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1．外周血單個核細胞的采集 1.1 用血細胞分離機采集患者自身的外周血單個核細胞80 - 100ml； 1.2 淋巴細胞分離液密度梯度離心法進一步純化單個核細胞(PBMC)； 1.3 無血清培養液洗滌2次，獲得純度在90%以上的PBMC，細胞數量需達到1-3 x 108。2．(可選步驟)腫瘤抗原的制備] 用于負載DC的腫瘤抗原可以是腫瘤特異性抗原肽(Tumor-Specific Antigens, TSA)或腫瘤相關抗原(Tumor-Associated Antigens, TAA)，也可以是腫瘤全細胞抗原。 用TSA或TAA負載的DC具有很好可克服這些缺陷，因為此時無需知道那些抗原是腫瘤細胞的TSA或TAA，而且全抗原中的多種不同腫瘤抗原沖擊DC可誘導產生針對不同抗原決定簇的細胞毒T......閱讀全文
1．外周血單個核細胞的采集 1.1 用血細胞分離機采集患者自身的外周血單個核細胞80 - 100ml； 1.2 淋巴細胞分離液密度梯度離心法進一步純化單個核細胞(PBMC)； 1.3 無血清培養液洗滌
2.CIK 培養用細胞因子和抗體：CD3 激發型單抗：T 細胞活化的第一信號來自于 T 細胞表面的受體，即 T 細胞抗原受體 （T cell antigen receptor, TCR） 與 APC 提呈的抗原的特異性結合，也就是 T 細胞對抗原的特異性識別。 TCR 是由 2
CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的縮寫，中文全稱為“細胞因子誘導的殺傷細胞”。 CIK是單個核細胞在CD3單抗和多種細胞因子(包括IFN-γ、IL-2等)的作用下培養獲得的一群以CD3+CD56+細胞為主要效應細胞的異質細胞群， 其既
5.0 DC-CIK細胞的制備和質檢 5.1 收集步驟4和步驟3中所獲得的DC 細胞和CIK 細胞，按1:10(數目比)的比例共培養，無血清培養液中添加重組人IL-2 (300 U/ml)； 5.2 每3天半量換液
2. （可選步驟） 腫瘤抗原的制備用于負載 DC 的腫瘤抗原可以是腫瘤特異性抗原肽 （Tumor-Specific Antigens, TSA）或腫瘤相關抗原 （Tumor-αssociated Antigens, TAA），也可以是腫瘤全細胞抗原。用 TSA
4. DC 細胞的培養及鑒定4.1 步驟 3.2 中剩下的貼壁細胞 （主要是 CD14+的單核細胞），加入含重組人 GM-CSF500-1,000U/ml 和重組人 IL-4 500U/ml 的無血清培養液，37℃，5%CO2 培養箱中 培養，誘導單核細胞向 DC 細胞分化。4.2 每 3d 半量換
【步驟簡圖】【推薦試劑】生產商產品名稱產品編號產品規格使用濃度PeproTech重組人 GM-CSF (Animal Free)AF-300-0320ug/50ug/100ug/250ug/500ug1mg50-100ng/mlPeproTech重組人 IFN-g (Animal Free)AF-3
【背景】CIK 是「Cytokine-Induced Killer Cells」的縮寫，中文全稱為「細胞因子誘導的殺傷細胞」。 CIK 是單個核細胞在 CD3 單抗和多種細胞因子 （包括 IFN-γ, IL-2 等） 的作用下培養獲得的一群以 CD3+CD56+細胞為主要效應細胞的異質細胞群
【細胞制備】 1．外周血單個核細胞的采集 1.1 用血細胞分離機采集患者自身的外周血單個核細胞50-100mL； 1.2 淋巴細胞分離液密度梯度離心法進一步純化單個核細胞(PBMC)； 1.3 無血清培養液洗滌2次，獲得純度在90%以上的PBMC。 2．CIK細胞的培養及鑒定 2.1 將PBMC按1
【背景知識】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的縮寫，中文全稱為“細胞因子誘導的殺傷細胞”。 CIK是單個核細胞在CD3單抗和多種細胞因子(包括IFN-γ，IL-2等)的作用下培養獲得的一群以CD3+CD56+細胞為主要效應細胞的異質細胞群，其既具有