在藥物的分析和研究,以及控制藥物質量等方面有著廣泛應用的藥物分析檢測技術,可以采用物理、化學等方式對藥物進行系統的分析,并結合現代化學、光譜、色譜等技術對藥品進行研究。DNA擴增檢測技是現代生物學重大發現之一,也是現代藥物分析中快速檢測技術之一。作為人體生命的重要物質,核酸和蛋白的異常表達往往與癌癥疾病息息相關,及早發現、診斷和治療會有效降低癌癥的發病率,因此迫切需要建立能檢測痕量核酸和蛋白的高靈敏策略。核酸大分子分為兩類:脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),它們是生物的基本遺傳物質。DNA、RNA(尤其miRNA)的表達水平與疾病的發生發展密切相關,如腫瘤的發生、病毒的感染等。DNA擴增檢測技術的應用主要是通過DNA片段的擴增識別,將傳統需要較長時間才可以肉眼識別的過程,實現快速的分析得出結論。DNA擴增檢測技術首先變現模板DNA,其次將引物與模板DNA進行復合。然后延伸引物,并通過引物的作用,形成半保留DNA。DNA......閱讀全文
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展,新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力,已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法
摘 要:實踐證明,法醫DNA檢測技術和相關儀器在犯罪嫌疑人認定、親權鑒定和系列串并案偵破中發揮了顯著作用,是我國公安一線偵察破案和打擊犯罪的重要技術手段。以法醫DNA檢測技術為主線,對相關儀器的產生背景、發展歷程、工作原理、各類技術優劣,以及國內外研究現
法醫DNA檢測技術的現狀及展望龐曉東 陳學亮 榮海博 俞麗娟 管樺 張濤公安部第一研究所DNA檢測技術的應用,為法醫學帶來了一場技術革命。通過對遺傳物質DNA的序列多態性及長度多態性的檢驗,即可實現個體識別及親權鑒定,該技術正在成為當前法醫物證鑒定最
生物制品中殘留DNA檢測標準的變化2015年3月底,中國食品藥品檢定研究院網站的國家藥品標準物質目錄中新增加了一個編號為410001的產品:CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)。這個由中檢院與中科院聯合研發,由生物制藥企業參與標定的試劑盒與現行美國藥典(USP)建議的檢測方法同步
5.核酸探針雜交技術原理 根據完成雜交反應所處介質的不同,分成固相雜交反應和液相雜交反應。固相雜交反應是在固相支持物上完成的雜交反應,如常見的印跡法和菌落雜交法。事先破碎細胞使之釋放DNA/RNA然后把裂解獲得的DNA/RNA固定在硝基纖維素薄膜上,再加標記探針雜交,依顏色變化確定結果,該法是
隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展,新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力,已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法,
第五節 PCR各處應用模式 一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR 密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,
一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR 密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡
一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR 密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡
HBV DNA 檢測技術目前已經在臨床中普遍應用。但在實際工作中,不少臨床醫師對如何認識、評價和使用 HBV DNA 檢測結果仍存在著一些困惑,甚至可能因認識不足、應用不當導致了錯誤的診斷和治療。現就 HBV DNA 定量檢測臨床應用的基因診斷和臨床治療研究闡述如下。一、如何正確認識和評價 HBV
因分子技術具有內在準確性、敏感性、特異性和周轉迅速的特點,帶來了分子診斷行業的快速發展。此外,因為分子診斷技術具有準確性、敏感性和特異性,實驗室人員能夠從很小量的樣本中就可獲得有效的結果。這對法醫檢測領域來說是非常有用的,但同時該技術也可以檢測到目標物質的極低濃度,從而使臨床醫生在極早期階段就能
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
陳力在生產車間向記者介紹法醫DNA檢測平臺的生產情況 12月3日,“GA118-16A型”國產法醫DNA檢測平臺在福建省福州市正式發布。這一檢測平臺打破了多年來外國公司在此領域的技術壟斷,在打擊犯罪等方面產生了深遠影響。在該檢測平臺的幕后,還有很多鮮為人知的研發
多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性
多態性(polymorphism)是指處于隨機婚配的群體中,同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中,個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因(DNA)的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類,即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性
細菌感染性疾病的直接核酸診斷試驗 Florence Paillard, PhD
DNA序列分析(DNA sequencing) 應用各種突變檢測技術檢測到的基因突變,最后都需用序列分析才能確定突變類型及突變位置,其效率可以達到100%。現在的測序方法已與經典的方法有了很大的不同,其基本原理雖仍是雙脫氧終止法,但自動化程度大為提高,操作更簡便,測序時間也大大縮短。隨著PCR技術與
相關專題1 甲基化敏感性限制性內切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法這種方法利用甲基化敏感性限制性內切酶 對甲基化區的不切割的特性,將DNA消化為不同大小的片段后再進行分析。常使用的甲基化敏感的
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合
芯片毛細管電泳具有進樣量少,靈敏度高,分析速度快等特點,非常適合法醫DNA-STR的快速檢驗。毛細管電泳芯片由于尺寸小,可施加較大場強,所以在幾秒鐘內就可完成對樣品的分離,微陣列毛細管電泳芯片可實現高通量檢測則成為目前學者研究的熱點。2002年Emrich CA等[31]報道的將高通量384孔毛
PCR反應體系與反應條件-------------------------------------------------------------------------------- 標準的PCR反應體系:10×擴增緩沖液 10ul4種dNTP混合物 各200umol/L引物 各10
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指
近年來,DNA分析技術廣泛應用于醫學、法學、環境等諸多領域,成為科學研究的一大重點。例如產前診斷及法醫檢測等首先進行微量DNA 提取,然后進行PCR擴增驗證,也有一些研究單位會對一些古老樣本進行DNA提取,同樣做PCR擴增驗證。它們的相同之處在于,用于分析的樣本DNA含量可能極其有限,稍有遺損就可能
昨日,記者從自治區人民醫院了解到,在中組部醫療人才“組團式”援藏專家的幫助下,該院檢驗科臨床基因擴增檢測實驗室順利通過國家衛計委臨檢中心技術驗收,本月21日,國家衛計委臨檢中心主任陳文祥教授將親自為實驗室頒發技術驗收合格證書。這是西藏首家通過國家驗收的臨床基因擴增檢測實驗室。目前,該實驗室已能開
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因,檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學,醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點,它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 \意義,分子生物學技術的發展,尤其是PCR技術的出
進化遺傳學具有兩個并列的研究方向:系統發育的重建和種群分析。自1962年, Zuckerkandl和Pauling提出蛋白質序列和基因序列的比較可以象分子種一樣用于標志 現存物種分化的時間以來,各種生化方法被用于系統發育的研究。在最初二十年內, 同功酶的電泳分析、免疫學比較和蛋白質序列分析被廣泛地應
實驗原理單鏈DNA在互補寡聚核苷酸片段的引導下,可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向復制出互補DNA。這時單鏈DNA稱為模板DNA,寡聚核苷酸片段稱為引物(Primer),合成的互補DNA稱為產物DNA。雙鏈DNA分子經高溫變性后成為兩條單鏈DNA,它們都可作為單鏈模板DNA,在相應的引物引導下,用
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因,檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學,醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點,它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 \意義,分子生物學技術的發展,尤其