膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—GFC/IEC/SDSPAGE...(一)
膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 實驗試劑、試劑盒 分離緩沖液增溶緩沖液洗脫緩沖液Laemmli 樣品緩沖液膠段沖洗緩沖液酶解緩沖液肽抽提緩沖液實驗步驟 3.1 膜的分離因為在研磨材料時,要分離的膜組分以小囊泡形式與可溶的胞質蛋白質混合在一起,所以,最好在分離、鑒定膜蛋白前將這些胞質蛋白質去除掉。為了達到這個目的,我們需要用可穿透這些囊泡的達到臨界微胞濃度(CMC) 的去垢劑溶液來分離膜組分( 見注釋 1) ,使包覆親水性蛋白質慢慢地向外擴散。增溶緩沖液還含有一種離液鹽和一種二價金屬螯合劑用來解離松散結合在膜周邊的蛋白質。這里所介紹的分離植物質膜的實驗過程見圖 22-1。( 1 ) 將 0.5~5 mg 的膜組分懸浮在分離緩沖液中(濃度為:0.2 mg/ml) ,4°C 攪拌混勻。( 2 ) 測試時間可長達 4 h。( 3 ) 經過處理后,將膜懸......閱讀全文
膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE ...(一)
膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 實驗試劑、試劑盒?分離緩沖液增溶緩沖液洗脫緩沖液Laemmli 樣品緩沖液膠段沖洗緩沖液酶解緩沖液肽抽提緩沖液實驗步驟 3.1 膜的分離因為在研磨材料時,要分離的膜組分以小囊泡形式與可溶的胞質蛋白質混合在
膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE ...(二)
2. GFC/AEC/SDS-PAGE Separation分離復雜的蛋白質混合物,如膜粗提物,需要兩個連續的色譜層析步驟。因此,必須獲得較大量(約 5 mg) 的增溶蛋白質樣品。這也有利于低豐度的蛋白質在 SDS-PAGE 電泳泳道上被分辨出來。由于分子篩色譜層析(GFC) 會稀釋樣品,因
膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-...
試劑、試劑盒:分離緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?增溶緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?洗
膜蛋白的分離、鑒定及其功能分析—SDS-PAGE 和MALDI-TOF-MS 實驗
試劑、試劑盒分離緩沖液增溶緩沖液洗脫緩沖液Laemmli 樣品緩沖液膠段沖洗緩沖液酶解緩沖液肽抽提緩沖液實驗步驟3.1 膜的分離因為在研磨材料時,要分離的膜組分以小囊泡形式與可溶的胞質蛋白質混合在一起,所以,最好在分離、鑒定膜蛋白前將這些胞質蛋白質去除掉。為了達到這個目的,我們需要用可穿透這些囊泡的
膜蛋白分離方法
1 細胞質膜資料1895 年 ,Overton 從研究細胞透性得出 " 細胞膜由連續的脂類物質組成 " 。1925 年 Gorter&Grendel: 用脂單分子膜技術測定細胞膜中脂分子的總面積,提出: "細胞膜是由雙層脂分子組成 " 。1935 年 Danielli&Davson :從測定膜的表面
病原菌的分離鑒定及其疫苗的制備(2)
2 .病原菌的分離與培養分離病原菌的材料要求是具有典型患病癥狀的活的或剛死不久的患病生物,病原菌的分離方法如下。體表分離:先將病灶部位表面用 70% 酒精酒精棉球擦拭消毒或取病灶部分小片或 用經酒精燈灼燒的解剖刀燙燒消毒,再 用接種環刮取病灶深部組織或直接挑取部分深部患病組織,接種于普通肉湯培養基增
病原菌的分離鑒定及其疫苗的制備(3)
(二)疫苗制備1 .病原菌的擴大培養與分離液體培養:按配方配制 2216E 液體培養基,將培養基用 三角燒瓶分裝并蓋上棉塞后置 于高壓蒸汽鍋內, 121 ℃ 滅菌 15 ~ 30min ,冷卻后于超凈工作臺內加入 1ml 左右預先制備的病原菌菌液,蓋上棉塞,用搖床于 28~ 30 ℃ 下震蕩(約
病原菌的分離鑒定及其疫苗的制備(1)
一、實驗目的熟悉水產細菌性病原的分離、培養、純化與鑒定的基本方法,了解所分離細菌性病原的形態特征及培養特點,了解細菌性滅活疫苗制備的基本過程。二、實驗材料患白內障病虎紋蛙(或其他患細菌性疾病的水產動物)、健康虎紋蛙、腦膜炎敗血黃桿菌(虎紋蛙白內障病的病原)三、實驗藥品、用具2216E 瓊脂平板、 2
厭氧菌的分離、培養及鑒定(一)
一 摘要: 1.1 實驗內容: 厭氧菌的分離、培養及鑒定; 1.2 目的: 1 掌握厭氧菌的分離、培養及活菌計數的一般方法。 了解厭氧菌菌鑒定的一般方法。 2 復習并鞏固平時所學的微生物知識與技能。 3 培養獨立思考、設計和動手實驗的能力。 二 介紹: 厭氧微生物在自然界分布廣泛,種類繁多,其生理作
細菌膜蛋白的分離
實驗概要本實驗對細菌膜蛋白進行了分離。主要試劑1. Tris-Mg 緩沖液 ?? 10mM Tris-Cl ?? 5mM MgCl2 ?? pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸鈉 (SLS)實驗步驟1. 于20ml 營養肉湯中過夜培養細菌,37℃,200rpm。 2. 1000