掃描電子顯微鏡樣品制備實驗
實驗方法原理 1. 生物樣品的精細結構易遭破壞。因此在進行制樣處理和進行電鏡觀察前必需進行固定。以使其能最大限度地保持其生活時的形態。而采用水溶性、低表面張力的有機溶液如乙醇等對樣品進行梯度脫水，也是為了在對樣品進行干燥處理時盡量減少由表面張力引起的其自然形態的變化。2. 目前采用最多、效果最好的方法是臨界點干燥法。其原理是在一裝有溶液的密閉容器中，隨著溫度的升高，蒸發速率加快，氣相密度增加。液相密度下降。當溫度增調到某一定值時，氣、液二相密度相等，界面消失，表面張力也就不存在了。此時的溫度及壓力即稱為臨界點。將生物樣品用臨界點較低的物質置換出內部的脫水劑進行干燥，可以完全消除表面張力對樣品結構的破壞。目前用得最多的置換劑是二氧化碳。由于二氧化碳與乙醇的互溶性不好，因此樣品經乙醇分級脫水后還需用與這兩種物質都能互溶的「媒介液」醋酸戊脂置換乙醇。實驗材料 大腸桿菌斜面／懸浮液試劑、試劑盒 液態二氧化碳 1％～2％ 戊二醛磷......閱讀全文
掃描電子顯微鏡樣品制備實驗
實驗方法原理1. 生物樣品的精細結構易遭破壞。因此在進行制樣處理和進行電鏡觀察前必需進行固定。以使其能最大限度地保持其生活時的形態。而采用水溶性、低表面張力的有機溶液如乙醇等對樣品進行梯度脫水，也是為了在對樣品進行干燥處理時盡量減少由表面張力引起的其自然形態的變化。2. 目前采用最多、效果最好的方法
掃描電子顯微鏡樣品制備實驗
實驗方法原理 1. 生物樣品的精細結構易遭破壞。因此在進行制樣處理和進行電鏡觀察前必需進行固定。以使其能最大限度地保持其生活時的形態。而采用水溶性、低表面張力的有機溶液如乙醇等對樣品進行梯度脫水，也是為了在對樣品進行干燥處理時盡量減少由表面張力引起的其自然形態的變化。2. 目前采用最多、效果
掃描電子顯微鏡樣品要求及制備－(一)－－常規樣品制備
樣品制備對掃描電鏡觀察來說也至關重要，樣品如果制備不好可能會對觀察效果有重大影響。通常希望觀察的樣品有盡可能好的導電性，否則會引起荷電現象，導致電鏡無法進行正常觀察；另外樣品還需要有較好的導熱性，否則轟擊點位置溫度升高，使得試樣中的低熔點組分揮發，形成輻照損傷，影響真實的形貌觀察。如果要進行EDS/
掃描電子顯微鏡樣品制備技術
掃描電子顯微鏡樣品制備技術(preparationof specimens for scanning electron microscopy):掃描電子顯微鏡以觀察樣品的表面形態為主，因此掃描電子顯微鏡樣品的制備，必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細胞形態;③充分暴露要觀察的部位;③良好的導電性和
掃描電子顯微鏡的樣品制備
由于樣品臺的限制，SEM樣品必須足夠小，同時可能需要特殊的預處理來增加樣品的電導率和穩定性，以便樣品能夠承受高真空條件和高能電子束的轟擊。通常使用導電膠將樣品牢固地安裝在樣品臺或短柱上。SEM被廣泛用于半導體晶片的缺陷分析，制造商制造出可以檢查尺寸為300 mm的半導體晶片的任何部位的儀器。許多
掃描電子顯微鏡樣品制備技術的化學方法制備樣品
化學方法制備樣品的程序通常是：清洗→化學固定→干燥→噴鍍金屬。 為了觀察臟器或細胞內部結構，可切斷冷凍樣品，再經化學固定、導電染色、脫水和臨界點干燥及噴鍍金屬，用掃描電鏡觀察割斷表面暴露出的內部結構。冷凍割斷又包括乙醇割斷法、二甲基亞砜割斷法及冷凍斷裂法等多種。用冷凍割斷法可獲得高分辨的組織細胞內部
掃描電子顯微鏡樣品的制備技術
化學方法制備樣品 編輯 化學方法制備樣品的程序通常是：清洗→化學固定→干燥→噴鍍金屬。 清洗 某些生物材料表面常附血液、細胞碎片、消化道內的食物殘渣、細菌、淋巴液及粘液等異物，掩蓋著要觀察的部位，因而，需要在固定之前用生理鹽水或等滲緩沖液等把附著物清洗干凈。亦可用5%碳酸鈉沖洗或酶消化
掃描電子顯微鏡塊狀樣品制備方法
??? 3.1.1?塊狀試樣制備??????1．導電性材料?? 導電性材料主要是指金屬，一些礦物和半導體材料也具有一定的導電性。這類材料的試樣制備最為簡單。只要使試樣大小不得超過儀器規定（如試樣直徑最大為φ25mm，最厚不超過20mm等），然后用雙面膠帶粘在載物盤，再用導電銀漿連通試樣與載物盤（以確
掃描電子顯微鏡（SEM）樣品制備詳解
一、樣品處理的要求掃描電子顯微鏡的優勢為可以直接觀察非常粗糙的樣品表面，參差起伏的材料原始斷口。但其劣勢為樣品必須在真空環境下觀察，因此對樣品有一些特殊要求,籠統的講：干燥，無油，導電。1、形貌形態，必須耐高真空。例如有些含水量很大的細胞，在真空中很快被抽干水分，細胞的形態也發生了改變，無法對各類型
電子顯微鏡使用實驗_掃描電子顯微鏡的生物樣品制備
實驗方法原理掃描電鏡觀察時要求樣品必需干燥，并且表面能夠導電。因此，在進行掃描電鏡生物樣品制備時一般都需采用固定，脫水，干燥及表面鍍金等處理步驟。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒二氧化碳戊二醛磷酸緩沖液乙醇儀器、耗材真空鍍膜機掃描電子顯微鏡臨界點干燥器冰箱蓋玻片載玻片實驗步驟一、固定及脫水生物樣品的精細
掃描電子顯微鏡（SEM）之樣品制備篇
一、樣品處理的要求 掃描電子顯微鏡的優勢為可以直接觀察非常粗糙的樣品表面，參差起伏的材料原始斷口。但其劣勢為樣品必須在真空環境下觀察，因此對樣品有一些特殊要求,籠統的講：干燥，無油，導電。 1 形貌形態，必須耐高真空。 例如有些含水量很大的細胞，在真空中很快被抽干水分，細胞的形態也發生了改
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十五）
切片雖然尚未看出切片對分析結果的影響，但一些因素仍須予以考慮：刀在切割樣品時會逐漸磨損，應考慮在切片過程中刀刃材料消失到什么地方去了。金剛刀是純碳制成的極硬，一般不大會對樣品造成大污染，但玻璃刀含有硼、硅、鉀以及其它微量元素，必須給予注意。另外，切片時使用的液槽及其槽液，必須十分注意保持清潔。最
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十二）
固定由Yorm，Holbrook等人的研究表明：所有的固定方法，對組織中的元素自然分布都有一些影響。冷凍生物學技術對于組織里的電解質濃度影響最小，而濕的化學方法的影響最嚴重。所有的固定劑對未結合的元素和結合的元素都存在有害影響。常用的有機醛類會使細胞中的可溶性物質大量損失，如果要使用醛類作固定劑，則
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十八）
1.有一干燥室，包括一個冷凍臺，保持足夠低的溫度，同以防止冰晶的生長或再生，有充氣裝置，以讓干燥氮氣進入干燥室;2.有一個真空系統，以保持干燥室的壓力在10-100mPa之間，這通常用擴散泵和機械泵來達到;3.有一個水蒸汽吸附阱，使固體界面附近有很高的水蒸汽梯度，以提高干燥速度，最好的辦法是裝一個液
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（九）
X射線微區分析的生物樣品制備掃描電鏡除了應用二次電子像研究樣品表面形貌的主要用途外，另一個主要用途是應用特征X射線對樣品進行微區成份分析。生物樣品的X射線微區分析，是為了檢測和測量生物基質中的元素在細胞、微粒甚至生物大分子的分布情況。其中，按其難易程度可分為定性分析和定量分析兩類。定性分析的目的是斷
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（五）
組織導電法組織導電法是利用某些金屬鹽溶液對生物體中的蛋白質、脂肪類及淀粉等成分的結合作用，使樣品表面離子化或產生導電性能好的金屬化合物，從而提高樣品耐受電子束轟擊的能力和導電率。這種方法近年來國內外均有不少報道。此法的基本處理過程，是將經過固定洗凈的樣品，用特殊的試劑處理后即可觀察，具體程序見圖10
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十）
此，用干X射線微區分析的生物樣品，應該滿足以下要求：樣品的正常結構應能完好地保存;必須了解樣品中損失或者獲得的物質的化學成份及其數量;必須知道樣品中元素的重新分布和位移;樣品制備所用的化學藥品不應掩蓋被分析的元素。完全滿足上述要求是困難的，只能設法盡可能地接近。由于生物材料的類型各式各樣，如有塊狀樣
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十六）
染色和鍍膜染色過程與固定過程對成份分析的影響是相似的，都存在可溶性元素損失和引入重元素的危險，這些重元素的X射線會掩蓋或干擾被分析的元素。因此，關于固定的討論也適合于染色的過程。最好是不要進行染色。如果樣品圖像反差太弱無法識別，盡可能先用其他辦法解決，實在非染色不可時，必須十分小心。為了防止樣品局部
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（二）
?樣品的表面導電處理生物樣品和其他非金屬樣品的表面電阻率很高，在電鏡觀察時，往往容易發生荷電現象。另外，生物樣品都是由低原子序數的碳、氫、氧、氮等元素組成，二次電子的發射率很低，信號弱，難以獲得必要的圖像反差。因此，為了消除或減少以上不良現象的產生，生物樣品和非導電的樣品在掃描電鏡觀察前，均需進行表
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（三）
為了取得上述效果，所鍍的金屬膜應符合以下要求：金屬膜盡可能保持均勻的厚度，膜本身沒有結構，或者是微細到難以看出的程度。膜要薄，不會掩蓋樣品表面原來的細微結構。二次電子發射率好。膜本身不因電子轟擊而發生變化，在大氣中保存樣品不易變性(即化學穩定性好)。根據上述要求，多采用金、鈀、鉑和金一鈀、鉑一鈀及鉑
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十三）
脫水細胞和組織經過化學固定后，再經化學脫水，無疑會增加其中擴散物質的損失。乙醇、丙酮作脫水劑的影響，雖然未作嚴格的對比研究，但是似乎其差別不大.都是不太理想的脫水劑。對用于X射線微區成份分析的理想脫水劑尚未找到。改善的辦法有：用二甲氧基丙烷作脫水劑，Thorpe和Harvey用植物材料作試驗.對比二
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（八）
?碘化鉀一醋酸鉛導電法:(A)碘化鉀 20g碘 0.2g蒸餾水 l00ml(B)氫氧化鉀 4.08醋酸鉛 1.28蒸餾水加至 l00ml用時再稀釋(1份母液+3份蒸餾水)，值得注意的是：由于醋酸鉛與空氣接觸易產生沉淀，故用前應經過濾。其處理操作流程見圖10-11所示。單寧酸導電法:單寧酸也稱鞣酸，它
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十七）
?低溫制備方法利用低溫技術處理樣品時，上述在室溫制樣過程中出現的許多問題都會大大減少。冷凍生物技術在生物樣品的X射線分析研究中越來越重要，它大概是人們可望分析可溶性離子和元素的唯一途徑。冷凍固定完全是個物理過程，能夠顯著地提高某些軟生物組織的機械強度，水從液體轉變為固體，抑制了生理過程，而且最大限度
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（七）
用于組織導電的處理液應具備下列條件：能對組織起染色作用;組織結構保存完好;不會污染樣品;不掩蓋微細結構;
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十一）
室溫制備方法制備切片樣品方法的步驟與通常超薄切片法的步驟相似，也經過取樣、清洗、固定、脫水、包埋、切片和染色等步驟。然而，由于對樣品的要求兩者有較大差異，在每個步驟的做法和要求也就不大相同。下面我們簡單討論一下;?取樣和清洗一般情況下，應盡快地從實驗的機體上得到所需的組織切塊。缺氧、受力和死后變化，
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（十四）
包埋為了切片.經過固定和脫水的生物組織需用樹脂滲透和包埋.這會給X射線的分析帶來影響;由：由于滲透，樣品的質量增加.樹脂將會稀釋細胞的成份;樹脂會抽提元素并使其重新分布;包埋過程必然會給被分析的組織增加元素。如某些環氧樹脂含硫量相當高，而以環氧丙烷為基的環氧樹脂含少量的氯。甚至使用含氯量極低的ERL
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹一
品的裝臺粘膠將樣品裝固在樣品臺上，最好采用導電膠。常用的導電膠有兩種：一種是銀粉導電膠，這是一種將很細的銀粉拌在低電阻樹脂液內制成的膠水，使用較為方便，這種樹脂的絕緣電阻低，干后的電阻率僅為0.02Ω/mm，并可以被溶劑溶解還原,也有其它產品的銀粉導電膠。另一種是將石墨粉拌在低電阻樹脂液內的碳導電膠
掃描電子顯微鏡生物樣品制備技術詳細介紹（四）
離子濺射與真空鍍膜比較，它具有以下優點：粒子細，島狀結構少，約只有同一厚度的真空鍍膜的1/5～1/10，膜層均勻。對于凹凸不平較大的樣品，也能形成很好的金屬膜。在膜的平均厚度一樣時，濺射鍍膜比真空鍍膜的二次電子獲得量大得多，故濺射鍍膜的厚度可薄一些，所以能節省貴重金屬用量。所需真空度低，操作較容易，
透射和掃描電子顯微鏡樣品的制備及觀察
實驗概要本實驗詳細介紹了透射和掃描電子顯微鏡樣品的制備及觀察。主要試劑醋酸戊脂，濃硫酸，無水乙醇，無菌水，2%磷鎢酸鈉（pH6.5-8.0）水溶液，0.3%聚乙烯甲醛（溶于三氯甲烷）溶液，細胞色素c，醋酸銨，質粒pBR322。主要設備普通光學顯微鏡，銅網，瓷漏斗，燒杯，平皿，無菌滴管，無菌鑷子，大頭
透射和掃描電子顯微鏡樣品的制備及觀察
實驗概要本實驗詳細介紹了透射和掃描電子顯微鏡樣品的制備及觀察。主要試劑醋酸戊脂，濃硫酸，無水乙醇，無菌水，2%磷鎢酸鈉（pH6.5-8.0）水溶液，0.3%聚乙烯甲醛（溶于三氯甲烷）溶液，細胞色素c，醋酸銨，質粒pBR322。主要設備普通光學顯微鏡，銅網，瓷漏斗，燒杯，平皿，無菌滴管，無菌鑷子，大頭