原代腫瘤細胞的選擇性培養:匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗飼養層技術取決于通過其他接觸抑制細胞形成的單層預防成纖維細胞的過度生長。 飼養層技術并不能選擇性抑制正常上皮細胞, W為正常表皮細胞和正常乳腺上皮都能在 匯合的伺養層上形成克隆。然而,神經膠質瘤研究的結果表明,在同種飼養層上選擇培養等同的正常細胞是可能的。方案 24.1 匯合飼養層腫瘤細胞篩選實驗實驗方法原理 在指數生長中期,用絲裂霉素C處理飼養層細胞,將細胞培養形成匯合的單層。通過膠原蛋白酶消化從活檢標本分離腫瘤細胞,或者用胰蛋白酶消化從原代培養物獲得腫瘤細胞,然后將腫瘤細胞接種到匯合的單層上(圖24.1)。上皮性腫瘤細胞可以在3周至3個月內形成克隆。纖維肉瘤和神經膠質瘤并不總是形成克隆,而可侵入飼養層,并逐漸過渡生長。實驗材料 3T3細胞STO細胞10T1 2 細胞試劑、試劑盒 生長培養液膠原蛋白酶胰蛋白酶儀器、耗材 手術刀 Petri 培養皿實驗步驟 一、材料無菌&nbs......閱讀全文
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置,首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單克隆抗體包括動物免疫
淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術 實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨
實驗方法原理1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單
實驗方法原理 1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤
2. HAT選擇雜交瘤 一般在融合24 小時后,加HAT選擇培養液。HT和HAT均有商品化試劑50×貯存,用時1 ml加入50 ml20 %小牛血清完全培養液中。 因為在培養板內已加入飼養細胞、融合后的細胞,200 μl/孔。所以在加選擇培養液時應加3倍量的HAT。我
單克隆抗體的制備實驗可以用于:(1)將產生抗體的單個B淋巴細胞同骨髓腫瘤細胞雜交, 獲得既能產生抗體, 又能無限增殖的雜種細胞,并以此生產抗體;(2)該技術是僅由一種類型的細胞制造出來的抗體,對應于多克隆抗體、多株抗體——由多種類型的細胞制造出來的一種抗體。實驗方法原理單克隆抗體技術(monoclo
二、培養方法 腫瘤細胞培養成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別,初代培養應用組織塊和消化培養法均可。 1.取材: 人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞
國家自然科學基金委員會公布了2012年度面上項目、重點項目、重大國際(地區)合作研究項目、青年科學基金項目、地區科學基金項目、海外及港澳學者合作研究基金項目、科學儀器基礎研究專款項目等方面的評審結果。有關評審結果將通知相關依托單位,其科研管理人員可登錄科學基金網絡信息系統(https:
趨化因子及其受體的功能免疫細胞的定向遷移是機體免疫應答發生和完成的必須條件。趨化因子是一類控制細胞定向遷移的細胞因子。其功能行使由趨化因子受體介導。趨化因子與其受體的相互作用控制著各種免疫細胞在循環系統和組織器官間定向遷移, 使之到達感染、創傷和異常增殖部位, 執行清
2012年4月21日下午,全國生物醫藥色譜及相關技術學術交流會各分會在美麗的重慶大學虎溪校區陸續展開。以下是“生化與醫藥分會”的精彩內容,來自各著名高校、研究院所的專家、老師,就色譜新技術、新觀念以及在藥品、蛋白質、天然產物等分析、分離方面的應用進行了深入的交流。分
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗 實驗步驟
本期為大家帶來2019年8月Science子刊重磅研究成果,希望讀者朋友們喜歡。 【1】Science子刊:新研究揭示阿爾茨海默病中的內體運輸缺陷的真正元兇 DOI:10.1126/scitranslmed.aaz0730 罕見的家族性阿爾茨海默病(familial Alzheimer
“十三五”期間,通過支持我國優勢學科和交叉學科的重要前沿方向,以及從國家重大需求中凝練可望取得重大原始創新的研究方向,進一步提升我國主要學科的國際地位,提高科學技術滿足國家重大需求的能力。各科學部遴選優先發展領域及其主要研究方向的原則是: (1)在重大前沿領域突出學科交叉,注重多學科協同攻關,
單克隆技術又名雜交瘤技術。由G.K?hler和Milstein1975年創立。主要原理是利用產生抗體的B細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產抗體。 單克隆抗體的制備過程主要有以下六個環節,具體為抗原指標、免疫動物選擇、免疫程序的確定、免疫、細胞雜交與選擇培養。下面詳細介紹單
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突變和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表達和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
細胞是構成人體的基本單位。一個成年人的細胞數量大約是10的13次方,而與人體共生的細菌比人體細胞還要多10倍,其中腸道菌群就包含了500-1000種不同的細菌。早在1886年,就有學者發現了大腸桿菌對消化有輔助作用。由此而展開的,對大腸桿菌、雙歧桿菌等常見腸道菌的發現和功能探索也開啟了早期人類對
分析測試百科網訊 2017年8月24日,第三屆全國樣品制備學術報告會在昆明召開(相關報道:第三屆全國樣品制備會在春城開幕 樣品處理再現新技術)。在第一天的大會報告后(相關報道:第三屆全國樣品制備會大會報告一 新方法層出不窮),8月25日,大會還邀請到湖南大學化學化工學院院士譚蔚泓做大會特邀報告,
國家自然科學基金委員會副主任 中國化學會理事長 中國科學院院士 姚建年 改革開放30年來,與國內各行各業一樣,我國的化學科學研究獲得了全方位發展,步入了高速發展時期,無論在基礎、應用基礎研究還是成果轉化、實現產業化
實驗方法原理活體生物發光成像技術的原理:在小型哺乳動物體內利用報告基因(熒光素酶基因)表達所產生的熒光素酶蛋白與其小分子底物熒光素在氧、Mg2+存在的條件下消耗ATP發生氧化還原反應,將部分化學能轉化為可見光能釋放。因此只有在活細胞內才會發生發光現象。并且光的強度與標記細胞的數目線性相關。實驗材料裸
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
糞便是由未消化的食物、經消化后未吸收的食物殘渣與消化系統分泌物、消化道粘膜脫落物以及微生物、寄生蟲等組成的混合物。進行糞檢驗可以獲得被檢者消化系統功能、病理變化以及微生物和寄生蟲感染等廣泛的信息,具體來說,進行糞檢驗,一可以了解消化道及通向消化道的肝、膽胰等器官是否有梗阻、炎癥和出血等
胚胎干細胞,是一種具有持久更新能力的細胞,它能夠或發育成幾乎所有人類的各種組織或器官,故其在醫學上具有非常重要的研究價值與應用前景。 人胚胎干細胞是在人胚胎發育早期——囊胚(受精后約5—7天)中未分化的細胞。囊胚含有約140個細胞,外表是一層扁平細胞,稱滋養層,可發育成胚胎的支持組織如胎盤等。中
前言自然殺傷細胞(Nature Killer Cells, NK)是骨髓衍化的淋巴細胞,其最初通過巨大的顆粒性狀被識別。NK細胞能自發殺滅多種腫瘤細胞,同時還可保護正常的細胞,從而被認為是癌癥的克星。最重要的是,不管是在胞內還是胞外,NK細胞不需要免疫接種或提前激活,就能夠自發溶解特定的腫瘤靶細胞,
隨著基礎醫學深入研究,高新科技檢測技術在檢驗醫學的廣泛應用,使國內血液各項檢查項目水平明顯提高,但相比之下,先進的技術及方法在體液學常規檢查中應用較少,為了提高我國體液學檢測水平,現將近年來國內外進展綜述如下。 一、尿液沉渣檢查及尿液蛋白分析 1.尿沉渣檢驗方法學進展主要是顯微鏡檢查的標準化和沉
【51/52】2019年4月4日,清華大學柴繼杰課題組、中科院遺傳發育所周儉民課題組和清華大學王宏偉課題聯合同期背靠背發表兩篇重量級Science文章,完成了植物NLR蛋白復合物的組裝、結構和功能分析,揭示了NLR作用的關鍵分子機制,是植物免疫研究的里程碑事件。兩篇文章分別是: "Li
【50】2019年4月12日,中科院上海藥物所徐華強,王明偉,浙江大學張巖及匹茲堡大學醫學院Jean-Pierre Vilardaga共同通訊在Science發表題為“Structure and dynamics of the active human parathyroid hormone r
截至2019年12月23日,中國學者在Cell,Nature及Science在線發表了107篇文章(2019年的Cell ,Nature 及Science 已經全部更新),iNature團隊對于這些文章做了系統的總結: 按雜志來劃分:Cell 發表了31篇,Nature 發表了44篇,Scie
慢性應激與抑郁癥發病機理研究進展摘 要: 慢性應激生活事件是導致抑郁癥的危險因素。慢性不可預測應激( CUS) 能夠誘導類似抑郁的行為,包括被動的行為應對、快感缺乏、以及許多其他情感上、認知上的行為癥狀。同時,慢性應激也表現出對成年海馬神經的負面調控,應激可以使成年海馬神經的細胞增殖降低,重癥抑
成像新策略的出現改進探針親和性的多種途徑探針同靶點的緊密和特異性結合通常是成像成功的關鍵。因為許多成像靶點都位于細胞表面之外,所以多途徑原則可以用來改善探針的結合親和性。最近有兩篇文獻報道了用于異種移植腫瘤αvβ3 整合素(integrin)體內成像的RGD(Arg-Gly-Asp )寡肽的