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  • peprotech細胞因子的溶解方法

    PeproTech細胞因子中不含載體蛋白(Carrier Protein)或其他添加劑(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以最少量的鹽來進行凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產品后,務必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時能否見到白色沉淀均屬正常現象)。 1.離心:高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。 2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的產品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時不可振蕩,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間,待細胞因子完全溶解后使用。溶劑的選擇: 1)要求用去離......閱讀全文

    peprotech細胞因子的溶解方法

    PeproTech細胞因子中不含載體蛋白(Carrier Protein)或其他添加劑(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以最少量的鹽來進行凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產品后,務必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白

    PeproTech細胞因子和重組蛋白溶解必讀(一)

    我們知道,的所有細胞因子和蛋白均為凍干粉,這使得運輸非常便捷,只要常溫即可。而且,細胞因子和蛋白凍干粉非常穩定,在-20或-80℃條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解,然后以液體形式加到培養體系或注射入動物體內。溶解步驟非常關鍵,因溶解不好會導致細胞因子或蛋白的失活,這也是很多用戶在實際使用中

    PeproTech細胞因子溶解使用說明—活性單位篇

    PeproTech的細胞因子都是無載體蛋白的凍干粉狀態,規格都是質量單位如μg。同時細胞因子又是有生物活性的蛋白,在文獻中經常會看到細胞因子的工作濃度用U/mL來表示,比如Human PDGF-BB的使用濃度是120 U/mL。那么,如何對PeproTech的細胞因子進行活性單位U和質量單位的換算呢

    PeproTech細胞因子和重組蛋白溶解必讀(二)

    有用戶會問,若想保證溶解液與凍干粉充分混勻,以實現細胞因子或重組蛋白的完全溶解,該怎么辦呢???????答:多數細胞因子或重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般我們用移液槍的槍頭輕吹幾下,即可使細胞因子或重組蛋白完全溶解。?????對于不易溶解的細胞因子或蛋白,PeproTech會在說明書中進行備注

    PeproTech細胞因子和重組蛋白溶解正確使用方法

    PeproTech的所有細胞因子和蛋白均為凍干粉,這使得運輸非常便捷,只要常溫即可。而且,細胞因子和蛋白凍干粉非常穩定,在-20o C或-80o C條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解,然后以液體形式加到培養體系或注射入動物體內。溶解步驟非常關鍵,因溶解不好會導致細胞因子或蛋白的失活,這也是很

    peprotech細胞因子注意事項(一)

    目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括:ELIspot、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析(limiting dilution analysis,LDA)和單細胞PCR,應用原位雜交技術和免疫組化方法觀察細胞因子蛋白表達及mRNA表達可以識別Th1和Th2細胞,此方法可獲得較強的細胞

    peprotech細胞因子注意事項(五)

    八、問題與解答問題原因解決注釋無CD69胞內染色細胞未激活激活劑制備不當,見激活劑制備儲存一節。PMA Ionomycin激活4小時后CD3 T淋巴細胞CD69陽性率應>90%使用了錯誤的抗凝劑應使用肝素鈉,不要使用肝素鋰,避免使用ACD與EDTA等絡合鈣的抗凝劑。淋巴細胞激活需要Ca,絡合Ca的抗

    peprotech細胞因子注意事項(二)

    四、所需試劑1、細胞表面染色的熒光標記的單抗試劑依據實驗需要選擇特殊表面標志CD45圈定所有淋巴細胞CD3 圈定T淋巴細胞CD4 圈定T輔助淋巴細胞亞群CD8 圈定T抑制淋巴細胞亞群CD19/或CD20圈定B淋巴細胞CD56圈定NK淋巴細胞CD14圈定單核細胞2、熒光標記的細胞因子抗體R&D提供FI

    peprotech細胞因子注意事項(四)

    六、流式檢測細胞染色基本過程(以全血為例)1、收獲細胞肝素鈉抗凝的靜脈血,按1:1與培養基混勻,加刺激劑,同時加蛋白轉運抑制劑(參照說明書), 混勻后,37℃,5%二氧化碳培養4-6小時2、阻斷Fc受體用于消除非特異性的結合染色① 在小鼠,可使用純化的FcII/III受體的抗體(CD16/32),按

    peprotech細胞因子注意事項(三)

    五、細胞培養和刺激的基本方法細胞活化的最終結果是產生細胞因子,根據檢測指標和標本的不同,研究人員需要選擇不同的刺激劑和刺激時間,以獲得最佳的實驗結果。下表提供了檢測一些常用細胞因子的推薦的活化方法。表1、細胞內細胞因子流式檢測推薦的陽性對照活化方法檢測細胞因子陽性對照刺激方法人IFN-g方法2 (4

    重組細胞因子溶解

    1.離心(Centrifuge):高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/ml)。溶解時不可

    重組細胞因子溶解小帖士

    1.離心(Centrifuge):高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。 2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/ml)。溶解時不

    細胞因子溶解操作方法及注意事項

    1.離心:高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的產品,需用10uL-10

    immunofluorescence-of-general-PBMC-by-Peprotech

    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of general PBMC by Peprotech.實驗步驟The following protocol used human PBMC that were

    immunofluorescence-of-general-cell-by-Peprotech

    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of general cell by Peprotech.實驗步驟Please refer to the antibody Product Information S

    各種常見緩沖液的配制方法(在線計算)

    磷酸鹽緩沖液,Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學實驗中常用的緩沖液,也是PeproTech重組細胞因子和蛋白溶解所需的常用緩沖液。然而,這些緩沖液的配制比較麻煩,尤其當要獲得特定pH值的緩沖液時,調節pH值是費力、費時的事情。對于Tris等緩沖液等,pH計是無法準確測量其pH值的。那么,有沒有簡

    重組細胞因子和蛋白常見問題解答(FAQ)

    1.PeproTech細胞因子和蛋白產品的穩定性如何?答:除非在產品說明書中特別注明,PeproTech的所有產品均為凍干粉,它們在室溫條件下非常穩定(至少1個月)。盡管如此,我們還是建議您在收到我們的產品后保存于-20oC,以確保蛋白100%的活性。對于大多數蛋白,重懸后在4oC僅能短期保存(約1

    重組細胞因子的凍干狀態

    重組細胞因子的凍干狀態與市場上已有的其他蛋白產品不同,PeproTech細胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等),而是以低鹽的形式做凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層。PeproTech的質控過程確保每管裝

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    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of rabbit anti-murine RELMβ by Peprotech.實驗步驟The following protocol used B6 mice

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    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of rabbit anti-murine RELMα by Peprotech.實驗步驟The following protocol used B6 mice

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    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of rabbit anti-murine leptin by Peprotech.實驗步驟The following protocol used Trichur

    immunofluorescence-of-rabbit-antimurine-VEGF-by-Peprotech

    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of rabbit anti-murine VEGF by Peprotech.實驗步驟The following protocol used normal muri

    細胞因子重組要求及狀態

      重組細胞因子要求:  1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。  2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。  3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo

    PeproTech類器官培養操作的答疑解惑

    類器官(organoids)是一種利用具有干性潛能的細胞體外培養出的3D細胞培養物。由于與對應的器官擁有高度相似的組織學特征,具有自我更新和自我組織能力,并能重現該器官的部分生理功能,因此類器官可作為多種疾病的體外模型,在干細胞與發育、再生醫學、疾病研究、藥物開發和精準醫療等多個方面擁有廣泛的應用前

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    特殊物種的細胞因子的選擇與攻克難題判斷種屬交叉反應的關鍵細胞因子是由免疫細胞(淋巴細胞、單核-巨噬細胞等)和相關細胞(成纖維細胞、內皮細胞等)產生的調節細胞功能的高活性多功能多肽或蛋白質分子,通過結合細胞表面的相應受體發揮生物學作用。不同哺乳動物在進化過程中其分泌的細胞因子氨基酸序列存在差異,這就告

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    實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of mouse anti-human IL-6 by Peprotech.實驗步驟The following protocol used human endomet

    好消息PeproTech-ELISA操作指南視頻已上傳

    ? ? ?美國PeproTech (派普泰克)?公司是世界上領先的重組細胞因子和蛋白生產商,同時也生產多種細胞因子和蛋白的ELISA法檢測試劑盒,詳細信息請查看www.peprotech.com,或與PeproTech中國代表處?(電話:0512-6832 5993,Email:china@pepr

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    實驗概要The following protocol provides a method of immunohistochemistry of mouse anti-human Eotaxin-2 by Peprotech.實驗步驟The following protocol used formal

    細胞因子受體、細胞因子與疾病

      1.細胞因子受體  細胞因子通過結合特異性受體發揮生物學作用。細胞因子受體均為跨膜分子,由胞膜外區、跨膜區和胞質區組成。細胞因子和細胞因子受體的結合后啟動細胞內的信號轉導,使細胞發生分化或功能改變。  多種細胞因子受體都有非膜型的游離受體。  趨化因子受體CCR5是HIV的受體。  2.細胞因子

    細胞因子

    細胞因子是由免疫細胞產生的一大類能在細胞問傳遞信息,具有免疫調節和效應功能的蛋白質或小分子多肽。  1.共同特性  (1)化學性質大都為糖蛋白。  (2)細胞因子可以旁分泌、自分泌或內分泌的方式發揮作用。  (3)一種細胞可產生多種細胞因子,不同類型的細胞可產生一種或幾種相同的細胞因子。  2.類型

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