丙酮酸激酶的測定實驗
實驗方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸轉移酶。有其他激酶的伴隨,這個反應的直接實驗:例如,可以應用 P32 標記。由分光光度測定出,這個反應與 LDH 反應偶聯,繼續 NADH 的氧化反應:實驗材料 酶樣品試劑、試劑盒 三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品 25 ℃ 時,于 340 nm 處吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。注意事項 其他 試劑:0.1 mol/L 三乙醇胺-HCl/KOH,pH 7.6(氯化三乙醇胺,Mr=185.7;18.6 g 溶于 800 ml H2O,用 1 mol/L KOH 調至 pH 7.6,再補充到 1000 ml)0.5 mol/L KCl(Mr=74.6;373 mg 溶于 10 ml 水中)0.25 mol/L M......閱讀全文
丙酮酸激酶測定介紹
丙酮酸激酶測定:包括熒光斑點試驗和PK活性檢測。 (1)原理:在二磷酸腺昔(ADP)存在的條件下丙酮酸激酶(PK),催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)轉化成丙酮酸,在輔酶Ⅰ還原型(NADH)存在情況下,丙酮酸被LDH轉化為乳酸醫學`教育網搜集整理。若標記熒光于NADH上,此時有熒光的NADH變為無熒光的
丙酮酸激酶的作用
丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP變為ATP和丙酮酸,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,有M型和L型兩種同工酶,M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織;M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死后,PK釋放入血,PK的測定可用于診斷心肌梗死。
丙酮酸激酶測定介紹
(1)原理:在二磷酸腺昔(ADP)存在的條件下丙酮酸激酶(PK),催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)轉化成丙酮酸,在輔酶Ⅰ還原型(NADH)存在情況下,丙酮酸被LDH轉化為乳酸。若標記熒光于NADH上,此時有熒光的NADH變為無熒光的NAD. 參考值:正常熒光在20min內消失。l5.0±1.99I
丙酮酸激酶活性測定
【測定原理】PK 活性測定的原理基本同PK 熒光斑點試驗,主要不同的是用紫外分光光度法定量測定結果。在10 分鐘內、波長340nm 下,測定孵育液中NADH 吸光度的變化,通過測定單位時間內NADH 減少的量來計算PK 的活性。由于PK 是一種變構酶,在低濃度磷酸烯醇丙酮酸(PEP)時,PK
丙酮酸激酶的測定實驗
實驗方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸轉移酶。有其他激酶的伴隨,這個反應的直接實驗:例如,可以應用 P32 標記。由分光光度測定出,這個反應與 LDH 反應偶聯,繼續 NADH 的氧化反應:實驗材料 酶樣品試劑、試劑盒 三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH儀器
丙酮酸激酶的測定實驗
實驗方法原理PK,ATP:丙酮酸磷酸轉移酶。有其他激酶的伴隨,這個反應的直接實驗:例如,可以應用 P32?標記。由分光光度測定出,這個反應與 LDH 反應偶聯,繼續 NADH 的氧化反應:實驗材料酶樣品試劑、試劑盒三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH儀器、耗材
丙酮酸激酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸轉移酶。有其他激酶的伴隨,這個反應的直接實驗:例如,可以應用 P32 標記。由分光光度測定出,這個反應與 LD
紅細胞丙酮酸激酶活性
紅細胞丙酮酸激酶活性介紹: 丙酮酸激酶為四聚體,是提供紅細胞能量的重要的酶。缺乏此酶,紅細胞因能量消耗而破壞。采用比色法。紅細胞丙酮酸激酶活性正常值: a)比色法:10.1~20U/gHb; b)熒光斑點法:陰性。 紅細胞丙酮酸激酶活性臨床意義: 本試驗可作為丙酮酸激酶缺陷的診斷試驗。 紅
丙酮酸激酶測定的原理
在二磷酸腺苷(ADP)存在的條件下丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)轉化成丙酮酸,在輔酶Ⅰ還原型(NADH)存在情況下,丙酮酸被LDH轉化為乳酸,若標記熒光于NADH上,此時有熒光的NADH變為無熒光的NAD。
關于丙酮酸激酶的簡介
丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK),別名丙酮酸磷轉稱酶、磷酸丙酮酸激酶,其分子質量為:228kDa。在糖酵解系統里,它是催化形成第二個ATP反應的酶。能以磷酸烯醇(phosphoenolpyruv -ate)丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP·ΔGo1=-7.5kcal。除需要二價
簡述丙酮酸激酶的作用
丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP變為ATP和丙酮酸,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,有M型和L型兩種同工酶,M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織;M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死后,PK釋放入血,PK的測定可用于診斷心肌梗死。
丙酮酸激酶的功能作用
丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP變為ATP和丙酮酸,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,有M型和L型兩種同工酶,M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織;M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死后,PK釋放入血,PK的測定可用于診斷心肌梗死。
丙酮酸激酶測定的原理
原理:在二磷酸腺苷(ADP)存在的條件下丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)轉化成丙酮酸,在輔酶Ⅰ還原型(NADH)存在情況下,丙酮酸被LDH轉化為乳酸,若標記熒光于NADH上,此時有熒光的NADH變為無熒光的NAD。
紅細胞丙酮酸激酶缺陷癥
(1)篩檢試驗:PK熒光斑點法:中等缺乏者(雜合子型)20~60min熒光消失,嚴重缺乏者(純合子型)60min熒光不消失。 (2)確診試驗:PK活性檢測,中等缺乏者(雜合子型)為正常活性的25%~50%,嚴重缺乏者(純合子型)為正常活性的25%以下。
丙酮酸激酶缺乏癥概述
1953年Dacie等首次描述了一組稱為先天性非球形細胞溶血性貧血的異質性疾病。1954年Selwgn和Daice根據自身溶血試驗將這組疾病分為兩型,第Ⅰ型自身溶血僅輕度增高 加葡萄糖后可以糾正,第Ⅱ型自身溶血顯著增高,加葡萄糖不能糾正 1960年De Gruchy等發現第Ⅱ型患者加三磷腺苷(A
丙酮酸激酶的臨床意義
(1)急性心肌梗死發病后2h PK活性開始升高,22~24h PK活性達高峰(為對照值3倍),第2天達峰值(為對照值的4倍);48~72h后逐漸恢復正常。血清PK活性升高對急性心肌梗死的特異性較高。此外,由于急性心肌梗死后PK活性開始升高和恢復正常均較早,因此可用于急性心肌梗死延展或再梗死的診斷。但
丙酮酸激酶的基本信息
丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK),別名丙酮酸磷轉稱酶、磷酸丙酮酸激酶,其分子質量為:228kDa。在糖酵解系統里,它是催化形成第二個ATP反應的酶。能以磷酸烯醇(phosphoenolpyruv- ate)丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP·ΔGo1=-7.5kcal。除需要二價金屬
丙酮酸激酶的基本信息
丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP變為ATP和丙酮酸,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,有M型和L型兩種同工酶,M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織;M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死后,PK釋放入血,PK的測定可用于診斷心肌梗死。
丙酮酸激酶的臨床意義
(1)急性心肌梗死發病后2h PK活性開始升高,22~24h PK活性達高峰(為對照值3倍),第2天達峰值(為對照值的4倍);48~72h后逐漸恢復正常。血清PK活性升高對急性心肌梗死的特異性較高。此外,由于急性心肌梗死后PK活性開始升高和恢復正常均較早,因此可用于急性心肌梗死延展或再梗死的診斷。但
丙酮酸激酶測定臨床意義
1.急性心肌梗死發病后2h PK活性開始升高,22~24h PK活性達高峰(為對照值3倍),第2天達峰值(為對照值的4倍);48~72h后逐漸恢復正常。血清PK活性升高對急性心肌梗死的特異性較高。此外,由于急性心肌梗死后PK活性開始升高和恢復正常均較早,因此可用于急性心肌梗死延展或再梗死的診斷。
丙酮酸激酶的基本信息
丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK),別名丙酮酸磷轉稱酶、磷酸丙酮酸激酶,其分子質量為:228kDa。在糖酵解系統里,它是催化形成第二個ATP反應的酶。能以磷酸烯醇(phosphoenolpyruv- ate)丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP·ΔGo1=-7.5kcal。除需要二價金屬
丙酮酸激酶(PK)熒光斑點試驗
同PK活性測定。酶反應消耗NADH(有熒光)產物NAD+無熒光。因此PK缺乏者的紅細胞熒光消失減慢或不消失。【參考范圍】正常人37℃,25分鐘內熒光消失。【臨床意義】PK缺乏癥雜合子熒光在25~60分鐘消失;純合子熒光在60 分鐘內仍不消失。【評價】本法作為PK缺乏癥的篩查試驗。參考文獻:?1 王鴻
紅細胞丙酮酸激酶測定的原理
丙酮酸激酶熒光斑點試驗:熒光斑點試驗熒光在20分鐘以內消失,其酶活性在正常范圍內;熒光反應液點熒光在30分鐘以上消失者應考慮丙酮酸激酶活性降低,并需進一步用酶定量測定法檢測其酶活性以確診。
生化檢測項目血清丙酮酸激酶介紹
血清丙酮酸激酶介紹:???????? 丙酮酸激酶催化磷酸烯醇丙酮酸酯和ADP轉變成丙酮酸和ATP的磷酸基轉移酶,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,有M型和L型兩種同工酶,M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織;M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死
概述丙酮酸激酶的臨床意義
(1)急性心肌梗死發病后2h PK活性開始升高,22~24h PK活性達高峰(為對照值3倍),第2天達峰值(為對照值的4倍);48~72h后逐漸恢復正常。血清PK活性升高對急性心肌梗死的特異性較高。此外,由于急性心肌梗死后PK活性開始升高和恢復正常均較早,因此可用于急性心肌梗死延展或再梗死的診斷
關于血清丙酮酸激酶的基本介紹
血清丙酮酸激酶催化磷酸烯醇丙酮酸酯和ADP轉變成丙酮酸和ATP的磷酸基轉移酶,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,有M型和L型兩種同工酶,M型又有M1及M2亞型。M1分布于心肌、骨骼肌和腦組織;M2分布于腦及肝臟等組織。L型同工酶主要存在于肝、腎及紅細胞內。心肌細胞壞死后,PK釋放入血,PK的測定可
關于紅細胞丙酮酸激酶測定的簡介
紅細胞丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)是紅細胞糖代謝過程中重要酶之一。在人體組織中,丙酮酸激酶有4種同工酶:L、R、M1、M2,均由相同的亞基組成。L型主要見于肝臟,腎上腺皮質和小腸亦含少量;R型僅存在于紅細胞中;M1型見于骨骼肌、心臟、腦組織;M2型見于胚胎組織、大多數成熟組
丙酮酸激酶缺乏癥的基本介紹
中文名:丙酮酸激酶缺乏癥 英文名:pyruvate kinase deficiency 丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)缺乏癥是發生頻率僅次于G-6-PD缺乏癥的一種紅細胞酶病。現已證實PK缺乏癥是由PK基因異常所致,主要是PK基因點突變 小部分患者表現為缺失或插入ATP缺乏是
關于血清丙酮酸激酶的臨床意義介紹
(1) 血清丙酮酸激酶— 急性心肌梗死發病后2h PK活性開始升高,22-24h PK活性達高峰(為對照值3倍),第2天達峰值(為對照值的4倍);48-72h后逐漸恢復正常。血清PK活性升高對急性心肌梗死的特異性較高。此外,由于急性心肌梗死后PK活性開始升高和恢復正常均較早,因此可用于急性心肌梗
丙酮酸激酶測定的原理及參考值
原理: 在二磷酸腺苷(ADP)存在的條件下丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)轉化成丙酮酸,在輔酶Ⅰ還原型(NADH)存在情況下,丙酮酸被LDH轉化為乳酸,若標記熒光于NADH上,此時有熒光的NADH變為無熒光的NAD。 參考值: 正常熒光在20min內消失。(15.0±1.99