鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante ，XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸鹽緩沖液將XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必須特別清潔，配制后放置4℃數天，以不出現沉淀為準。如出現沉淀XC的多聚體形成，應重配。5．0.30Mol/L pH 9.5硼鹽酸緩沖液6．0.1Mol/L硫酸銨液7．0.05Mol/L pH7.4 PBS液實驗步驟1．鐵蛋白的提取 1) 配制2%硫酸銨液，并以1mol/L的NaOH或HCl調pH值，正好為5.85。取1g鐵蛋白溶于100ml的2%硫酸銨液中。 2) 加入20%硫酸鎘，使最終濃度......閱讀全文
鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante
鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante
鐵蛋白免疫電鏡技術原理、材料試劑和操作方法
（一） 原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。（二）材料與試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante ，XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸鹽緩沖液
鐵蛋白免疫電鏡技術
（一）??原理?免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。（二）材料與試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante? XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸鹽
鐵蛋白免疫電鏡技術
一、 原理 免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。 二、材料與試劑 1．馬脾鐵蛋白 2．硫酸銨 3．硫酸鎘 4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante? XC)以0.30Mol/L pH 9.5
免疫鐵蛋白電鏡技術
1．基本原理 鐵蛋白的分子量460kD，為一種含鐵(約占23%)的蛋白質。直徑10―12nm。目前常用的間接免疫染色技術是應用低分子量的雙功能試劑將第二抗體與鐵蛋白相連，制備標記抗體。此復合物既保留了抗體的免疫活性，又因鐵蛋白含有2000―3000個鐵原子的致密鐵離子核心，形成四個圓形致密區，所以
免疫學技術：鐵蛋白免疫電鏡技術
一、 原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。二、材料與試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante? XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸鹽緩沖液將
酶免疫電鏡技術原理、材料和操作方法
（一）原理酶免疫電鏡技術是利用酶的高效率的催化作用對其底物的反應形成不同的電子密度，借助于電子顯微鏡觀察，證明酶的存在，從而對抗原進行定位。（二）材料與試劑1．PBS液取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液取5mgDAB(3、
免疫鐵蛋白技術的技術特點和原理
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接，利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
非標記抗體免疫電鏡技術原理、材料和操作方法
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
鐵蛋白免疫電鏡實驗
鐵蛋白免疫可應用于：（1）檢測抗原；（2）定位細胞內鐵蛋白抗體位置。實驗方法原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。實驗材料馬脾鐵蛋白試劑、試劑盒硫酸銨硫酸鎘雙異氰酸鎘二甲苯硼鹽酸緩沖液硫酸銨液?PBS蒸餾水儀器、耗材
鐵蛋白免疫電鏡實驗
實驗方法原理 免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。實驗材料 馬脾鐵蛋白試劑、試劑盒 硫酸銨硫酸鎘雙異氰酸鎘二甲苯硼鹽酸緩沖液硫酸銨液 PBS蒸餾水儀器、耗材 離心機顯微鏡微孔濾膜實驗步驟 一、材料與試劑準備?1. ?馬
非標記抗體免疫電鏡操作步驟
1．經典法（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H2?
RFLP和RAPD技術原理和操作步驟
原理：DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基因組的限制性內切酶的酶切位點
Southern印跡技術原理和操作步驟
實驗原理:Southern印跡是將DNA片斷從電泳凝膠上直接轉移至膜支持物（如硝酸纖維素膜、尼龍膜）上，使DNA片斷固定的技術。先將DNA經限制性內切酶消化成一系列片段，進行瓊脂糖凝膠電泳，各片段因分子量不同而彼此分開，然后經堿處理凝膠，使DNA的片段被變性、中和并通過毛細作用在高鹽緩沖液中在原位將
非標記抗體免疫電鏡的操作步驟
1．經典法?（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫?血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H
Western－免疫印跡實驗原理和操作步驟
[實驗原理]Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠
免疫電鏡原理和影響因素
（一） 原理免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即采用抗原抗體凝集反應后，再經負染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術。該項技術是利用帶有特殊標記的抗體與相應抗原相結合，在電子顯
免疫酶技術的操作步驟
（1） 用微量移液器分別加待檢血清、陽性對照、陰性對照各100μl于1、2、3孔中，370C水浴箱溫育30min。（2） 用PBS液洗板3次，每次3min，甩干。（3） 每孔加入酶結合物2滴，370C水浴箱溫育30min。（4） 用PBS液洗板3次，每次3min，甩干（5） 每孔分別加入顯色A液、B
免疫熒光技術操作步驟
基本原理將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少，相對使用標記抗體用量偏大。試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)：0.01mol/L，pH7.4熒光標記的抗體溶液：以 0.01mol/L，pH7.4 的 PBS 進行稀釋緩沖甘油：分析純無熒光的甘油
免疫沉淀實驗原理、儀器試劑和操作步驟
（一）原理免疫沉淀是利用抗原抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細胞裂解液或表達上清中相應的蛋白結合后，再與蛋白 A／G（Protein A／G）或二抗偶聯的agaose或Sepharose珠子孵育，通過離心得到珠子－蛋白A／G或二抗－抗體－目的蛋白復合物，沉淀經洗滌后，重懸于電泳上
細胞凍存和復蘇技術原理和操作步驟
一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內和外環境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養液加入保護劑，可使冰點降低。在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水份在凍結前透出細胞。貯存在－130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成
免疫印跡（Western－blotting）實驗原理、試劑和操作步驟
(一)原理Western blot是一種在PVDF或硝酸纖維素（NC）膜上進行的抗原抗體反應。蛋白電泳后，將蛋白轉移至膜上，再與特異性抗體孵育，洗去游離的抗體，然后和酶標記的二抗孵育，再進行底物顯色。由于抗原抗體反應特異性好，親合力高，Western blot檢測的靈敏度較高，尤其是采用
免疫鐵蛋白技術
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接，利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
免疫鐵蛋白技術
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術，鐵蛋白免疫電鏡技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1. 馬脾鐵蛋白2. 硫酸銨3. 硫酸鎘4. 雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol
免疫鐵蛋白技術
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術，鐵蛋白免疫電鏡技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1. 馬脾鐵蛋白2. 硫酸銨3. 硫酸鎘4. 雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol
免疫電鏡技術
近年來，免疫學方法與電鏡技術相結合，形成了一種免疫電鏡技術(Immunoelec-tronmicroscopy，IEM)，使抗原定位達到了亞細胞水平。該技術由以下環節組成：(一) 組織準備 用于免疫電鏡檢測的組織多種多樣，所以各自在組織制備時都具有其特點。一般講，組織力新鮮并進行無活動力狀態處理，例
免疫鐵蛋白技術的定義和應用
中文名稱免疫鐵蛋白技術英文名稱immunoferritin technique定 義將抗體以共價鍵與鐵蛋白連接，利用電子密度大的鐵蛋白在電子顯微鏡下為相應的抗原定位提供標記的方法。鐵蛋白也可以標記抗原或其他蛋白質。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物，在不改變抗原抗體的免疫反應特異性，亦不降低酶活性條件下，與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
免疫電鏡相關技術實驗—病毒顆粒免疫電鏡技術
病毒是極微小的生物體，用電鏡觀察時，由于其變形、損傷或雜質的存在，以及標本中病毒的數量有限，只靠其形態特點較難確切辨認。為了提高辨認的準確性，可應用特異性抗體，使其與病毒結合，在電鏡下可清晰地辨認特異性抗體及其結合的病毒。這種將免疫學檢測方法應用于電鏡檢查的技術就是免疫電鏡技術 (Immunoele