超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的,2 mg/ml 的牛血清蛋白(BSA)樣品 2 ml 離心 30 min 可使體積濃縮至 50 ul 以下,然而濃縮的時間依所用超濾膜的類型、緩沖液的組成以及蛋白質的種類和濃度等因素而定。通過向濃縮的蛋白質溶液中加入新緩沖液及再離心,能很方便地更換蛋白質溶液的緩沖液和脫鹽,四種型號濃縮器 Centricon-3、10、30 和 Centricon-100 分別能截留平均分子量為 3,10, 30 和 100 kD 的蛋白質組分。實驗材料 蛋白質溶液試劑、試劑盒 儀器、耗材 Amicon Centricon 微型濃縮器磁力攪拌器和攪拌子......閱讀全文
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的,2 mg/ml
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
超濾法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的,2 mg
超濾法(ultrafiltration)分離明膠蛋白水溶液
一、實驗目的1.熟悉超濾的基本原理、板式超濾器的結構及基本流程2.了解超濾過程中的影響因素如溫度、壓力、流量及物料分子量等因素對超濾通量的影響3.了解超濾器污染的原因及其對策 二、實驗原理 超濾的技術原理近似機械篩分。當溶液體系由水泵進入超濾器時,在超濾器內的膜表面發生分離,溶劑(水)和其他
透析法濃縮蛋白質溶液
實驗方法原理透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶液盛在一個半透膜袋內,此膜能防止蛋白質丟失而無論在常壓或減壓下可與周圍的緩沖溶液進行溶質交換。除小體積樣品之外,根據擴散原理進行的透析法非常耗時,因此蛋
透析法濃縮蛋白質溶液
透析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶
透析法濃縮蛋白質溶液
實驗方法原理 透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶液盛在一個半透膜袋內,此膜能防止蛋白質丟失而無論在常壓或減壓下可與周圍的緩沖溶液進行溶質交換。除小體積樣品之外,根據擴散原理進行的透析法非常耗時,因此
什么是超濾法?
超濾法?超濾是利用半透膜的微孔結構,以一定的外界壓力(0.1~0.5 MPa)為推動力,實現對物質的選擇性分離、回收的膜分離方法。在污水處理中主要用于分離分子量大于500、直徑為0.005~10μm的大分子和膠體,如酶、蛋白質、病毒等中低濃度的高分子溶解態及膠體態污染物的分離與回收。超濾技術由于操作
蛋白質溶液濃度怎么算
你想:最開始的濃度假設是xug/mL那么取了1ml蛋白質溶液,稀釋到了100ml,則濃度為x/100 ug/mL再取0.6mL,加入0.4ml蒸餾水和5ml考馬斯后,濃度為x/100 *0.6/6故x/100 *0.6/6 =12.777那么x=12.777*100*6/0.6ug/mL
水溶液酸堿中和法(中和法)(一)
一、定義????以酸堿中和反應為基礎的容量分析法稱為酸堿中和法(亦稱酸堿滴定法)。二、原理????以酸(堿)滴定液,滴定被測物質,以指示劑或儀器指示終點,根據消耗滴定液的濃度和毫升數,可計算出被測藥物的含量。????反應式: ?H+?+ OH-?→←?H2O三、酸堿指示劑(一)指示劑的變色原理???
水溶液酸堿中和法(中和法)(二)
七、滴定液的配制、標定(一)鹽酸滴定液????1.配制 ?間接法配制????2.標定 ?用基準無水碳酸鈉標定,以甲基紅-溴甲酚綠混合指示液指示終點。(二)硫酸滴定液????1.配制 ?間接法配制????2.標定 ?照鹽酸滴定液項下的方法標定。(三)氫氧化鈉滴定液????1.配制 ?間接法配制????
實驗室純水設備純化水超濾法
實驗室純水設備水純化一般的常見水純化方法有:離子交換法,活性碳吸附法,微孔過濾法,超濾法和反滲透法,本篇文章小編為您介紹超濾法相關內容介紹:首先為您介紹下微孔薄膜微孔薄膜是依其孔徑大小來去除顆粒,而超濾(UF)薄膜則是一個分子篩,它以尺寸為基準,讓溶液通過極細微的濾膜,以達到分離溶液中不同大小分子的
概述超濾法的測定血漿蛋白結合率
超濾法與平衡透析法相似,也是研究蛋白質與小分子結合作用的常用方法。該方法是在壓力差的驅動下,藥物分子擴散透過半透膜。超濾法的最大優點是實現血漿中游離小分子的快速分離、用時短,與平衡透析法相比,大大提高了分離速率。但該方法也同樣存在Gibbs-Donna效應、非特異性的透析設備表面的藥物吸附效應以
超濾原理的超濾應用
在超濾過程中,水溶液在壓力推動下,流經膜表面,小于膜孔的溶劑(水)及小分子溶質透水膜,成為凈化液(濾清液),比膜孔大的溶質及溶質集團被截留,隨水流排出,成為濃縮液。超濾過程為動態過濾,分離是在流動狀態下完成的。溶質僅在膜表面有限沉積,超濾速率衰減到一定程度而趨于平衡,且通過清洗可以恢復。超濾是一
方案14-蛋白質陣列:用“三明治法”研究復合體溶液
實驗材料捕獲抗體檢測雞尾酒混合液試劑、試劑盒裂解緩沖液磷酸鹽緩沖液含40%甘油的PBS含 0.01g ml BSA的PBS含 500 mmol L 甘氨酸含0.1% Tween的PBS含 1% BSA的PBST儀器、耗材偶聯有蛋白 G 或蛋白 A 珠子的親和層析柱設備BSA-NHS玻片離心機熒光片掃
生物大分子制備常用的樣品濃縮方法
1、減壓加溫蒸發濃縮通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用于一些不耐熱的生物大分子的濃縮。?2、空氣流動蒸發濃縮空氣的流動可使液體加速蒸發,鋪成薄層的溶液,表面不斷通過空氣流;或將生物大分子溶液裝入透析袋內置于冷室,用電扇對準吹風,使透過膜外的溶劑不沁
PEG聚乙二醇濃縮的原理
蛋白質濃縮濃縮 生物大分子在制備過程中由于過柱純化而樣品變得很稀,為了保存和鑒定的目的,往往需要進行濃縮。常用的濃縮方法的:減壓加溫蒸發濃縮通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用于一些不耐熱的生物大分子的濃縮。空氣流動蒸發濃縮 空氣的流動可使液體加速
超濾法檢測體外多胺結合蛋白的分析
實驗概要本試驗描述了使用大腸桿菌或釀酒酵母產生的鳥氨酸脫羧酶抗酶蛋白和放射性多胺來衡量多胺直接結合鳥氨酸脫羧酶抗酶蛋白的效率。實驗原理多胺是所有活細胞內的脂質陽離子小分子化合物,以腐胺、精脒和精胺為主要代表。已揭示在某些重要的生物過程中,例如DNA、RNA和蛋白質的合成中,多胺可能具有一定的作用。但
分離純化蛋白質的分離方法介紹
* 透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。 * 超濾法,應用正壓或離心力使蛋白質溶液透過有一定截留分子量的超濾膜,達到濃縮蛋白質溶液的目的。 *丙酮、乙醇等有機溶劑沉淀法,可破壞蛋白質的水化層,在0~4℃低溫下,使蛋白質沉淀。環境溫度高等不良因素影響下,有
蛋白質濃度很低,應該用什么方法來濃縮?
蛋白質的濃縮有很多方法。大致有超濾法,沉淀法和透析法。超濾比較溫和,對蛋白質不會有修飾和改變,蛋白的種類一般不會有丟失。它的缺點是總樣品的量可能會減少(被膜所吸附)。另外超濾對樣品的要求比較高。甘油,去垢劑都會堵塞濾膜,影響超濾的效果。沉淀法比較快速,容易操作,對鹽,甘油,去垢劑的耐受性好。缺點是可
溶液濃度的表示法及其計算
1.百分濃度指所有溶質的質量或體積占溶液總質量或總體積的百分比來表示該溶液的濃度。(1)質量-質量百分濃度:指100g溶液中,所含溶質的克數,符號%(g/g)。(2)體積-體積百分濃度:指100ml溶液中所含溶質的毫升數,符號%(ml/ml)。2.質量-體積濃度通常指1L溶液中所含溶質的克數,符號m
溶液濃度的表示法及其計算
1.百分濃度指所有溶質的質量或體積占溶液總質量或總體積的百分比來表示該溶液的濃度。(1)質量-質量百分濃度:指100g溶液中,所含溶質的克數,符號%(g/g)。(2)體積-體積百分濃度:指100ml溶液中所含溶質的毫升數,符號%(ml/ml)。2.質量-體積濃度通常指1L溶液中所含溶質的克數,符號m
生物大分子的濃縮干燥與保存方法
一、樣品的濃縮 生物大分子在制備過程中由于過柱純化而樣品變得很稀,為了保存和鑒定的目的,往往需要進行濃縮。常用的濃縮方法的: 1、減壓加溫蒸發濃縮 通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用于一些不耐熱的生物大分子的濃縮。 2、空氣流動蒸發濃縮空
蛋白濃縮方法基本
蛋白濃縮方法基本有:?丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……?1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。?2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!?3,硫酸銨沉淀法:利用高濃
蛋白濃縮(protein-concentration)基本方法
蛋白濃縮方法基本有:丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法:得有特異性抗體! 3.硫酸銨沉淀法
維持蛋白質溶液穩定的因素有哪些
蛋白質溶液穩定的主要因素是蛋白質分子表面帶有水化膜。維持蛋白質溶液穩定的因素是水化膜和同種電荷。由于蛋白質的表面有很多親水基團,會吸引很多的水分子,形成水化膜,使蛋白質顆粒不容易聚集起來,另一方面蛋白質分子在一定的PH值溶液中往往帶有同種電荷而相互排除,因此,蛋白質溶液是穩定的親水膠體。根據蛋白質膠
維持蛋白質溶液穩定的因素有哪些
蛋白質溶液穩定的主要因素是蛋白質分子表面帶有水化膜。維持蛋白質溶液穩定的因素是水化膜和同種電荷。由于蛋白質的表面有很多親水基團,會吸引很多的水分子,形成水化膜,使蛋白質顆粒不容易聚集起來,另一方面蛋白質分子在一定的PH值溶液中往往帶有同種電荷而相互排除,因此,蛋白質溶液是穩定的親水膠體。根據蛋白質膠
超濾(1)
超濾是以壓力為推動力的膜分離技術之一。以大分子與小分子分離為目的,膜孔徑在20-1000A°之間。中空纖維超濾器(膜)具有單位容器內充填密度高,占地面積小等優點。基本信息概述引在超濾過程中,水溶液在壓力推動下,流經膜表面,小于膜孔的溶劑(水)及小分子溶質透水膜,成為凈化液(濾清液),比膜孔大的溶質及
超濾(2)
定義超濾是采用中空纖維過濾新技術,配合三級預處理過濾清除自來水中雜質;超濾微孔小于0.01微米,能徹底濾除水中的細菌、鐵銹、膠體等有害物質,保留水中原有的微量元素和礦物質。原理超濾是一種加壓膜分離技術,即在一定的壓力下,使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特制的薄膜,而使大分子溶質不能透過,留在膜的一邊
超濾(3)
優缺點超濾膜元件采用世界著名膜公司產品,確保了客戶得到目前世界上最優質的有機膜元件,從而確保截留性能和膜通量,超濾設備控制系統可根據用戶具體使用要求進行個性化設計,結合先進的控制軟件,現場在線集中監控重要工藝操作參數,避免人工誤操作,多方位確保系統長期穩定運行。由于每根超濾組件在出廠前加入保護液,使