PCRArray——基因表達分析疾病和信號通路的利器(二)
RT2 Profiler PCR Array操作流程 首先將RNA樣本反轉錄成cDNA第一鏈,作為PCR模板;接著將cDNA模板與合適的即用型PCR預混液混合,等體積加入到已經固定好基因特異性引物的同一個孔板的每個孔中,然后即可運行real-time PCR循環程序。RT2 Profiler PCR Arrays可與所有QIAGEN、ABI、Bio-Rad、Eppendorf、Roche和Stratagene的儀器兼容。 靈活的布局和對照 RT2 Profiler PCR Arrays有96孔板、384孔板和100孔盤等規格,可檢測84或370個與疾病或通路相關的基因,外加5個管家基因。每個RT2 Profiler PCR Array還包括以下對照因素:數......閱讀全文
PCR Array——基因表達分析疾病和信號通路的利器(二)
RT2?Profiler?PCR?Array操作流程 首先將RNA樣本反轉錄成cDNA第一鏈,作為PCR模板;接著將cDNA模板與合適的即用型PCR預混液混合,等體積加入到已經固定好基因特異性引物的同一個孔板的每個孔中,然后即可運行real-time?PCR循環程序。RT2?Profiler?PCR
PCR Array——基因表達分析疾病和信號通路的利器(三)
RT2?PCR?Profiler?Arrays可用于生物學和醫學研究的各個領域,包括:癌癥研究、炎癥和細胞因子分析、干細胞研究、神經生物學、信號轉導通路研究、細胞黏附和細胞遷移、生物標記分子篩選和驗證截止目前,QIAGEN?擁有專利申請的PCR?Array可以分析超過150條通路和特異的疾病類型。具
PCR Array——基因表達分析疾病和信號通路的利器(一)
以前只要提到基因表達分析,人們就會想到熒光定量PCR;只要提到高通量基因表達分析,人們會首先想到基因芯片。雖然熒光定量PCR儀幾乎每個實驗室都有,但是做芯片就不一定每個實驗室都具備這個條件了。那么只有一臺熒光定量PCR儀是否也能進行高通量的基因表達譜分析呢?QIAGEN 推出的RT2 Profile
PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法(二)
PCR芯片的設計和所包含的基因 96孔模式的每種RT2Profiler PCR芯片,含有基因特異性引物,可用于研究84個與某種信號通路或者疾病相關的基因。此外,芯片中還有設置了3個檢測實驗質量的對照。圖2為PCR芯片模式圖。由于每種芯片都是根據特別的信號通路或者特定的應用范圍設計的,研究者可以用它來
PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法
簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達最靈敏,最可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備標準曲線和同時分析內
PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法
?簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備標準曲線和
Hippo信號通路和疾病
a. Hippo信號通路和癌癥癌癥是涉及異常細胞生長,可能侵入或蔓延到其他多個身體部位的疾病。雖然第一次發現Hippo通路是因為它可以通過促進細胞凋亡及抑制細胞周期來控制成像椎間盤生長,但是目前在動物模型中的研究已經將該通路的功能擴展到了其他癌癥,如乳頭狀腎癌,結直腸癌,卵巢癌,乳腺癌和胃癌。 Ca
PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法(五)
重復性 實時定量PCR的定量特性使得PCR芯片的重復性強。為檢測重復性,2位研究者采用了同樣的總RNA樣品,分別進行了4次重復試驗。兩個人使用同種PCR芯片,但批號不同,并且每個人都分兩天進行試驗。比較兩位研究者分別做的4張芯片的原始Ct值。圖5顯示了比較結果的圖示和相關系數。每一組比較結果均獲得理
PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法(四)
RT2ProfilerTM PCR芯片特點靈敏度 研究者總是希望能檢測到表達量相當低的基因,有時候,研究者得到的起始總RNA量也很少,但仍希望能進行實時定量PCR檢測。為了滿足研究者的這些需要,Superarray嚴格檢測了PCR芯片系統的靈敏度。例如,Superarray使用PCR芯片檢測了一系列
PCR Array 簡單實用的檢測基因表達的高通量方法(三)
PCR 芯片實驗體系 ? ?完整的PCR芯片實驗體系包括RT2ProfilerTM PCR芯片,RT2 Real-TimeTM ?SYBR Green PCR反應體系和cDNA合成試劑盒。所有這些組分均為基于SYBR ?Green的實時定量PCR反應優化。精心設計的引物和優化的PCR反應體系一起,為