利用不同物質理化性質的差異而建立起來的技術。所有的層析系統都由
一、實驗目的:1、通過氨基酸的分離,學習并掌握紙層析的原理和操作技術;2、掌握分配層析法;3、掌握影響分配系數的因素。層析分離技術是利用被分離的混合物中各組分物理化學的性質(分子的形狀和大小、分子極性、吸附力、分子親和力、分配系數等)的不同,使各組分以不同程度分布在兩相(流動相和固定相)中,當流動相
核酸的分離與純化技術是生物化學與分子生物學的一項基本技術。隨著分子生物學技術廣泛應用于生物學、醫學及其相關等領域,核酸的分離與純化技術也得到進一步發展。各種新方法、經完善后的傳統經典方法以及商品試劑方法的不斷出現,極大地推動了分子生物學的發展。現就核酸分離與純化的原理及其方法學進展作一綜述。核酸分離
核酸的分離與純化技術是生物化學與分子生物學的一項基本技術。隨著分子生物學技術廣泛應用于生物學、醫學及其相關等領域,核酸的分離與純化技術也得到進一步發展。各種新方法、經完善后的傳統經典方法以及商品試劑方法的不斷出現,極大地推動了分子生物學的發展。現就核酸分離與純化的原理及其方法學進展作一綜
核酸的分離與純化技術是生物化學與分子生物學的一項基本技術。隨著分子生物學技術廣泛應用于生物學、醫學及其相關等領域,核酸的分離與純化技術也得到進一步發展。各種新方法、經完善后的傳統經典方法以及商品試劑方法的不斷出現,極大地推動了分子生物學的發展。現就核酸分離與純化的原理及其方法學進展作一綜述。核酸分離
實驗概要通過綠色植物色素的提取和分離,了解天然物質分離提純方法;了解柱層析和薄層色譜分離的基本原理,掌握柱層析和薄層色譜分離的操作技術。通過柱色譜和薄層色譜分離操作,加深了解微量有機物色譜分離鑒定的原理。實驗原理層析法是一種物理分離方法。柱層析法是層析方法中的一個類型,分為吸附柱層析法和分配柱層析法
相關專題 磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。 磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核
磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附反應。硅磁(
磁珠法純化DNA原理 磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附反應。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一層硅材料,來吸附核
(2)平衡緩沖液離子交換層析的基本反應過程就是離子交換劑平衡離子與待分離物質、緩沖液中離子間的交換,所以在離子交換層析中平衡緩沖液和洗脫緩沖液的離子強度和pH 的選擇對于分離效果有很大的影響。平衡緩沖液是指裝柱后及上樣后用于平衡離子交換柱的緩沖液。平衡緩沖液的離子強度和pH 的選擇首先要保證
(三)高效液相層析法 高效液相層析法(HPLC)是近二十年來發展起來的一項新穎快速的分離技術。它是在經典液相層析法基礎上,引進了氣相層析的理論具有氣相層析的全部優點。由于HPLC分離能力強、測定靈敏度高,可在室溫下進行,應用范圍極廣,無論是極性還是非極性,
柱床體積Vt可以通過加入一定量的水至層析柱預定標記處,然后測量水的體積來測定。外水體積Vo可以通過測定完全排阻的大分子物質的洗脫體積來測定,一般常用藍色葡聚糖-2000作為測定外水體積的物質。因為它的分子量大(為200萬),在各種型號的凝膠中都被排阻,并且它呈藍色,易于觀察和檢測。&n