腫瘤細胞的培養（四）
四、提高腫瘤細胞培養存活率和生長率措施 根據人們的經驗，腫瘤細胞在體外不易培養，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后，常出現以下幾種情況： 完全無細胞游出或移動； 有細胞移動和游出，但無細胞增殖，細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代； 有細胞增殖，傳若干代后停止生長或衰退死亡； 傳數代后細胞增殖緩慢，經過一段停滯期后，才又呈旺盛生長狀態，形成穩定生長的腫瘤傳代細胞系。 以上現象說明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求，并需經過對新環境的適應才能生長，因此欲獲得好的培養效果，不能局限于一般培養法，必須采用一些特殊的措施。 1．適宜底物：把經過純化的細胞接種在不同的底物上，如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。 2．生長因子：應用促細胞生長因子，向培養液中增加一種或幾種促細胞生長因子。根據細胞種類不同選用不同的促生長物，常用有胰島素、氫化可的松、雌激素以及其它生長因子。 為提高腫瘤細胞對體外培養環境的適應力和增加有活力癌......閱讀全文
腫瘤細胞培養
食管癌細胞株表達MMP－2：1.細胞種類：食管癌細胞株；2.培養的天數：2d;細胞倍增時間--24h左右；3.放大倍速：倒置熒光顯微鏡，100倍；4.培養基種類：1640+10%胎牛血清；5.細胞狀態與特征簡述:細胞貼壁生長；6.圖片目的：鑒定食管癌細胞表達MMP-2，胞漿中綠色熒光為MMP-2，細
腫瘤細胞培養
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
腫瘤細胞培養實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 培養液Hanks胰蛋白酶EDTA膠原酶儀器、耗材 培養瓶離心管實驗步驟 一、成纖維細胞排除法1. ?機械刮除法?是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲），或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為（1）標記鏡下
腫瘤細胞的培養（三）
三、成纖維細胞排除法 1．機械刮除法： 是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲）、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為： （1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位； （2）刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸
腫瘤細胞的培養（二）
二、培養方法 腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。 1．取材： 人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞
腫瘤細胞培養方法
腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1、取材：人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區，取材時盡量避
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于：（1）研究腫瘤的發生機理；（2）研究生物學行為；（3）研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
腫瘤細胞的培養（一）
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。 一、組織培養腫瘤細胞生物學特性 腫瘤細胞與體
腫瘤細胞的培養方法
腫瘤細胞培養成功關鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面，腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別，初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1．取材：人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區，取材時盡量避
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗 提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃
腫瘤細胞的培養（四）
四、提高腫瘤細胞培養存活率和生長率措施 根據人們的經驗，腫瘤細胞在體外不易培養，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后，常出現以下幾種情況： 完全無細胞游出或移動； 有細胞移動和游出，但無細胞增殖，細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代； 有細胞增殖，傳若干代后停止生長或衰退死亡
培養腫瘤細胞用什么培養基
腫瘤細胞最好培養了，M199，RPMI-1640，DMEM都可以。我常用的是1640.
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血
結腸直腸腫瘤細胞的培養
通常用酶消化腺瘤，用手術刀片將癌組織切碎。如果分化良好的結腸直腸癌標本切開后仍不易分離細胞，可用酶消化方法分離。實驗方法原理通常用酶消化腺瘤，用手術刀片將癌組織切碎。如果分化良好的結腸直腸癌標本切開后仍不易分離細胞，可用酶消化方法分離。實驗材料用于傳代培養的Dispase試劑、試劑盒生長培養液洗液消
結腸直腸腫瘤細胞的培養
實驗方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手術刀片將癌組織切碎。如果分化良好的結腸直腸癌標本切開后仍不易分離細胞，可用酶消化方法分離。實驗材料 用于傳代培養的Dispase試劑、試劑盒 生長培養液洗液消化液儀器、耗材 培養瓶實驗步驟 一、酶消化1. 用洗液（洗液：添加 5% FBS、200 U/ml 青霉素
結腸直腸腫瘤細胞的培養
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手術刀片將癌組織切碎。如果分化良好的結腸直腸癌標本切開后仍不易分離細胞，可用酶消化方法分離。 實驗材料 用于傳代培養的D
結腸直腸腫瘤細胞的培養
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手術刀片將癌組織切碎。如果分化良好的結腸直腸癌標本切開后仍不易分離細胞，可用酶消化方法分離。 實驗材料 用于傳代培養的D
腫瘤細胞培養技術要點
取材材料主要來源于外科手術或活檢瘤組織，取材時避免用壞死組織，要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位，瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養材料。取材后盡快培養，因故不能立即培養者，可凍存。其培養方法及凍存方法同前述正常組織。成纖維細胞排除在腫瘤組織中常混雜有一些成纖維細胞，培養時能與瘤細胞同時生長，并常壓過
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血
腫瘤細胞原代培養實驗
實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血清濃度即可，在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養。根據細胞種類不同選用
細胞生物基本方法：腫瘤細胞培養
腫瘤細胞培養特殊之處在于成纖維細胞的排除（成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長，致難以純化腫瘤組織）。有以下一些方法：1．機械刮除法2．反復帖壁法3．消化排除法4．膠原酶消化法?1）??機械刮除法1．標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位。2．刮除：棄掉培養液，把無菌膠刮伸入
組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養1
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。 一、組織培養腫瘤細胞生物學特性 腫瘤
組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養2
2．培養基： 腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格，一般常用的 RPMIl640、 ?DMEM、Mc-Coy5A等培養基等皆可用于腫瘤細胞培養。腫瘤細胞對血清的需求比正常細胞低，正常細胞培養不加血清不能生長，腫瘤細胞在低血清培養基中也能生長。腫瘤細胞對培養環境適應性較大，是因腫瘤細胞有自泌（Aut
組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養3
5．其它方法：有人發現聚丙烯酰胺有抑制成纖維細胞生長的作用；也有人用聚蔗糖制備成比重1.025～1.085的密度梯度離心液，加入細胞懸液后，在 23℃中800g離心 10分種。在比重1.025～1.050層為成纖維細胞，在比重1.050～1.085層為上皮細胞，再經過分離進行培養。最近也有人
腫瘤細胞的原代培養方法
腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格，一般常用RPMI、DMEM、McCoy-5A等培養基，血清濃度不高，10%即可，建議最好在原代培養時能加入生長因子或原患者血清（1%-2%）以利細胞生長。培養方法很多，主要有組織塊法、酶消化法、鉭網法、脫落細胞法等。1.組織塊法將取得的瘤組織去除脂肪、結締組織
細胞技術專題：腫瘤細胞原代培養實驗
腫瘤細胞原代培養可以：（1）研究癌變機理；（2）研究抗癌藥檢測；（3）研究癌分子生物學；（4）用于闡明和解決癌癥。詳細 實驗方法實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血清濃度即可，在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物，或原患者血清
腫瘤細胞原代培養實驗——脫落細胞法
實驗方法原理脫落細胞法是指采集人體各部位，特別是管腔器官表面的脫落細胞進行培養。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒完全培養基洗滌液儀器、耗材刀片培養箱培養皿實驗步驟一、將新鮮的腫瘤組織去除脂肪和結締組織。二、洗液洗2次后，用刀片將腫瘤組織切成細薄片。三、在切割的同時有許多上皮細胞脫落下來，脫落細胞經洗滌后
原代腫瘤細胞的選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選...
原代腫瘤細胞的選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗飼養層技術取決于通過其他接觸抑制細胞形成的單層預防成纖維細胞的過度生長。 飼養層技術并不能選擇性抑制正常上皮細胞， W為正常表皮細胞和正常乳腺上皮都能在 匯合的伺養層上形成克隆。然而，神經膠質瘤研究的結果表明，在同種飼養層上選擇培養等同的正常細胞是
原代腫瘤細胞選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗
實驗方法原理在指數生長中期，用絲裂霉素C處理飼養層細胞，將細胞培養形成匯合的單層。通過膠原蛋白酶消化從活檢標本分離腫瘤細胞，或者用胰蛋白酶消化從原代培養物獲得腫瘤細胞，然后將腫瘤細胞接種到匯合的單層上（圖24.1）。上皮性腫瘤細胞可以在3周至3個月內形成克隆。纖維肉瘤和神經膠質瘤并不總是形成克隆，而
原代腫瘤細胞的選擇性培養：匯合飼養層腫瘤細胞篩選
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在指數生長中期，用絲裂霉素C處理飼養層細胞，將細胞培養形成匯合的單層。通過膠原蛋白酶消化從活檢標本分離腫瘤細胞，或者用胰蛋白酶消化從原代培養物獲得腫瘤細胞，然后將腫瘤細胞接種到匯合的單層上（圖24.1）。上皮性腫瘤細胞可以在3