激光掃描共聚焦顯微鏡在生命科學中的應用
實驗目的與要求1. 掌握激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理及其在生命科學中的應用。一、激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理1.普通熒光顯微鏡的不足 使用熒光物質標記細胞中的特定成分或結構,不僅圖像與對比度增強,而且由于許多熒光顯微鏡的光源使用短波長的紫外光,大大提高了分辯率(δ=0.61 λ/ NA )。但當所觀察的熒光標本稍厚時,普通熒光顯微鏡不僅接收焦平面上的光量,而且來自焦平面上方或下方的散射熒光也被物鏡接收,這些來自焦平面以外的熒光使觀察到的圖像反差和分辨率大大降低(即焦平面以外的熒光結構模糊、發虛,原因是大多數生物學標本是層次區別的重疊結構)。Laser Scanning Confocal Microscope2. 共聚焦掃描顯微鏡的成像原理采用點光源照射標本,在焦平面上形成一個輪廓分明的小的光點,該點被照射后發出的熒光被物鏡收集,并沿原照射光路回送到由雙向色鏡構成的分光器。分光器將熒光直接送到探測器。光......閱讀全文
激光共聚焦掃描顯微鏡
對比激光共聚焦掃描顯微鏡與傳統光學顯微鏡在高放大倍率下的成像效果。結果顯示,激光共聚焦掃描顯微鏡在高放大倍率下,其成像景深大的優點對于獲取高質量的圖像有很大的幫助。同時通過激光共聚焦掃描顯微鏡的激光光源實現單色光成像,可以清晰觀察到濺鍍了消影層的ITO玻璃。
激光掃描共聚焦顯微鏡在生物及醫學研究中的應用
在生物及醫學研究中的應用? ? ??隨著激光共聚焦掃描技術的不斷發展和完善,LSCM?在生物學及醫學相關領域的應用越來越廣泛和深入,已經滲透到分子生物學、基因組學、細胞生物學、病毒學、細菌學、組織生物學、胚胎學、免疫學、病理學、流行病學、皮膚病學、腫瘤等相關分支領域。通過它可以直接觀測到細胞形態學的
激光掃描共聚焦顯微鏡的掃描模塊
掃描模塊主要由針孔光欄(控制光學切片的厚度)、分光鏡(按波長改變光線傳播方向)、發射熒光分色器(選擇一定波長范圍的光進行檢測)、檢測器(光電倍增管)組成。熒光樣品中的混合熒光進入掃描器,經過檢測針孔光欄、分光鏡和分色器選擇后,被分成各單色熒光,分別在不同的熒光通道進行檢測并形成相應的共焦圖象,同
激光掃描共聚焦顯微鏡的應用功能簡介
激光掃描共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先進的細胞生物醫學分析儀器之一。它是在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激光熒光探針,利用計算機進行圖像處理,不僅可觀察固定的細胞、組織切片,還可對活細胞的結構、
激光掃描共聚焦顯微鏡技術的主要應用范圍
三者都是點源逐點掃描成像,通過控制掃描驅動范圍,調節放大倍數,主要區別1、極限分辨率不同,緣于放大信號源的差異激光共聚焦:極限分辨率150nm.掃描電鏡:20nm~0.8nm.原子力顯微鏡:極限分辨率0.1nm2、掃描驅動方式不同激光共聚焦:激光轉鏡控制激光掃描范圍和掃描速度。掃描電鏡:電磁線圈控制
共聚焦激光掃描顯微鏡的應用及熒光探針
一、LSCM常用的檢測內容及其熒光探針 LSCM檢測內容和應用范圍非常廣泛,以下僅簡單介紹LSCM常用的檢測內容及其熒光探針。 1.細胞內游離鈣 共聚焦激光掃描顯微鏡常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前兩者為單波長激光探針,利用其單波長激發特點可直接測量細胞內Ca
激光掃描共聚焦顯微鏡技術的主要應用范圍
激光掃描共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先進的細胞生物醫學分析儀器之一。目前,激光掃描共聚焦顯微技術已用于細胞形態定位、立體結構重組、動態變化過程等研究,并提供定量熒光測定、定量圖像分析等實用研究手段,結合其他相關生物技術,在
激光掃描共聚焦顯微鏡的激光共聚焦顯微鏡結構
激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。系統經一次調焦,掃描限制在樣品的一個平面內。調焦深度不一樣時,就可
激光掃描共焦顯微鏡技術
l 樣品要求:1.經熒光探劑標記(單標、雙標、三標)2.固定的或活的組織3.固定的或活的貼壁培養細胞(Confocal專用小培養皿,蓋玻片)4.懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封一. 組成倒置或直立熒光顯微鏡、掃描頭(照明針孔、探測針孔、熒光濾片系統、鏡掃描系統和光電倍增管)、掃描頭控制電路、計算機
激光聚焦顯微鏡在大腦和神經科學中的應用
在大腦和神經科學中的應用激光掃描共聚焦顯微鏡分層掃描發現神經軸突的內部結構連續性好。用激光掃描共聚焦顯微鏡能觀察到腦干組織中神經軸突的正常走向,可排除在熒光顯微鏡下由此造成的一些病理假象。并且激光掃描共聚焦顯微鏡能觀察神經軸突的三維結構,因此應用 CLSM 有可能觀察到普通光鏡下未能發現的神經組織的
激光掃描共聚焦顯微鏡在分子生物學基礎研究中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡應用照明針與檢測孔共軛成像,有效抑制了焦外模糊成像并可對標本各層分別成像,對活細胞行無損傷的“光學切片”這種功能也被形象的稱為“顯微 CT”。CLSM 還可以對貼壁的單個細胞或細胞群的胞內、胞外熒光作定位、定性、定量及實時分析,并對胞內成分如線粒體、內質網、高爾基體、DNA、RN
激光掃描共聚焦顯微鏡應用組織和細胞中的定量熒光測定
激光掃描共聚焦顯微鏡可以從固定和熒光染色的標本以單波長、雙波長或多波長模式,對單標記或多標記的細胞及組織標本的共聚焦熒光進行數據采集和定量分析,同時還可以利用沿縱軸上移動標本進行多個光學切片的疊加, 形成組織或細胞中熒光標記結構的總體圖像,以顯示熒光在形態結構上的精確定位。 常用于原位分子雜交、腫瘤
激光掃描共聚焦顯微鏡在生物醫學中的發展與應用
? ? ??1665?年,第一臺光學顯微鏡的問世,為人類打開了微觀世界的大門,成為研究生物器官、組織和細胞的重要工具,極大地推動了生命科學相關領域的發展。隨著現代科學技術的飛速發展,以及醫療、生命科學、材料科學以及相關工業領域等的廣泛應用需求,人們對微觀事物的認知要求已不僅局限于二維圖像觀測,同時需
激光掃描共聚焦顯微鏡展望
LSCM?有著獨特的激光掃描成像方式及精確的計算機測量定位系統,是普通顯微鏡和電子顯微鏡的飛躍和補充,加上高分辨率、高靈敏度和靈活性空間結構觀察的獨特優勢,其成為生命科學、醫學以及材料科學相關的諸多重要分支領域的全新科研實驗手段和必備研究工具之一,為許多研究者提供了有力的技術支持和新的探索思路。目前
激光掃描共聚焦顯微鏡共享
儀器名稱:激光掃描共聚焦顯微鏡儀器編號:A23000005產地:日本生產廠家:Olympus型號:FV3000RS出廠日期:20230216購置日期:20230216所屬單位:化學系>分析中心>光學顯微成像放置地點:清華大學生命科學館141固定電話:01062771139固定手機:131216495
激光掃描共聚焦顯微鏡背景
激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope)是20世紀80年代中期發展起來并得到廣泛應用的新技術 ,它是激光、電子攝像和計算機圖像處理等現代高科技手段滲透,并與傳統的光學顯微鏡結合產生的先進的細胞分子生物學分析儀器,在生物及醫學等領域的應用越來越廣
激光掃描共聚焦顯微鏡簡介
激光掃描共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,簡稱CLSM)是近代生物醫學圖象儀器。它是在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發熒光探針。 利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖象,以及在亞細胞水平上
激光掃描共聚焦顯微鏡在腫瘤和血液疾病等方面的應用
在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應用 普通顯微鏡及電子顯微鏡,僅能對腫瘤相關抗原進行定性分析,而 CLSM 則可對單標記或者多標記細胞、組織標本及活細胞進行重復性極佳的熒光定量分析,從而對腫瘤細胞的抗原表達、細胞結構特征,抗腫瘤藥物的作用及機制等方面定量化。 在血液病學和醫學免疫學研究中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡在腫瘤和血液疾病等方面的應用
在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應用 普通顯微鏡及電子顯微鏡,僅能對腫瘤相關抗原進行定性分析,而 CLSM 則可對單標記或者多標記細胞、組織標本及活細胞進行重復性極佳的熒光定量分析,從而對腫瘤細胞的抗原表達、細胞結構特征,抗腫瘤藥物的作用及機制等方面定量化。 在血液病學和醫學免疫學研究中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡的問題
激光掃描共聚焦顯微鏡中各種樣品串色的問題及其校正在圖 5 中顯示。圖 5( a)中的纖維原細胞, Alexa Fluor488 綠色熒光串色進入 Mito Tracker 紅色通道,當樣品用 488 激光和 543 激光同時掃描時,會產生黃色的肌動蛋白絲。序列掃描和檢測(圖 5d)消除了串色影響。同
激光器應用——激光掃描共聚焦顯微
iFLEX激光器應用——激光掃描共聚焦顯微1,什么是激光掃描共聚焦顯微共聚焦顯微技術是近十幾年迅速發展起來的一項高新研究技術,目前應用領域擴展到細胞學、微生物學、發育生物學、遺傳學、神經生物學、生理和病理學等學科的研究工作中,成為現代生物學微觀研究的重要工具。激光掃描共聚焦顯微鏡的主要是利用激光掃描
激光掃描共聚焦顯微鏡應用細胞間通訊的研究
動物和植物細胞中縫隙連接介導的胞間通信在細胞增殖和分化中起著重要作用。 激光掃描共聚焦顯微鏡可通過觀察細胞縫隙連接分子的轉移來測量傳遞細胞調控信息的一些離子、小分子物質。 該技術可以用于研究胚胎發生、生殖發育、神經生物學、腫瘤發生等過程中縫隙連接通訊的基本機制和作用,也可用于鑒別對縫隙連接作用有潛在
激光掃描共聚焦顯微鏡在組織化學免疫組織化學中的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confcal microscope,LSCM)是激光、電子攝像和計算機圖像處理等現代高科技手段相互滲透的產物。由于其高分辨率,高靈敏度及高放大率等特點,在細胞水平上能作多種功能測量和分析,如熒光定量測量、共聚焦圖像分析、三維圖像重建、活細胞動力學
激光掃描共焦顯微鏡功能介紹
激光掃描共焦顯微鏡與激光掃描熒光顯微鏡結構非常相似,但是由于采用了共焦技術因而更具優越性。這種方法可以在熒光標記分子與DNA芯片雜交的同時進行雜交信號的探測,而無須清洗掉未雜交分子,從而簡化了操作步驟大大提高了工作效率。Affymetrix公司的S.P.A.Forder等人設計的DNA芯片即利用此方
什么是共焦激光掃描顯微鏡
由德國卡爾·蔡司公司生產的這種顯微鏡,把激光光束聚焦到生物樣品的某個平面,而把該面前后的離焦光束擋掉。這種被稱作“光學截面制圖”的技術,可以將不同聚焦程度的圖像重迭,焦深很大。系統分辨率達0.2微米。尤其是它的三維成像能力,使研究人員可以在原生物樣品中“旅游”,或確定吸收熒光染色的細胞組織位置。因此
激光掃描共聚焦顯微鏡在細胞及分子生物學的應用
激光掃描共聚焦顯微鏡應用照明針與檢測孔共軛成像,有效抑制了焦外模糊成像并可對標本各層分別成像,對活細胞行無損傷的“光學切片”這種功能也被形象的稱為“顯微 CT”。CLSM 還可以對貼壁的單個細胞或細胞群的胞內、胞外熒光作定位、定性、定量及實時分析,并對胞內成分如線粒體、內質網、高爾基體、DNA、
激光掃描共聚焦顯微鏡中檢測裝置
激光掃描共聚焦顯微鏡中檢測裝置激光掃描共聚焦顯微鏡中檢測裝置恢測器的主要作用是將接收到的光俏早轉化戊電信l儀轉視處理形成圖像,所以彼則器的性能和類型對于提高圖像質量也分關歪要。檢測器圖像質量產生的十要固累是給十效率(QH)和啪聲水平。其他廳面處有允譜范閑、動想范附和線性等。臣子效率是指到達檢測器的光
Olympus-激光掃描共聚焦顯微鏡共享
儀器名稱:激光掃描共聚焦顯微鏡儀器編號:A23000005產地:日本生產廠家:Olympus型號:FV3000RS出廠日期:20230216購置日期:20230216樣品要求:共聚焦小皿、載玻片、玻璃底多孔板等所屬單位:化學系>分析中心>光學顯微成像放置地點:清華大學生命科學館141固定電話:010
激光掃描共聚焦顯微鏡技術原理
光學顯微鏡作為細胞生物學的研究工具,可以分辨出小于其照明光源波長一半的細胞結構。隨著光學、視頻、計算機等技術飛速發展而誕生的激光掃描共聚焦顯微鏡 (Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),則使現代顯微鏡有能力研究和分析細胞在變化過程中的結構。特別是
激光掃描共聚焦顯微鏡操作步驟
觀察步驟及儀器操作 ?根據實驗要求制備樣品完畢后。即可進行觀察。基本步驟如下:?(1)開啟儀器電源及光源:一般先開啟顯微鏡和激光器,再啟動計算機,然后啟動操作軟件,設置熒光樣品的激發光波長,選擇相應的濾光鏡組塊。以便光電倍增管(photo multiplier tube,PMT)檢測器能得到足夠的信