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    預包被載玻片的處理實驗

    試劑、試劑盒 多聚-L-賴氨酸明膠儀器、耗材 載玻片玻璃染色盤實驗步驟 一、多聚賴氨酸包械的栽玻片 1. 如明膠浸泡處理載玻片的方法一樣,清洗載玻片(用玻片架和玻璃染色盤)。2. 配制足量的500 μg/ml 多聚-L-賴氨酸水溶液。3. 逐一浸載玻片于此溶液中。4. 空氣干燥,貯于4℃,一周內使用(塑料的載玻片包裝盒可用作浸液用的盒子)。 二、明膠浸泡處理載玻片 1. 在加有洗滌劑的水中清洗載玻片(25 mm×75 mm)數分鐘,可用任何優質洗滌劑。 2. 在水中浸泡載玻片30 min,在此期間,配制1×明膠浸泡液。 3. 置玻片于玻片架中,并浸于盛有1×明膠浸泡液(4℃)的玻璃染色盤中2 min。浸泡過程須防止玻片上氣泡產生。4. 由浸泡液中取出玻片架,玻片側立......閱讀全文

    原位雜交技術和操作步驟詳細介紹

    原位雜交技術應用于染色體、細胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測,與免疫組化技術的結合應用,能將DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性與樣品的顯微拓撲信息結合起來。1969年Pardue和Gall將放射性標記的探針直接應用于純化核酸的雜交,此后得益于分子克隆技術的發展,及不同探針標記系統和檢測系統

    原位雜交技術和操作步驟詳細介紹

    原位雜交技術應用于染色體、細胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測,與免疫組化技術的結合應用,能將DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性與樣品的顯微拓撲信息結合起來。1969年Pardue和Gall將放射性標記的探針直接應用于純化核酸的雜交,此后得益于分子克隆技術的發展,及不同探針標記系統和檢測系統

    一體化細胞免疫熒光技術介紹(二)

    一體化免疫熒光技術應用舉例超過800篇參考文獻證明了使用ibidi產品進行免疫熒光檢測的優勢。1. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) cultured under flow conditions in μ-Slide I 

    用于檢測植物組織RNA的原位雜交法

    用于檢測植物組織RNA的原位雜交法(一)組織切片制備l      植物組織的甲醛固定和包埋1.將植物組織切成小塊,立即放入一個裝有10~50ml固定劑溶液的燒杯中,把燒杯放到真空脫水機內。調節真空度以形成一個溫和的真空,然后慢慢恢復常壓。微量便于固定

    免疫熒光實驗&TIRF成像

      Kindlin-2和talin共同作用于樁蛋白激活整合素的表達  整合素是一種跨膜蛋白,在介導細胞黏附到細胞外基質(ECM)過程中發揮重要的作用。整合素在和配位體結合并發揮作用之前需要被激活。Kindlin和talin如何在非造血細胞中介入激活整合素這一過程的原理并不十分清晰。美國的科研人員發現

    cRNA探針在原位雜交組織化學

    Angerer及其同事們首先應用RNA探針于原位雜交(見Cox et al 1984),核酸探針為單鏈的RNA分子,產生自具有質粒逆轉錄系統的cDNA克隆(圖20-2)。由于它是單鏈的,不像雙鏈的DNA探針,在溶液中不會再退火(reanneal),因此,較大百分比的探針可參與雜交反應,較cDNA探針

    快速高爾基染色試劑盒(神經元和膠質細胞)使用說明

    Golgi-Cox浸染法是研究神經元和膠質細胞正常和非正常形態最有效的方法之一。使用Golgi技術,在藥物處理過的動物腦中和因神經疾病死亡的病人腦中發現了神經樹突和樹突棘微小的形態改變。然而Golgi染色法不可靠且費時,成為這種方法廣泛應用的障礙。FD Rapid GolgiStainTM 

    預包被載玻片的處理實驗

    由多聚賴氨酸包被(Thermo公司產品),具有持久的生物粘附性,可附冰凍和石蠟包埋的切片,可隨后離心并進行細胞學印跡試驗的載玻片。試劑、試劑盒多聚-L-賴氨酸明膠儀器、耗材載玻片玻璃染色盤實驗步驟一、多聚賴氨酸包械的栽玻片 1.  如明膠浸泡處理載玻片的方法一樣,清洗載玻片(用玻

    原位雜交組織化學實驗技術4

     二、生物素標記cRNA探針在原位雜交組織化學中的應用  (一)光敏生物素標記cRNA探針的應用  以線性質粒DNA為模板合成未加標記物的cRNA探針,使其最終濃度為0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再與等體積的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦鹵素燈下,距離光源20c

    方案27.8 原位雜交中的放射自顯影技術

                實驗方法原理 將同位素標記探針與固定于顯微鏡載玻片上的細胞進行雜交,然后通過放射自顯影將雜交位點顯影。 實驗材料

    原位雜交中的放射自顯影技術

                實驗方法原理 將同位素標記探針與固定于顯微鏡載玻片上的細胞進行雜交,然后通過放射自顯影將雜交位點顯影。 實驗材料

    免疫熒光技術

    實驗方法原理 直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存在與否及其所在部位。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBS伊文氏蘭儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. 標本經固定后,PBS洗滌3×3 分鐘;2. 加熒光素標記的抗體,濕

    免疫熒光技術——直接法

    免疫熒光技術可應用于:(1)研究特異蛋白抗原在細胞內分布;(2)對抗原進行細胞定位;(3)對特定抗原進行定量檢測。內容來源:組織培養和分子細胞學技術。(北京出版社)實驗方法原理直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存

    免疫細胞化學常用試劑介紹-2

    三、顯色液  免疫細胞化學中,由于抗原-抗體反應所形成的復合物本身無色,無法直接觀察,因而需借助于某些化學基團的呈色作用,使其得以顯示,以利于在顯微鏡下觀察。常用的顯色液有:  1.DAB(Diaminobenzidine)顯色液  DAB即3,3-二氨基苯聯胺  試劑:DAB(常用四鹽酸鹽) 50

    分子雜交技術(三)

    五、核酸分子雜交的類型  隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板

    分子雜交技術(三)

    五、核酸分子雜交的類型  隨著基因工程研究技術的迅猛發展,新的核酸分子雜交類型和方法在不斷涌現和完善。核酸分子雜交可按作用環境大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應的一條核酸鏈先固定在固體支持物上,一條反應核酸游離在溶液中。固體支持物有硝酸纖維素濾膜、尼龍膜、乳膠顆粒、磁珠和微孔板

    方案27.8 原位雜交中的放射自顯影技術

    實驗方法原理將同位素標記探針與固定于顯微鏡載玻片上的細胞進行雜交,然后通過放射自顯影將雜交位點顯影。實驗材料糖原瓊脂糖二硫蘇糖醇二硫蘇糖醇試劑、試劑盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-異戊醇乙酸鈉無水乙醇層析柱流動相緩沖液苯酚氯仿-界戊醇閃爍液組織洗滌液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K緩沖液蛋白酶

    免疫組化實驗防脫片的處理方法

    脫片是免疫組織化學中經常遇到的問題(尤其是腦組織冰凍切片),一般來說脫片主要有以下幾種原因:1. 組織固定、脫水、透明不充分2.組織切片過厚3.組織切片有折疊4.過度的熱抗原修復(高壓、微波、水煮)處理或抗原修復液的pH偏高5.操作過程中,沖洗方法不正確等在實際操作的過程中,除了要注意以上幾點之外,

    表達譜基因芯片實驗

    表達譜基因芯片可應用于:(1)疾病診斷;(2)新藥開發;(3)環境保護。實驗方法原理按照預定位置固定在固相載體上很小面積內的千萬個核酸分子所組成的微點陣陣列。在一定條件下,載體上的核酸分子可以與來自樣品的序列互補的核酸片段雜交。如果把樣品中的核酸片段進行標記,在專用的芯片閱讀儀上就可以檢測到雜交信號

    IHC全攻略2:如何制備樣品

      對于每一項IHC/ICC研究,組織和細胞樣本的制備都不可掉以輕心。為了方便孵育,整個組織必須被切成超薄(5-10 μm)的切片,或切成小塊用于整體免疫組化(whole mount IHC)。對于ICC實驗,在開始染色步驟之前,細胞必須附著在顯微鏡載玻片或蓋玻片上。樣本制備也與固定方法密切

    線粒體電鏡照片觀察實驗

                實驗方法原理 線粒體同內質網一樣,除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外,其他所有細期線粒體(mitochodri)。一個細胞中線粒體的數目、形狀和大小常因細胞和生理狀況等不同而有較大的

    線粒體電鏡照片觀察實驗

                實驗方法原理 線粒體同內質網一樣,除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外,其他所有細期線粒體(mitochodri)。一個細胞中線粒體的數目、形狀和大小常因細胞和生理狀況等不同而有較大的

    常用細胞凋亡檢測方法(圖)-3

    過氧化物酶標記測定法原理:脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了報告酶(過氧化物酶或堿性磷酸酶)的抗地高辛抗體結合。在適合底物存在下,過氧化物酶可產生很強的顏色

    石蠟切片的酶免疫組化注意事項

    一. 石蠟切片在染色過程中出現脫片現象?一般來說,如果用多聚賴氨酸包被過的片子做正常免疫組織化學染色的話是不會掉片子的。但如果要做抗原修復的話,如果片子處理不好的話是有可能掉片子的。你可以試試一下的方法:1.一般用APES:丙酮=1:50的處理液來處理片子,處理5min左右,然后水洗,烘干既可用于貼

    單個神經細胞標記實驗

    用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982),在該文獻中也可找到更詳細的技術指導(也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦試劑、試劑盒利多卡因Karnovsky 型固定液甲酚紫儀器、耗材微

    單個神經細胞標記實驗

    用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗             實驗方法原理 本例所用技術和結果引自B

    單個神經細胞標記實驗

    實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982),在該文獻中也可找到更詳細的技術指導(也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦                 &nb

    線粒體電鏡照片觀察實驗

    電子顯微鏡常用的有透射電鏡(transmissionelectronmicroscope,TEM)和掃描電子顯微鏡。與光鏡相比電鏡用電子束代替了可見光,用電磁透鏡代替了光學透鏡并使用熒光屏將肉眼不可見電子束成像。實驗方法原理線粒體同內質網一樣,除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外,其他所有細期線粒體(

    線粒體電鏡照片觀察實驗

    實驗方法原理線粒體同內質網一樣,除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外,其他所有細期線粒體(mitochodri)。一個細胞中線粒體的數目、形狀和大小常因細胞和生理狀況等不同而有較大的差別,如某種海藻中只有一個線粒體,玉米根品中有100~3000 個,而海膽卵母細胞中線粒體多達30 萬個;在光學顯微鎮粒

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