生化實驗講義(理論部分)——電泳技術（二）
4.9 梯度凝膠電泳梯度凝膠電泳也通常采用聚丙烯酰胺凝膠，但不是在單一濃度（孔徑）的凝膠上進行，而是形成梯度凝膠。從凝膠頂部到底部丙烯酰胺的濃度呈梯度變化，如通常頂部凝膠濃度為5％，底部凝膠濃度為25％。凝膠梯度是通過梯度混合器形成的，高濃度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中，而后溶液濃度呈梯度下降，因此在凝膠的頂部孔徑較大，而在凝膠的底部孔徑較小。梯度凝膠電泳也通常加入SDS，并有濃縮膠。電泳過程與SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳基本類似。與單一濃度的凝膠相比，梯度凝膠有幾個優點：①首先，梯度凝膠比單一濃度凝膠的分離范圍更寬，可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質。單一凝膠電泳對于分子量超過其分離范圍的蛋白質，過大或過小，都不能分離。而梯度凝膠孔徑范圍比單一凝膠大，分子量較大的蛋白質可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離，而分子量較小的蛋白質可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離，所以分子量較大和較小的蛋白質可以同時得到分離。例如用4％～30％的梯......閱讀全文
核酸電泳（RNA電泳與DNA電泳）
（一）DNA的凝膠電泳：凝膠電泳是分子克隆的中心技術之一。瓊脂糖凝膠用于分離大于200～1000bp的片段;操作簡單、快速，且分離范圍廣，分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝膠用于分離5－500bp的片段; 效果好、分辨率極高，相差1bp的DNA片斷就能分開，能容納相對大量的DNA ，用于核苷酸多態性的分析。
免疫電泳實驗_電泳
試劑、試劑盒Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液實驗步驟電泳時溫度可控制在 10~15℃，同前述電泳的方法一樣，先在冷卻板上鋪一層煤油，再鋪膠。電極芯與凝膠的邊緣接觸 5~10 mm，并保持平行，電泳時的電場強度約為 20 V/cm。
制備電泳實驗——連續電泳
儀器、耗材聚丙烯酰胺凝膠電泳瓊脂糖電泳實驗步驟1. 連續洗脫電泳使用連續洗脫的聚丙烯酰胺凝膠電泳或瓊脂糖電泳能制備微克到毫克級的多肽，蛋白或核酸。裝置可以是各種各樣的。有的是把樣品直接加在固體凝膠的表面，分子經過電泳分離后，由流動的緩沖液洗脫，純化后的分子被濃縮，并由蠕動泵和部分收集器收集。2. 連
火箭免疫電泳的電泳
火箭免疫電泳（rocket immunoelectrophoresis，RIEP）是將單向免疫擴散和電泳相結合的一種定量檢測技術。
交叉免疫電泳的電泳
一種對樣品中各蛋白組分進行定性分析或定量測定的技術。即借助區帶電泳使蛋白質抗原分離，繼而將含特異性抗體的瓊脂糖插入至區帶一側，旋轉90。再進行電泳，形成與火箭免疫電泳形狀相似的沉淀峰。
2D電泳－電泳流程之－第一向電泳
第一向分離等電聚焦蛋白質是兩性分子，在不同的pH環境中可以帶正電荷、負電荷或不帶電荷。對每個蛋白質來說都有一個特定的pH，此時蛋白質的靜電荷為零，此pH值即該蛋白質的等電點(pI)。將蛋白質樣品加載至pH梯度介質上進行電泳時，它會向與其所帶電荷相反的電極方向移動。在移動過程中，蛋白分子可能獲得或失去
免疫電泳實驗_免疫電泳
實驗材料待檢抗原試劑、試劑盒抗體瓊脂巴比妥緩沖液儀器、耗材電泳儀載物玻片打孔器玻璃鑄型微量進樣器實驗步驟1. ?取載物玻片（7.5ⅹ2.5厘米）加上3.5毫升1.5%瓊脂凝膠，制成2毫米厚的瓊脂板。2. ?按圖位置，在瓊脂板未凝固時，放入抗血清槽鑄型，注意勿使鑄型全部浸入瓊脂中，待凝固時再打孔。3.
電泳儀常用的電泳方法
電泳儀常用的電泳方法 一、凝膠電泳 由區帶電泳中派生出的一種用凝膠物質作支持物進行電泳的方式。 凝膠電泳中的瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是普通電泳中應用zui多的兩種形式。 目前，這種辦法被廣泛用來分析蛋白質和核酸。 二、醋酸纖維素薄膜電泳 電泳時經過膜的預處理、加樣、電泳、染色、
電泳技術RNA電泳操作步驟
試劑： 瓊脂糖（Agarose）、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制（0.1 M MOPS pH7； 5mM EDTA； 10mM NaAc） 1. 稱量20.9g的MOPS，置于1L燒杯中。 2. 加700mL
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀，半干轉（半干轉印電泳槽）一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳Mini P-4小型垂直電泳槽?
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀，半干轉（半干轉印電泳槽） 一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳 Mini P-4小型垂直電泳槽
電泳概述
電泳是在溶劑中通過電場轉移帶電分子，任何帶電的離子或者基團放置在電場中都將會遷移。除非在它們的等電點，大多數生物聚合物在任何pH值時都帶有凈電荷，它們將會以與電荷密度成比例的方式移動。分子在電場中的遷移取決于電場的強度、凈電荷、分子的大小和形狀、離子強度、粘度和分子移動介質的溫度。作為一種分析工具，
RNA電泳
RNA Gel (Crawford Lab)Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.Northern Gel and ?TransferUsing glyoxal
RNA－電泳
①電泳RNA 所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。②用新的1XTBE 配制1. 2 %瓊脂糖凝膠,倒膠時溴化乙錠(E直接加入凝膠中。③制備好的瓊脂糖凝膠板放入電泳槽后再加入經高壓滅菌過的1XTBE ,液面只能剛好同膠面平齊,緩沖液不要淹過膠面。④點樣
RNA電泳
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DNA電泳
DNA電泳（主要內容如下）??Preparation of Agarose Gel and Electrophoresis??Extraction of DNA From Agarose Gel??Extraction of DNA from Acrylamide Gels??DNA Marker?
電泳原理
基本原理 生物大分子如蛋白質，核酸，多糖等大多都有陽離子和陰離子基團，稱為兩性離子。常以顆粒分散在溶液中，它們的靜電荷取決于介質的H+濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中，帶電顆粒向陰極或陽極遷移，遷移的方向取決于它們帶電的符號，這種遷移現象即所謂電泳。 1、電解 當電流通過電解電
介電泳
介電泳（Dielectrophoresis）是在外加電場作用下，由于懸浮顆粒與溶劑之間介電常數差異造成的作用力。介電泳作用力會將介電常數小于溶劑的顆粒拉往電場強度較低的地方。另外介電泳力的大小還與顆粒半徑有關，所以介電泳常被用來分離大小不同的顆粒或細胞。設計介電泳器件，需要控制電場分布、流場，還要計
電泳儀的電泳漕組裝技巧
電泳儀的電泳漕組裝技巧1.把4只固定的螺桿插進一只貯液框(半上槽)的對應孔洞中，然后將貯液框仰放在桌上。2.用左手拿著凹型槽橡膠模框，并且將右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣，再插到橡膠模框內 ，千萬注意手指不可接觸到灌膠面的玻璃板。3.把帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上，它的下緣必須與
電泳槽使用及凝膠電泳
實驗概要電泳技術是分子生物學的基本技術，通過該實驗的學習掌握DNA電泳槽使用及凝膠電泳技術。?實驗步驟1.???先用膠布將電泳槽的兩端封住，防止倒膠后液體漏出，插上梳子，梳子底部與槽底部平行并留有間隙。將凝膠（通常為1％－2％）融化成澄清的液體后（無塊狀凝膠固體），少冷卻加入EB。將膠倒入電泳槽內。
電泳儀和電泳槽的使用
1、接通電源，緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止，設定電泳終止時間，此時電泳即開始進行。?2、首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯接，注意極性不要接反。3、工作完畢后，應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態，并撥出電泳插頭。?4、電泳儀電源開關調至關的位置，電壓旋鈕轉到最小，根據工作
制備電泳實驗——等電聚焦制備電泳
實驗方法原理等電聚焦制備電泳是一種非變性制備技術。由于等電聚焦電泳技術的特點，因而是一種理想的制備方法。試劑、試劑盒電極液兩性電解質Ultrodex實驗步驟一、液體介質垂直柱狀蔗糖密度梯度等電聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制備和分析目的的等電聚焦方法。載體兩性電解質在蔗糖密度梯度柱中形成 pH
電泳設備及電泳技術應用范圍
電泳：在直流電場中，帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動，稱為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術，就是分離和鑒定混合物中帶電粒子（包括離子、高分子多電解質、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞，如細菌和紅細胞等）的技術。?電泳裝置：由電泳儀（電源）和電泳槽（混合樣品電泳時的支持物）組成。 電泳儀（電源）：為
血紅蛋白電泳檢查（電泳法）
1. 原理血紅蛋白是由兩對多肽鏈組成的復雜分子。每一條鏈含有血紅素和絡合鐵原子的卜啉。所有血紅蛋白的血紅素部分都是相同的。所測定的血紅蛋白的蛋白部分稱之為珠蛋白。正常人血紅蛋白多肽鏈包括α、β、δ和γ。血紅蛋白的結構、分子特性取決于形成其肽鏈的氨基酸順序和性狀。氨基酸不同可形成不同的血紅蛋白，其表面
電泳分析常用方法凝膠電泳
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法 稱為凝膠電泳。其中聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大,對一般蛋白質不起分子篩作用,但適用于分離同工酶及其亞型,
電泳設備及電泳技術應用范圍
電泳：在直流電場中，帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動，稱為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術，就是分離和鑒定混合物中帶電粒子（包括離子、高分子多電解質、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞，如細菌和紅細胞等）的技術。 ? 電泳裝置：由電泳儀（電源）和電泳槽（混合樣品電泳時的支持物）組成。 ? 電泳儀（電
血紅蛋白電泳檢查（電泳法）
1. 原理血紅蛋白是由兩對多肽鏈組成的復雜分子。每一條鏈含有血紅素和絡合鐵原子的卜啉。所有血紅蛋白的血紅素部分都是相同的。所測定的血紅蛋白的蛋白部分稱之為珠蛋白。正常人血紅蛋白多肽鏈包括α、β、δ和γ。血紅蛋白的結構、分子特性取決于形成其肽鏈的氨基酸順序和性狀。氨基酸不同可形成不同的血紅蛋白，其表面
關于核酸電泳—瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳介紹
(1) 瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—用透明膠將玻璃板或電泳裝置所配備的塑料盤的邊緣圈封，制成膠模，置水平工作臺上； (2) 瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—稱取適量瓊脂糖，置電泳緩沖液中，加熱使瓊脂糖溶解； (3) 瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—待溶液冷至60℃，加入10mg/ml E
電泳分離技術－－電泳時間過長的原因
?可能由于凝膠緩沖系統和電級緩沖系統地PH選擇錯誤,即緩沖系統地PH和被分離物質的等電點差別太小,或緩沖系統的離子強度太高。
毛細管電泳芯片自由流電泳
芯片自由流電泳除上述分離模式外，芯片自由流電泳也是芯片電泳分離蛋白質的重要方法。芯片自由流電泳是指在芯片中通過外加電場使樣品隨緩沖液連續流動的同時沿電場方向進行電遷移，從而按照電泳淌度不同實現分離的電泳分離模式。Raymond等采用芯片自由流電泳模式分離了人血清蛋白、緩激肽和核糖核酸酶A，其分離長度