幾種蛋白質濃度測定方法
一、Bradford法蛋白質與考馬斯亮蘭染料結合生成藍色物質，藍色物質的量與蛋白質濃度的高低成正比。生成的藍色物質在595nm處有最大光吸收，通過測定595nm的光吸收，來測定蛋白質濃度。實驗中一般利用牛血清白蛋白(BSA)來作標準曲線，此法的靈敏度為25~200ug/ml。甘油、吐溫（tween）80、去污劑、2-巰基乙醇、乙酸、硫酸銨、三羥甲基氨基甲烷（Tris）和一些堿性緩沖液會干擾該檢測反應，可以通過設立適當的對照來消除這種干擾。試劑準備：1．Bradford儲存液：95%乙醇，100mL；88%磷酸，200mL；考馬斯亮蘭G-250染料，350mg；室溫下可長期穩定保存。2．Bradford工作液：雙蒸水，425mL；95%乙醇，15mL；88%磷酸，30mL；Bradford儲存液，30mL；Whatman I號濾紙過濾，室溫保存于棕色瓶中，可用數周，但用前需重新過濾。3．標準蛋白：1mg/mL牛血清白蛋白。操作方法......閱讀全文
BCA法測定蛋白質濃度
【目的】掌握BCA法測定蛋白質濃度的原理。【原理】BCA(bicinchonininc acid)與二價銅離子的硫酸銅等其他 試劑組成的 試劑 ，混合一起即成為蘋果綠，即BCA工作試劑。在堿性條件下，BCA與蛋白質結合時，蛋白質將Cu2+ 還原為Cu+ ，一個Cu+ 螯合二個BCA分子，工作試劑由原
常用蛋白質濃度測定方法匯總
蛋白質是細胞中最重要的含氮生物大分子之一，承擔著各種生物功能。蛋白質的定量分析是蛋白質構造分析的基礎。目前常用的蛋白測量的方法主要有BCA法、考馬斯亮藍法(Bradford)和Lowry法等。BCA法??原理在堿性環境下蛋白質與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+(biuret reaction)
幾種蛋白質濃度測定方法
一、Bradford法蛋白質與考馬斯亮蘭染料結合生成藍色物質，藍色物質的量與蛋白質濃度的高低成正比。生成的藍色物質在595nm處有最大光吸收，通過測定595nm的光吸收，來測定蛋白質濃度。實驗中一般利用牛血清白蛋白(BSA)來作標準曲線，此法的靈敏度為25~200ug/ml。甘油、吐溫（tween）
BCA法測定蛋白質濃度原理
BCA法測定蛋白質濃度原理：BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠，即 BCA 工作試劑。在堿性條件下，BCA 與蛋白質結合時，蛋白質將 Cu2+ 還原為 Cu+，工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562 nm 下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。BCA 蛋白濃度測定
蛋白質濃度測定的檢查過程
受試者靜脈采血，及時分離血清后測定。繪制標準曲線：取96孔酶標板，加入試劑。試劑加完后，準確吸取20μl樣品溶液于酶標孔中，加入BCA試劑200μl，輕搖，于37℃保溫30-60min，冷卻至室溫后，以空白為對照，在酶標儀上590nm處比色，以牛血清白蛋白含量為橫坐標，以吸光值為縱坐標，繪制標準
Lowry 檢測法測定蛋白質濃度實驗
實驗方法原理Lowry 法又稱為 Folin-酚試劑法。首先在堿性溶液中形成銅-蛋白復合物，然后這一復合物還原磷鉬酸-磷鎢酸試劑 （Folin-酚上級），產生鉬藍和鎢藍復合物的深藍色，這種深藍色 的復合物在745～750 nm 處有最大的吸收峰，顏色的深淺（吸收值）與蛋白質濃度成正比，可根據 750
Lowry 檢測法測定蛋白質濃度實驗
實驗方法原理?Lowry 法又稱為 Folin-酚試劑法。首先在堿性溶液中形成銅-蛋白復合物，然后這一復合物還原磷鉬酸-磷鎢酸試劑 （Folin-酚上級），產生鉬藍和鎢藍復合物的深藍色，這種深藍色 的復合物在745～750 nm 處有最大的吸收峰，顏色的深淺（吸收值）與蛋白質濃度成正比，可根
蛋白質濃度測定的臨床意義
異常結果 1、 雙縮脲法：雙縮脲法是第一個用比色法測定蛋白質濃度的方法，硫銨不干擾顯色， Cu2+與蛋白質的肽鍵，以及酪氨酸殘基絡合，形成紫藍色絡合物，此物在540nm波長處有最大吸收。雙縮脲法常用于0.5g/L～10g/L含量的蛋白質溶液測定。 2、Lowry法：Cu+與蛋白質在堿性溶液中
蛋白質濃度測定的注意事項
檢查前禁忌：檢查前一天不吃過于油膩、高蛋白食物，避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天的晚八時以后，應禁食。 檢查時要求：抽血時應放松心情，避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難。測定中，蛋白-染料復合物會有少部分吸附于比色杯壁上，實驗證明此復合物的吸附量是可以忽略的。
蛋白質濃度測定（雙縮脲法）
實驗概要1．掌握本實驗方法的原理和操作2．掌握標準工作（A—C）曲線的制作3．熟悉蛋白質定量測定的幾種常用方法實驗原理測定蛋白質的定量方法有很多，目前常用的有凱氏定氮法；比色法主要包括雙縮脲法、Folin-酚試劑法及 染料結合法；紫外分光光度法等雙縮脲(Biuret)法：在堿性溶液中，雙縮脲(H2N