電穿孔轉染真核細胞實驗
實驗材料 哺乳動物細胞試劑、試劑盒 完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材 電穿孔儀器電擊池實驗步驟 1. 在完全培養液中培養特轉染細胞至對數生長晚期，4℃ 640 g 離心5 min，收集細胞。 2. 將細胞沉淀用其半量體積的預冷電穿孔緩沖液重懸洗滌，4℃ 640 g 離心5 min。3. 對于穩定轉染，將細胞以1×107/ml的密度重懸于0℃的電穿孔緩沖液中。對于短暫表達，可用更高密度的細胞。4. 在冰上放置所需數量的電穿孔用的電擊池，毎池中栘入0.5 ml 細胞懸液。5. 將DNA加入冰上各電擊池的細胞懸液中。握住電擊池兩側的“窗口”，晃動其底部以混勻細胞懸液，在冰上放置5 min。 6. 將電擊池放入電穿孔裝置的架上用所設定的電壓及電容值電擊一次或多次。 7. 將電擊池置于冰上10 min。 8. &nb......閱讀全文
電穿孔轉染真核細胞實驗
實驗材料 哺乳動物細胞試劑、試劑盒 完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材 電穿孔儀器電擊池實驗步驟 1. ?在完全培養液中培養特轉染細胞至對數生長晚期，4℃ 640 g 離心5 min，收集細胞。?2. ?將細胞沉淀用其半量體積的預冷電穿孔緩沖液重懸洗滌，4℃ 640 g 離心5 min。3. ?對于穩
電穿孔轉染真核細胞實驗
電穿孔轉染哺乳動物細胞 植物原生質體細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 哺乳動物細胞
電穿孔轉染真核細胞實驗——電穿孔轉染哺乳動物細胞
電穿孔法應用高壓電擊短暫或穩定地將DNA導人細胞，是一種目前大受好評的方法。它適用于多數類型的細胞，既可產生高頻率的穩定轉染，又可產生短暫的基因表達，并且由于其所需步驟甚少，因而比其他技術更為容易。實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材電穿孔儀器電擊池實驗步驟1. ?在完全
電穿孔轉染真核細胞實驗——植物原生質體細胞
電穿孔法應用高壓電擊短暫或穩定地將DNA導人細胞，是一種目前大受好評的方法。它適用于多數類型的細胞，既可產生高頻率的穩定轉染，又可產生短暫的基因表達，并且由于其所需步驟甚少，因而比其他技術更為容易實驗材料原生質體細胞試劑、試劑盒電穿孔緩沖液原生質溶液儀器、耗材尼龍篩網錐形管實驗步驟1. ?將小心切成
真核細胞轉染實驗
真核細胞的轉染 實驗材料 真核細胞 試劑、試劑盒 脂質體 轉染液
真核細胞轉染實驗
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法，觀測外源蛋白的表達（綠色熒光蛋白），為染色準備實驗材料。實驗材料真核細胞試劑、試劑盒脂質體 轉染液儀器、耗材CO2孵箱 離心管 6孔板
電穿孔轉染 DNA 實驗
實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養液試劑、試劑盒 Giemsa 染液甲醇磷酸鹽緩沖液丁酸鈉載體 DNA細胞生長培養基儀器、耗材 組織培養皿基因脈沖器 II電穿孔設備與電轉化池Sorvall H1000B 轉子或類似設備實驗步驟 材料緩沖液與溶液貯存液、緩沖液與試劑的成分見附錄 1。稀釋貯存液至所需
電穿孔轉染 DNA 實驗
電穿孔可以有效地轉染磷酸鈣-DNA 沉淀物等其他方法轉染效果不好的細胞系。但是，與其他轉染方法一樣，未使用過的細胞系進行電穿孔轉染的實驗條件要經過優化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料指數生長的哺乳動物細胞培養液試劑、試劑盒Giem
電穿孔轉染 DNA 實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養液 試劑、試劑盒 Giemsa 染液 甲醇 磷酸鹽緩沖液
真核細胞的轉染實驗步驟
1. ?在6孔板中接種1~3×105細胞/孔，加入2ml完全培養基，置CO2孵箱中37℃培養過夜。 2. ?待細胞長到50-80%單層時，在無菌離心管中配制如下溶液： i. ?溶液A：將4?g待轉染的超純DNA稀釋到250?l無血清培養基中，靜置5min ii. ?溶液B：將2-25?l Lipo